[發明專利]一種不溶性絲素蛋白膜的制備方法

無效

• 申請號: 200810059877.2
• 申請日: 2008-02-26
• 公開（公告）號: CN101234213A
• 公開（公告）日: 2008-08-06
• 發明（設計）人: 馮新星;陳建勇;朱海霖;張建春;郭玉海;張華鵬
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學
• 主分類號: A61L15/32
• 分類號: A61L15/32;A61L27/22;A61L27/60;A61L33/12;A61K47/42;C08L89/00;C08K3/22;C08J5/18
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 林懷禹

技術領域

本發明涉及絲素蛋白膜的制備方法，特別是涉及一種不溶性絲素蛋白膜的制備方法。

背景技術

蠶絲是一種天然高分子材料，絲素占蠶絲的70-80％，是經蠶絲脫膠后而得到，絲素和人體具有良好的生物相容性和可降解性，在生物領域有著廣泛的應用。絲素為原料制得的絲素膜，可用作人工皮膚，抗凝血材料，藥物控制釋放材料等。純絲素溶液制得的絲素膜水溶性大，強度低，經甲醇處理可減少絲素膜的溶失率，提高絲素膜的強度，但制得的絲素膜較脆，強度不高，斷裂伸長率較低。為改善絲素膜的性能，常用的方法是將絲素和其它材料復合成膜，如：絲素和明膠、殼聚糖、海藻酸鈉、聚氨酯等的復合。但絲素與其它高分子材料復合往往帶來生物相容性的降低，不適合直接作為生物材料使用。因此尋找一種新型制備不溶性絲素蛋白材料的方法，提高材料機械性能以使絲素蛋白材料直接用于生物醫學領域是非常重要的。

發明內容

為了克服現有技術中，純絲素蛋白膜水中溶失率太大，而與其它高分子材料共混復合而造成絲素混合膜的生物相容性下降的缺點。本發明的目的在于提供一種生物相容性良好的不溶性絲素蛋白膜的制備方法。

本發明采用的技術方案是該方法的步驟如下：

1)在蠶絲經過脫膠、溶解、透析、提純后得到純絲素蛋白溶液；

2)按鈦酸丁酯與乙醇體積比為1∶10混合，攪拌30～60min，然后將混合后的鈦酸丁酯和乙醇溶液按生成的納米TiO₂與絲素的重量百分比為0.4～0.8％的量加入到上面制備的純絲素溶液中，調節pH值為5～6，然后磁力攪拌30～120min；

3)在溫度為20～40℃，相對濕度為40～80％條件下干燥成膜，膜厚為10～20μm。

本發明具有的有益效果是：

本發明制得的不溶性絲素膜無毒無害，生物相容性良好，絲素的結構為非結晶態，在水中溶失率小于2％，拉伸斷裂強度為50～80M/Pa，斷裂伸長率小于40％，透濕量為120～250g/(m2*h)。同時難溶于水，而且只需添加少量納米粒子，制作工藝簡單，成本低廉，可廣泛用于創面保護膜、人工皮膚、抗凝血材料、韌帶、血管、肌腱、藥物控制等材料。

具體實施方式

實施例1：

1將20g的繭層放入400mL濃度為0.5％中性皂溶液中，在100±2℃中處理2h，脫盡包裹在絲素上的絲膠，充分洗滌后得到絲素蛋白。

2將晾干后的絲素蛋白置于250mL的CaCl₂∶C₂H₅OH∶H₂O＝1∶2∶8(摩爾比)的混合溶液中，在75±2℃水浴中溶解2h。冷卻后將絲素粗溶液過濾去除不溶物，裝入纖維素透析膜，用去離子水透析3天去除離子和絲素小分子，得到再生絲素蛋白溶液。

3在通風櫥中用干燥的移液管量取10mL鈦酸丁酯至100mL乙醇中，磁力攪拌30min。量取150mL的絲素溶液置于燒杯中，按TiO₂∶絲素＝0.4/100(重量百分比，下面相同)的比例移取定量的鈦酸丁酯/乙醇溶液，緩慢加入絲素溶液中，調節pH值為6，磁力攪拌30min。

4將上述溶液注入聚苯乙烯培養皿中，在相對濕度為40％，溫度為20℃條件下干燥成膜，膜厚為10μm左右。

實施例2：

1將20g的繭層放入400mL濃度為0.5％中性皂溶液中，在100±2℃中處理2h，脫盡包裹在絲素上的絲膠，充分洗滌后得到絲素蛋白。

2將晾干后的絲素蛋白置于250mL的CaCl₂∶C₂H₅OH∶H₂O＝1∶2∶8(摩爾比)的混合溶液中，在75±2℃水浴中溶解2h。冷卻后將絲素粗溶液過濾去除不溶物，裝入纖維素透析膜，用去離子水透析3天去除離子和絲素小分子，得到再生絲素蛋白溶液。

3在通風櫥中用干燥的移液管量取10mL鈦酸丁酯至100mL乙醇中，磁力攪拌45min，量取150mL的絲素溶液置于燒杯中，按TiO₂∶絲素＝0.6/100的比例移取定量的鈦酸丁酯/乙醇溶液，緩慢加入絲素溶液中，調節pH值為5，磁力攪拌80min，

4將上述溶液注入聚苯乙烯培養皿中，在相對濕度為60％，溫度為40℃條件下干燥成膜，膜厚為20μm左右。

實施例3：

1將20g的繭層放入400mL濃度為0.5％中性皂溶液中，在100±2℃中處理2h，脫盡包裹在絲素上的絲膠，充分洗滌后得到絲素蛋白。