[發明專利]大蹼鈴蟾非晶狀體βγ－晶狀體蛋白與三葉因子蛋白復合物和基因及制法及用途

無效

• 申請號: 200810058028.5
• 申請日: 2008-01-14
• 公開（公告）號: CN101230339A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發明（設計）人: 張云;劉樹柏;何英英;李文輝
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明動物研究所
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N15/55;A61K38/46;A61P35/00;A61P17/02
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司
• 代理人: 向蘭

技術領域：

本發明涉及一種大蹼鈴蟾非晶狀體βγ-晶狀體蛋白與三葉因子蛋白復合物和基因及制法及用途，屬生物醫學領域。

背景技術

組織傷口修復是一個由血細胞，細胞外基質和多種細胞調節因子參與，交互作用的動態過程。組織傷口修復包括三個階段：炎癥反應，組織形成和組織再造。在炎癥反應階段，通過周圍的受損的血管，從血清中釋放各種生長因子，細胞因子和低分子量的小分子化合物，引起炎癥反應，與受損血管周圍的細胞外基質相互膠聯，凝結，形成一道防御外界微生物的屏障，也作為早期創傷修復過程中生長因子作用的支架。同時，釋放的各種生長因子和細胞因子能夠啟動傷口修復中的細胞增殖和遷移。在組織形成和組織再造階段，在各種生長因子和細胞因子的作用下，在傷口周圍出現由新形成的毛細血管長出物組成的肉芽組織，最終肉芽組織結痂，形成疤痕，修復傷口。

最新研究表明，組織傷口修復反應與腫瘤發生過程有密切關系，腫瘤生長也可以被視為一種不受調節的組織修復過程。在正常的組織中，組織修復反應被誘導發生，在完成損傷組織修復后，它能夠被調控停止下來。但是在有致癌性的突變的情況下，最初的腫瘤生長被認為是對組織的損害而激發組織修復反應的發生。這就導致了一個惡性循環：組織修復產生的細胞會被用于腫瘤團的生長，而更大的腫瘤團將被認為是更大的組織損害，從而導致組織修復反應提供更多的細胞用于腫瘤的生長。如果能夠鑒定出啟動因子信號及其負控制因子信號，就能試著去中和它，從而阻止腫瘤組織修復程序，進而也能幫助來抑制或阻止腫瘤的生長。因此，尋找腫瘤所利用的觸發組織修復反應的重要啟動因子信號及其負控制因子信號成為目前和未來的腫瘤研究的熱點方向之一。

脊椎動物中，晶狀體蛋白(crystallin)是眼球晶狀體的結構蛋白(C.T.Morner于1893年最早發現)，決定了晶狀體的折光性和通光性。晶狀體蛋白分為α和βγ兩大類，α-晶狀體蛋白屬于廣泛分布的小的熱休克蛋白質家族。βγ-晶狀體蛋白具有特征性的希臘鑰匙模體(Greek?key?motifs)，每個模體由40個氨基酸殘基組成，而兩個結構模體可通過不對稱性排列形成一個結構域，故將它們歸為βγ-晶狀體蛋白超家族。除了晶狀體外，非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質(non-lens?βγ-crystallin)廣泛分布在其他組織中。在微生物中，非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質主要為壓力誘導表達的相關蛋白質。例如Protein?S和Spherulin3a。Protein?S是一種來源于土壤中革蘭氏陰性細菌Myxococcus?xanthus的孢子專一蛋白，當處于營養缺乏的惡劣條件下，Protein?S被誘導大量分泌表達，并結合鈣離子通過寡聚化作用在細菌表面組裝形成多層衣殼，在惡劣條件下保護自身。Spherulin?3a，來源于細菌Physarum?polycephalum的囊泡形成蛋白，在各種壓力環境下合成，參與形成胞囊和休眠。在脊椎動物中，已知的非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質包括ep37和AIM1。EP37(epidermis-specific?protein?37，表皮分化蛋白37)是表達在兩棲動物Cynopspyrrhogaster(日本蠑螈，潮汕蠑螈或稱赤腹蠑螈)的胚胎表皮，皮膚腺和胃表皮細胞中的蛋白質。黑色素瘤缺失蛋白1(AIM1，absent?in?melanoma?1)，為一類首先在人黑色素瘤疾病模型中缺失的與腫瘤抑制相關的新基因。AIM1在哺乳動物的胚胎發育過程中時空特異性的表達調節，具有不同大小的轉錄本，在成體中AIM1大量表達于皮膚，肺，心臟，肝和腎等器官，認為是一個潛在的腫瘤抑制基因。盡管EP37蛋白和AIM1基因被認為可能參與表皮發育和腫瘤抑制，但是目前對于他們的分子特性，生理功能和分子作用機制還知之甚少。