[發(fā)明專利]大核淡水珠的培育方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810059736.0 | 申請日: | 2008-02-20 |
| 公開(公告)號: | CN101248772A | 公開(公告)日: | 2008-08-27 |
| 發(fā)明(設計)人: | 阮鐵軍 | 申請(專利權)人: | 浙江阮仕珍珠股份有限公司 |
| 主分類號: | A01K61/00 | 分類號: | A01K61/00;C12N5/06 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 311804浙江省諸暨*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 大核淡 水珠 培育 方法 | ||
技術領域
本發(fā)明涉及一種養(yǎng)殖珍珠的方法,特別是一種淡水大核珍珠的培育方法。
背景技術
現(xiàn)在,一般的淡水河蚌養(yǎng)殖珍珠的方法中,是在河蚌的外套膜中插入用外套膜制成的細胞小片,用此方法養(yǎng)殖遲來的珍珠稱為無核珍珠,其直徑較小,市場售價較低,經(jīng)濟效益不高。國內的有核珍珠的生產(chǎn)以海水有核珍珠為主,原因是海水珍珠母貝較大,插核部位也不在外套膜而以內臟囊為主。淡水河蚌插核,無論是在外套膜還是在內臟囊都難以取得成功。在大規(guī)模生產(chǎn)上還沒有得到實際應用,因為在手術時存在死亡率高、吐核率高核成圓率低等問題。在日本,有的采用針式送核器將珠核與細胞小片送入河蚌體內育珠,但其送核時必須在珠核上鉆孔才能插入,所以成珠有明顯的凹形孔位,影響質量,使經(jīng)濟效益降低。為此,中國專利號為00117190.9發(fā)明的用淡水河蚌養(yǎng)殖珍珠的插核方法,先將細胞小片緊貼在珠核上,然后用無創(chuàng)送核器將貼有細胞小片的珠核送入河蚌的外套膜或者內臟囊中的核位上。此種方法簡單,可一次性完成插核過程,成活率增高,適合大規(guī)模生產(chǎn),但是,由于一次成型,故成珠的直徑雖比無核珍珠大,但是要達到珠寶級的大珍珠就有一定難度。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種操作簡單、成活率高、成珠大、珠層厚、經(jīng)濟效益好的淡水有核珍珠的培育方法。本發(fā)明的技術方案是如此實現(xiàn)的:
大核淡水珠的培育方法,包括選核—插核—養(yǎng)殖,插核分兩次進行:第一次,先培養(yǎng)具有增殖能力的細胞組織小片或生物細胞,將其粘著于珠核上,然后將此珠核送入河蚌的外套膜或內臟囊中的核位上,養(yǎng)殖10-20個月,進行活蚌取珠;第二次,將15mm以上的珠核,插入珍珠囊中,養(yǎng)護30-50個月。
作為優(yōu)選,培養(yǎng)具有增殖能力的細胞組織小片或生物細胞應配制平衡鹽溶液和培養(yǎng)基,其配方為:
(一)平衡鹽溶液:(g/L)
A液:?NaCl??????????3.5-8.0?????Na2HPO4·12H2O???0.05-0.09
??????KCl???????????0.15-0.55???KH2PO4???????????0.01-0.05
??????MgSO4?????????0.01-0.05???葡萄糖???????????0.4-0.8
??????MgCl2·6H2O???0.02-0.11???0.5%酚紅????????0.4-1.0ml
??????NaHCO3????????0.01-0.05
以上藥品溶于800-1200ml雙蒸水中,35.59-44.48N滅菌12-25分鐘。
B液:CaCl2??????????0.02-0.08
CaCl2用90-110ml雙蒸水單獨溶解,35.59-44.48N滅菌12-25分鐘。
將A液和B液混合,用1mol/LKOH調PH值至6.7-7.0。
(二)培養(yǎng)基:
1640原液18-30ml,牛血清7-15ml。
上述培養(yǎng)基用1mol/LKOH調整PH值為6.7-7.0。加入清鏈霉素使其終濃度達到每毫升青霉素95-115IU,鏈霉素95-115ug,分裝入培養(yǎng)用的小方瓶,每瓶中滴入雞胚汁2-4滴,并加入少量細胞生長刺激劑。
作為優(yōu)選,用于插入的珠核先在清水中浸泡24-36個小時,然后放在70-80℃的熱水中浸泡30-40分鐘。
作為優(yōu)選,第一次插核選用扁平紐扣珠核為內核。
作為優(yōu)選,第二次插核選用直徑為15mm以上的圓形珠核。
作為優(yōu)選,所述第二次插核是將珠核插入第一次培育珍珠后形成的珍珠囊中,在珠核表面上無需粘著細胞小片或生物細胞。
作為優(yōu)選,第二次插核之前,取出蚌內第一次插核形成的珍珠的方法為:用開殼器從蚌的腹后端插入,慢慢撐開并加塞固定,使其雙殼不能閉合,用拔鰓板把內臟團撥向暫不取珠的一側,用彎針將珍珠固定,后用手術刀在珍珠囊上劃一傷口,輕推珍珠將其從珍珠囊中取出。
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