[發明專利]云南紅藥膠囊中毒性成分滇烏堿的質量控制方法

無效

• 申請號: 200810058927.5
• 申請日: 2008-09-17
• 公開（公告）號: CN101396492A
• 公開（公告）日: 2009-04-01
• 發明（設計）人: 周敏;黃春球;呂小波;武正才;李文
• 申請（專利權）人: 云南植物藥業有限公司
• 主分類號: A61K36/888
• 分類號: A61K36/888;A61P7/04;A61P1/04;A61P29/00;A61P19/02;G01N30/36
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司
• 代理人: 康 珉

1、一種云南紅藥膠囊中毒性成分滇烏堿的質量控制方法，其特征在于由制黃草烏生藥材的毒性控制、云南紅藥膠囊中滇烏堿含量控制、動物安全性試驗控制制黃草烏生藥材的毒性、高效液相色譜法檢測毒性成分滇烏堿的含量四個步驟組成，按以下步驟進行：

(1)云南紅藥膠囊制黃草烏生藥材的毒性控制

按小鼠每千克體重計，將制黃草烏生藥材細粉的毒性劑量控制在≤2g/kg，按步驟(3)操作，小鼠不出現死亡為限量；當小鼠出現死亡時，則將黃草烏生藥材按制黃草烏的常規方法進一步炮制，再通過步驟(3)操作，按小鼠每千克體重計，控制其制黃草烏生藥材的毒性劑量≤2g/kg；

(2)云南紅藥膠囊中滇烏堿含量控制在每粒≤0.01mg，云南紅藥膠囊每粒重量為0.25g，當通過步驟(4)檢測滇烏堿含量每粒>0.01mg時，則通過步驟(1)和步驟(4)檢測控制滇烏堿含量每粒≤0.01mg；

(3)動物安全性試驗控制制黃草烏生藥材的毒性

①制黃草烏生藥材的動物毒性試驗供試藥液的制備

將制黃草烏生藥材粉碎過80目篩，用純化水配制成混懸液，制黃草烏生藥材細粉給藥劑量按小鼠每千克體重計，其給藥劑量為2g/kg；其藥液濃度為0.1g/mL，小鼠給藥體積為0.2mL/10g；

②取小鼠20只灌胃，給藥體積為0.2mL/10g，將上述混懸液一次灌入小鼠胃中，連續觀察3d，小鼠不出現死亡，表明云南紅藥膠囊中制黃草烏的炮制合格；

(4)高效液相色譜法檢測毒性成分滇烏堿的含量

①供試品的制備：

取云南紅藥膠囊100粒，取膠囊中粉末置具塞錐形瓶中，加乙醚50ml及氨試液1mL，密塞，搖勻，放置過夜，濾過；藥渣再加乙醚50mL，連續振搖1h，濾過，濾渣再用乙醚洗3-4次，每次20ml，濾過；合并濾液及洗液，60℃以下低溫揮干乙醚；殘渣加0.05mol/L硫酸液10ml使溶解，移入分液漏斗中，用硫酸液5ml分次洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，用乙醚10ml振搖洗滌；酸液加氨試液調PH值至9，再用乙醚提取3次，每次10ml；合并醚液80℃以下低溫蒸干；殘渣加無水乙醇適量使溶解，移入10ml容量瓶中，用無水乙醇分次洗滌容器，洗液并入容量瓶內，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液；

②對照品的制備：精密稱取純度>98.0％的滇烏堿，加無水乙醇制成0.5mg/mL的溶液，作為對照品溶液；

③色譜條件：色譜柱：U-bondapaKCN，7.8×300mm；流動相：甲醇-水-氨水，甲醇：水：氨水＝35：65：0.5；柱溫：30℃；檢測波長：260nm；流量：2mL/min；按滇烏堿峰面積計算，理論塔板數≥4100；

④測定方法：分別精密取對照品溶液和供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，按外標法計算，即得。