[發明專利]一種聚乙二醇單甲醚-聚己內酯-聚磷酸酯三嵌段共聚物及其制備的siRNA藥物載體

有效

• 申請號: 200810055945.8
• 申請日: 2008-01-02
• 公開（公告）號: CN101474408A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發明（設計）人: 王均;杜金志;孫天盟
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;C08G79/04;C08G63/08;C08G63/85
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種聚乙二醇單甲醚-聚己內酯-聚磷酸酯三嵌段共聚物及其制備的siRNA藥物載體。

背景技術

RNA干擾是一種由大約二十多個核苷酸組成的雙鏈小分子干擾RNA(siRNA)介導的基因沉默技術，它具有序列特異性而且發生在遺傳信息的轉錄之后。由于RNA干擾技術具有特異性抑制致病基因表達的能力以及其高效、多樣化的特征，人們正在不斷挖掘siRNA在人類疾病治療中的潛力，到目前為止已經開展了大量針對疾病治療的動物實驗甚至臨床實驗，這其中包括以表達血管內皮生長因子(VEGF)、P糖蛋白、端粒酶等各種基因為靶基因的癌癥治療，針對HIV-1、乙型和丙型肝炎、流感和SARS等病毒的實驗，以及針對一些神經退化性疾病的研究等。最近的研究還表明利用siRNA也可能治療II型糖尿病和肥胖癥，而視網膜退化病變引起的老年黃斑病變的siRNA療法更是進入了臨床試驗階段。美國費城的Acuity制藥公司在2006年美國基因治療學會年會上還宣布以RNAi為基礎的Bevasiranib藥物能夠“關閉”VEGF基因，用來治療老年性黃斑病變的II期臨床試驗取得了初步成功。有RNAi專家指出，這項試驗的成果是RNA療法發展的一個里程碑，而且還預言RNAi在不久的將來就可能用于臨床治療。

盡管目前在大多數細胞培養和體外應用研究中，siRNA顯示出抑制基因的良好潛質，體外siRNA的傳輸結果也比較滿意，但在以治療人類疾病為目的的體內siRNA傳輸方面卻面臨著巨大挑戰。由于siRNA分子本身穿透細胞膜的能力極差，也不具備靶向功能，而且在生理環境中極不穩定，因此siRNA藥物開發的一個關鍵是siRNA的傳輸體系。如何增強在體內的穩定性和穿透細胞膜的能力，以及增強疾病治療的細胞和組織靶向性等都是siRNA傳輸體系急切需要解決的問題。因此除了尋找和篩選高效特異性的siRNA藥物分子之外，在生命體系發揮RNAi治療功效離不開靶向特定組織或靶細胞的傳輸體系，siRNA的體內傳輸體系也因此成為發展和實施RNA干擾療法的另一個關鍵所在。盡管動物實驗中高壓大體積的靜脈液力注射(hydrodynamic?injection)能將siRNA分子輸送到肝臟、脾臟、肺、腎、胰腺等血管豐富的組織，而且十分有效，但在實際臨床應用中受到限制；一些物理方法如電穿孔(Electroporation)，以及將siRNA直接送到靶部位如眼睛、肺或中樞神經系統，這類局域性輸送方法具有一定潛能，仍然需要尋找更方便適合臨床應用的新方法，特別是系統給藥的方法。載體介導的siRNA表達質粒的體內傳輸是一個類似于基因治療的問題，在研究中可以用一些物理方法，以及病毒或非病毒的傳輸體系。然而，盡管病毒對它的傳遞具有高效性，但潛在的安全性問題制約著它的廣泛臨床應用；而非病毒類的陽離子脂質體和陽離子高分子載體的安全性好的特點使它們成為極具潛力的載體。已有的典型非病毒siRNA傳輸材料包括聚乙烯亞胺(PEI)、去了端肽的精制膠原“atelocollagen”和一些陽離子脂質體，包括最近報道的siRNA-SNALP(stable?nucleic-acid-lipid?particle)，通過抗體介導的細胞特異性siRNA輸送，以及中性脂質體DOPC，還有用基于寡聚核苷酸適配子(Aptamer)的特異性輸送siRNA到細胞的報道，但發展高效具有一定靶向性和安全的siRNA體內傳輸體系仍然面臨挑戰。

siRNA給藥載體的研究和開發一直是困擾各國科學家的關鍵問題。人們一直在研究合適的載體材料能有效地將siRNA藥物分子輸送到靶細胞和部位，并在一段合理時間維持其功效。目前所采用的載體體系大多是陽離子脂質體或水溶性的陽離子聚合物，將這些載體分子與siRNA溶液互混得到二者的復合物，從而實現傳遞siRNA的目的，這類方法的不足就是不容易放大規模并且重復性較差。Alnylam制藥公司發展的Direct?RNAi^TM技術主要是針對病灶部位的直接給藥，用于治療眼科疾病、中樞神經系統疾病和呼吸道疾病；而該公司的Systemic?RNAi^TM技術用于治療包括腫瘤、消化系統疾病和自身免疫性疾病等眾多疾病。Intradigm公司利用TargeTran^TM?siRNA技術，該技術利用陽離子型嵌段高分子通過靜電相互作用和siRNA形成納米顆粒的內核，并覆蓋一層具有保護和增強血液中siRNA穩定性的外殼，以及靶向基團。