[發明專利]燈臺葉藥材及其制劑的藥物檢測方法

有效

• 申請號: 200810058340.4
• 申請日: 2008-04-30
• 公開（公告）號: CN101269097A
• 公開（公告）日: 2008-09-24
• 發明（設計）人: 饒高雄;惠婷婷;郭文;朱麗萍
• 申請（專利權）人: 昆明振華制藥廠有限公司
• 主分類號: A61K36/24
• 分類號: A61K36/24;A61P11/00;G01N21/25;G01N30/90;A61K127/00
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明涉及藥物分析檢測技術領域，具體地說是燈臺葉藥材及其制劑的藥物檢測方法。

背景技術

燈臺樹Alstonia?Scholaris(L.)R.Bro.為夾竹桃科植物，主要分布云南南部，資源豐富。燈臺葉是多民族使用的天然藥物，用于治療肺熱咳嗽、痰多、支氣管炎等呼吸系統疾病，藥材已為《云南省藥品標準》、《中國藥典》收載。利用燈臺葉為原料，已開發了燈臺葉顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液等制劑產品。

對于燈臺葉的化學研究，朱偉明博士論文“五種藥用植物資源化學的初步研究”，朱華博士論文“五種藥用植物的化學與活性成分研究”(中國科學院昆明植物研究所，2001年、2006年)中對生物堿成分進行了系統研究和文獻綜述。在藥物質量分析方面，《云南省藥品標準》對燈臺葉藥材僅用簡單的生物堿沉淀反應進行鑒別，無含量測定項目；衛生部頒中藥標準燈臺葉顆粒無理化檢測項目，燈臺葉片采用酸堿滴定法測生物堿，并折算為指標成分鴨腳樹葉堿含量，但測定方法的專屬性差，已經不能適應中藥現代化的技術要求。

為改進燈臺葉藥材及其制劑質量分析技術方法，已經有一些研究報道或相關專利申請。朱光榮申請“鴨腳樹葉堿在控制燈臺葉藥材及其制劑質量中的應用”專利(授權，CN100356172C)；昆明振華制藥廠有限公司對燈臺葉主要生物堿成分鴨腳樹葉堿的檢測方法進行研究，申請“測定堿鴨腳樹葉堿含量的高效液相色譜方法”專利(公開，CN?1975412A)；昆明植物研究所申請“治療呼吸道相關疾病的藥物及其制備方法和應用”(公開，CN101084951A)、“治療呼吸道相關疾病的藥物及其應用”專利(公開，CN?101084894A)；中國藥品生物制品檢定所申請“一種治療咳嗽哮喘的中藥組合物”專利(公開，CN101028323A)。這些相關的研究及專利，均只是涉及到燈臺葉中含有的生物堿類成分，尤其是主要成分堿鴨腳樹葉堿的分析方法及其在藥物質量控制中應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種分析檢測燈臺葉藥材以及以燈臺葉為原料生產的各種制劑中有效成分化合物1和2的方法。該方法以薄層色譜定性檢測燈臺葉藥材及其制劑中化合物1、2，并以分光光度法測定其含量來實現對燈臺葉藥材及其制劑的質量分析與控制。

本發明人對燈臺葉的進一步研究證實，燈臺葉除生物堿成分外還含有較多的黃酮苷類成分，并首次發現存在二個含量較高的黃酮苷類成分：山奈酚-3-O-β-D-半乳糖-(2--1)-O-β-D-木糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-(2--1)-O-β-D-木糖苷(以下稱化合物1、2，其結構見附圖1)。經藥理試驗證明化合物1和2是燈臺葉及其制劑抗炎、止咳、鎮痛的有效成分。對化合物1和2的存在及含量進行分析和檢測，可以作為控制燈臺葉及其制劑質量的重要指標。

(1)用薄層色譜法檢測燈臺葉藥材及其制劑中化合物1和2：以硅膠G為吸附劑，用乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液為展開劑；展開劑所含四種溶劑的體積比為乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3～5∶0.5～1∶0.5～1。其最佳配比為乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1。

其中，展開劑中的乙酸乙酯可用C₁-C₄的脂肪酸和C₁-C₄的脂肪醇形成的酯替代，丁酮可用C₃-C₆的低級脂肪酮替代，甲酸可用C₂-C₆的低級脂肪酸替代。

(2)用分光光度法測定燈臺葉藥材及其制劑中化合物1和2的含量：在亞硝酸鈉存在下以硝酸鋁為顯色劑，在稀氫氧化鈉溶液中顯色后于510nm測定吸收值，其含量以吸收值和化合物1和2混合的標準溶液在相同顯色條件下的吸收值比較而確定。

以上所述的制劑是以燈臺葉為原料生產的各種制劑，包括燈臺葉顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液等。

化合物1和2的可用植物化學方法從燈臺葉中提取分離，用光譜分析方法測定結構，用動物實驗證明其藥理作用。光譜數據如表一，結構式見附圖1。

表一化合物1和2的主要光譜數據

化合物1和2的藥理活性證明：

(1)化合物1和2對氨水所致小鼠咳嗽的影響