[發(fā)明專利]一種塊菌與菌根合成方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810058447.9
• 申請日: 2008-05-27
• 公開（公告）號: CN101328464A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發(fā)明（設計）人: 劉培貴;王向華;于富強;鄧曉娟;陳娟;耿麗英;田霄飛
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 云南協(xié)立專利事務所
• 代理人: 馬曉青

1.中華塊菌與華山松菌根合成方法，包括下述步驟：

(1)華山松播種和育苗，

A、取4-8℃冰箱內保藏2-12個月的華山松種子，30％H₂O₂浸泡2小時，無菌水沖洗數次，棄去漂浮的種子，用無菌水浸泡48小時，撈出，用機械方式使種子輕微破口，再用75％酒精棉紗擦拭消毒，放培養(yǎng)皿中備用；

B、基質備用，取未過篩蛭石與珍珠巖按體積比1/1混勻，加入水使其含水量達30％，121-126℃下高壓蒸汽滅菌1小時；

C、播種，將(1)A步驟中備好的種子，以開口端向下的方向播入基質，播種深度為1.5-2cm；

D、育苗；

(2)中華塊菌菌劑制備和接種，

A、菌劑制備，選2-3月份產的成熟中華塊菌，顯微鏡下觀察孢子形態(tài)，黑褐色孢子與未成熟黃褐色孢子的比例達95∶5為成熟子囊果，成熟子囊果用自來水清洗干凈后，無菌水沖洗3遍，4-8℃冷藏10-20天后，再在-24℃冷凍保存不超過18個月備用；菌劑制備前將冷凍子囊果取出，自然解凍，將每一子囊果切為數塊，放置于攪拌機中，加無菌水粉碎，顯微鏡下鏡檢，確定95％的子囊游離，5％的孢子從子囊分離出為止，菌劑的濃度為每克子囊果/3-5ml水；

B、接種基質制備以及pH值調整，腐殖質土過篩，適量拌入水，使水分含量30％，高壓滅菌3小時備用；腐殖質、水、蛭石以體積比1/1/1的比例混合，加入石灰粉，混勻，調整p?H為7，備用；

C、接種，按每株接種5×10⁷個孢子的量折算出每株需接種的菌劑的體積，取菌劑澆入基質，拌勻；將步驟(1)所得幼苗自育苗基質中取出，去根末端，將菌的根系全部浸入步驟(2)A制備的菌劑后取出，植入步驟(2)B的接種基質；

(3)菌根苗培育，苗置于自然通風大棚，自來水澆灌，干濕交替培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度10-30℃，太陽光照10-14小時。