[發明專利]一種蠟蚧輪枝菌殺蟲劑及其應用

無效

• 申請號: 200810058144.7
• 申請日: 2008-03-04
• 公開（公告）號: CN101248799A
• 公開（公告）日: 2008-08-27
• 發明（設計）人: 周天雄;楊美林;秦小萍
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: A01N63/00
• 分類號: A01N63/00;A01P7/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司
• 代理人: 劉明哲

技術領域：

本發明涉及植物保護及農藥技術領域，具體是指一種蠟蚧輪枝菌殺蟲劑及其應用。

背景技術：

蠟蚧輪枝菌(Verticillium?lecanii(zimm)viegas)是一種絲孢綱的昆蟲病原真菌。該菌在世界上最早是Neitner于1861年在錫蘭咖啡蠟蚧(Lecanii?coffeae)上首次發現。關于該菌的應用基礎研究，以英國溫室作物研究所Hall?R.A.博士(1976～1985)開展較早，并于20世紀80年代初主持了該菌制劑商品化的研究。自1981年Hall開發的第一個V.lecanii殺蚜劑產品Vertalec^R商品化以來，至今已有多個國家的8種以上的商品分別以Vertalec、Mycotal、Thriptal、Vertisol、AgroBiocontrol?Verticillium?50、Verticon、Verticillin和Mycolabs?Verticillium?lecanii等名稱進行生產、銷售，用于溫室等場所的蚜蟲、粉虱和薊馬等害蟲防治。該菌制劑產品由于效果較慢，對使用環境有一定要求；在發展過程中(尤其是在防治蚜蟲的應用過程中)，曾受到抗蚜威等專用化學農藥的競爭壓力影響，導致市場占有率有所下降。近年來，由于化學農藥的殘留污染問題及影響日益突出，在全球環境保護浪潮的影響和推動下，該菌制劑產品的推廣和應用又有了迅速的發展。

發明內容：

本發明的目的在于提供一種蠟蚧輪枝菌殺蟲劑及其應用。

本發明提供的蠟蚧輪枝菌(Verticillium?lecanii)K1207，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址：北京市朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2008年01月07日；保藏登記入冊的編號CGMCCNo.2326。

本發明的蠟蚧輪枝菌K1207，分離自云南昆明罹病蚜蟲體上，該菌株具有以下特征：在PDA和CzA培養基上10d菌落直徑24～27mm，厚度2～3mm，菌落圓狀，展開，正面觀白色，氣生菌絲初期直立絨毛狀，后期密絮狀，邊緣稀疏，菌落從中間向四周有不明顯放射狀皺褶，培養后期菌落中部與邊緣有明顯的凹環，菌落背部呈奶黃色，無可溶性色素。氣生菌絲無色，有隔分枝，寬度1.2～2.5μm，分生孢子梗基部膨大，向上變細呈錐形，?單生、對生或輪生于氣生菌絲，氣生菌絲頂部輪狀瓶梗可達4～6個，分生孢子梗極少分枝。從梗的頂部長出分生孢子，聚結成球形，孢子球直徑5～12μm，球遇水解體釋放出分成孢子(10～25個)，孢子棒形、橢圓形、卵形，兩端圓而對稱，孢子大小2.5～8.0×0.75～2.8μm。本發明的菌株A1207與現有已知菌株相比，溫度適應能力更好，溫度范圍在15～33℃，分生孢子萌發率可達91.78～100％。

本發明是這樣實現的：蠟蚧輪枝菌(Verticillium?lecanii)K1207菌株的試管培養，固、液兩相發酵，制備成可濕性粉劑，將其防治各種蚜蟲(桃蚜、白尾紅蚜、麥無網長管蚜、甘藍蚜等)、菜青蟲、小菜蛾、溫室白粉虱。

本發明蠟蚧輪枝菌(Verticillium?lecanii)K1207菌株的培養方法：

1、試管種培養

試管斜面培養基配方為：馬鈴薯20％，葡萄糖1.7～2％，瓊膠1.4～1.5％，自然pH

將Verticillium?lecanii?K1207移到試管斜面培養基上，在28℃恒溫培養3～4d，獲得試管種。

2、液體培養

液體發酵基配方為改良SDAY培養液：1％蛋白胨、4％葡萄糖、0.5％酵母膏；0.136％KH₂PO₄、0.12％，MgSO₄·7H₂O；pH6.0～6.5

將試管種接種到500ml三角瓶液體培養基中，每瓶裝200ml，于28℃恒溫振蕩培養4～5d，轉速為100～120rpm，將各瓶種子液混勻，以20ml/瓶量加入到二級培養液(改良SDAY)中，搖床培養培養4～5d(100～120rpm)獲得液體制劑。

3、固體培養

固體培養基配方為麥麩--谷糠培養基：56％麥麩、24％細糠、20％谷殼、0.136％KH₂PO₄、0.12％MgSO₄·7H₂O。