[發明專利]永生化大鼠骨髓基質細胞系及其制備方法無效
| 申請號： | 200810057663.1 | 申請日： | 2008-02-04 |
| 公開（公告）號： | CN101255407A | 公開（公告）日： | 2008-09-03 |
| 發明（設計）人： | 段春禮;楊慧;趙春禮;孫曉紅;魯玲玲 | 申請（專利權）人： | 首都醫科大學 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/52;C12N15/867;A61K35/28;A61P25/00;A61P25/16 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 永生 大鼠 骨髓 基質 細胞系 及其 制備 方法 | ||
1、一種制備永生化大鼠骨髓基質細胞系的方法，是將人端粒酶反轉錄酶催化亞基基因導入大鼠骨髓基質細胞得到永生化大鼠骨髓基質細胞系。
2、根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述人端粒酶反轉錄酶催化亞基的氨基酸序列如序列表中序列2所示。
3、根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述人端粒酶反轉錄酶催化亞基基因的核苷酸序列如序列表中序列1所示。
4、根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述人端粒酶反轉錄酶催化亞基基因通過逆轉錄病毒載體導入大鼠骨髓基質細胞。
5、根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述人端粒酶反轉錄酶催化亞基基因通過重組逆轉錄病毒載體pLPCX-Flag-hTERT導入大鼠骨髓基質細胞；所述重組逆轉錄病毒載體pLPCX-Flag-hTERT是將融合蛋白的編碼基因插入逆轉錄病毒載體pLPCX的多克隆位點得到的重組載體；所述融合蛋白為在人端粒酶反轉錄酶催化亞基的N端融合FLAG表位標簽得到的融合蛋白。
6、根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述重組逆轉錄病毒載體pLPCX-Flag-hTERT按照如下方法導入大鼠骨髓基質細胞：將pLPCX-Flag-hTERT轉染到包裝細胞系，被包裝成具有侵襲能力但復制缺陷的帶有人端粒酶反轉錄酶催化亞基基因的病毒后，再轉導大鼠骨髓基質細胞。
7、根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述大鼠為Sprague-Dawley封閉群大鼠。
8、按照權利要求1-7任一所述方法獲得的永生化大鼠骨髓基質細胞系。
9、權利要求8所述永生化大鼠骨髓基質細胞系在體內外誘導分化中的應用。
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