[發(fā)明專(zhuān)利]大蹼鈴蟾非晶狀體βγ－晶狀體蛋白與三葉因子蛋白復(fù)合物和基因及制法及用途

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810058028.5
• 申請(qǐng)日: 2008-01-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101230339A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張?jiān)?/a>;劉樹(shù)柏;何英英;李文輝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N9/16
• 分類(lèi)號(hào): C12N9/16;C12N15/55;A61K38/46;A61P35/00;A61P17/02
• 代理公司: 昆明祥和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 向蘭

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種大蹼鈴蟾非晶狀體βγ-晶狀體蛋白與三葉因子蛋白復(fù)合物和基因及制法及用途，屬生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

組織傷口修復(fù)是一個(gè)由血細(xì)胞，細(xì)胞外基質(zhì)和多種細(xì)胞調(diào)節(jié)因子參與，交互作用的動(dòng)態(tài)過(guò)程。組織傷口修復(fù)包括三個(gè)階段：炎癥反應(yīng)，組織形成和組織再造。在炎癥反應(yīng)階段，通過(guò)周?chē)氖軗p的血管，從血清中釋放各種生長(zhǎng)因子，細(xì)胞因子和低分子量的小分子化合物，引起炎癥反應(yīng)，與受損血管周?chē)募?xì)胞外基質(zhì)相互膠聯(lián)，凝結(jié)，形成一道防御外界微生物的屏障，也作為早期創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程中生長(zhǎng)因子作用的支架。同時(shí)，釋放的各種生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子能夠啟動(dòng)傷口修復(fù)中的細(xì)胞增殖和遷移。在組織形成和組織再造階段，在各種生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的作用下，在傷口周?chē)霈F(xiàn)由新形成的毛細(xì)血管長(zhǎng)出物組成的肉芽組織，最終肉芽組織結(jié)痂，形成疤痕，修復(fù)傷口。

最新研究表明，組織傷口修復(fù)反應(yīng)與腫瘤發(fā)生過(guò)程有密切關(guān)系，腫瘤生長(zhǎng)也可以被視為一種不受調(diào)節(jié)的組織修復(fù)過(guò)程。在正常的組織中，組織修復(fù)反應(yīng)被誘導(dǎo)發(fā)生，在完成損傷組織修復(fù)后，它能夠被調(diào)控停止下來(lái)。但是在有致癌性的突變的情況下，最初的腫瘤生長(zhǎng)被認(rèn)為是對(duì)組織的損害而激發(fā)組織修復(fù)反應(yīng)的發(fā)生。這就導(dǎo)致了一個(gè)惡性循環(huán)：組織修復(fù)產(chǎn)生的細(xì)胞會(huì)被用于腫瘤團(tuán)的生長(zhǎng)，而更大的腫瘤團(tuán)將被認(rèn)為是更大的組織損害，從而導(dǎo)致組織修復(fù)反應(yīng)提供更多的細(xì)胞用于腫瘤的生長(zhǎng)。如果能夠鑒定出啟動(dòng)因子信號(hào)及其負(fù)控制因子信號(hào)，就能試著去中和它，從而阻止腫瘤組織修復(fù)程序，進(jìn)而也能幫助來(lái)抑制或阻止腫瘤的生長(zhǎng)。因此，尋找腫瘤所利用的觸發(fā)組織修復(fù)反應(yīng)的重要啟動(dòng)因子信號(hào)及其負(fù)控制因子信號(hào)成為目前和未來(lái)的腫瘤研究的熱點(diǎn)方向之一。

脊椎動(dòng)物中，晶狀體蛋白(crystallin)是眼球晶狀體的結(jié)構(gòu)蛋白(C.T.Morner于1893年最早發(fā)現(xiàn))，決定了晶狀體的折光性和通光性。晶狀體蛋白分為α和βγ兩大類(lèi)，α-晶狀體蛋白屬于廣泛分布的小的熱休克蛋白質(zhì)家族。βγ-晶狀體蛋白具有特征性的希臘鑰匙模體(Greek?key?motifs)，每個(gè)模體由40個(gè)氨基酸殘基組成，而兩個(gè)結(jié)構(gòu)模體可通過(guò)不對(duì)稱(chēng)性排列形成一個(gè)結(jié)構(gòu)域，故將它們歸為βγ-晶狀體蛋白超家族。除了晶狀體外，非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質(zhì)(non-lens?βγ-crystallin)廣泛分布在其他組織中。在微生物中，非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質(zhì)主要為壓力誘導(dǎo)表達(dá)的相關(guān)蛋白質(zhì)。例如Protein?S和Spherulin3a。Protein?S是一種來(lái)源于土壤中革蘭氏陰性細(xì)菌Myxococcus?xanthus的孢子專(zhuān)一蛋白，當(dāng)處于營(yíng)養(yǎng)缺乏的惡劣條件下，Protein?S被誘導(dǎo)大量分泌表達(dá)，并結(jié)合鈣離子通過(guò)寡聚化作用在細(xì)菌表面組裝形成多層衣殼，在惡劣條件下保護(hù)自身。Spherulin?3a，來(lái)源于細(xì)菌Physarum?polycephalum的囊泡形成蛋白，在各種壓力環(huán)境下合成，參與形成胞囊和休眠。在脊椎動(dòng)物中，已知的非晶狀體βγ-晶狀體蛋白質(zhì)包括ep37和AIM1。EP37(epidermis-specific?protein?37，表皮分化蛋白37)是表達(dá)在兩棲動(dòng)物Cynopspyrrhogaster(日本蠑螈，潮汕蠑螈或稱(chēng)赤腹蠑螈)的胚胎表皮，皮膚腺和胃表皮細(xì)胞中的蛋白質(zhì)。黑色素瘤缺失蛋白1(AIM1，absent?in?melanoma?1)，為一類(lèi)首先在人黑色素瘤疾病模型中缺失的與腫瘤抑制相關(guān)的新基因。AIM1在哺乳動(dòng)物的胚胎發(fā)育過(guò)程中時(shí)空特異性的表達(dá)調(diào)節(jié)，具有不同大小的轉(zhuǎn)錄本，在成體中AIM1大量表達(dá)于皮膚，肺，心臟，肝和腎等器官，認(rèn)為是一個(gè)潛在的腫瘤抑制基因。盡管EP37蛋白和AIM1基因被認(rèn)為可能參與表皮發(fā)育和腫瘤抑制，但是目前對(duì)于他們的分子特性，生理功能和分子作用機(jī)制還知之甚少。