[發(fā)明專(zhuān)利]一種紅細(xì)胞血型的體外改造方法及其專(zhuān)用配套試劑

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810056463.4
• 申請(qǐng)日: 2008-01-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101215549A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 章?lián)P培;郁成雨;徐華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/08
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/08;A61K35/14;A61P7/00;G01N33/80
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.一種紅細(xì)胞血型的體外改造方法，是用α-N-乙酰半乳糖胺酶處理離體A型或AB型紅細(xì)胞，使A型紅細(xì)胞改造為O型紅細(xì)胞，使AB型紅細(xì)胞改造為B型紅細(xì)胞；所述α-N-乙酰半乳糖胺酶，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)：

(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(b)將序列表中序列3的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有α-N-乙酰半乳糖胺酶活性的由(a)衍生的蛋白質(zhì)；

所述用α-N-乙酰半乳糖胺酶處理離體A型或AB型紅細(xì)胞的方法為：將A型紅細(xì)胞和AB型紅細(xì)胞中的任一種紅細(xì)胞和所述α-N-乙酰半乳糖胺酶加入緩沖溶液中，使所述α-N-乙酰半乳糖胺酶的終濃度為5～20U/ml、所述紅細(xì)胞的壓積為40％～20％；在20℃～26℃，反應(yīng)30～120min，A型紅細(xì)胞改造為O型紅細(xì)胞，AB型紅細(xì)胞改造為B型紅細(xì)胞；

所述緩沖溶液為由如下終濃度的物質(zhì)組成的水溶液：200～400mM甘氨酸，0～10mM?NaCl；所述緩沖溶液的pH值為6.6～7.2。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的α-N-乙酰半乳糖胺酶，是由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述離體A型紅細(xì)胞為A1型或A2型紅細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法，其特征在于：所述方法還包括用抗A抗原抗體、抗A1抗原抗體和抗H抗原抗體鑒定改造得到的O型紅細(xì)胞或B型紅細(xì)胞的步驟。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。

6.一種體外改造紅細(xì)胞血型的配套試劑，包括α-N-乙酰半乳糖胺酶和緩沖溶液；

所述α-N-乙酰半乳糖胺酶，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)：

(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(b)將序列表中序列3的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有α-N-乙酰半乳糖胺酶活性的由(a)衍生的蛋白質(zhì)；

所述緩沖溶液為由如下終濃度的物質(zhì)組成的水溶液：200～400mM甘氨酸，0～10mM?NaCl；所述緩沖溶液的pH值為6.6～7.2。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的配套試劑，其特征在于：所述配套試劑中還包括生理鹽水和200～400mM甘氨酸溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的配套試劑，其特征在于：所述配套試劑中還包括抗A抗原抗體、抗A1抗原抗體和抗H抗原抗體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的配套試劑，其特征在于：所述抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。