[發明專利]瑞士乳桿菌微膠囊及其制備與應用

有效

• 申請號: 200810053961.3
• 申請日: 2008-07-28
• 公開（公告）號: CN101323850A
• 公開（公告）日: 2008-12-17
• 發明（設計）人: 王艷萍;許女
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12N11/04
• 分類號: C12N11/04;A23C9/123;A23L1/29;A23L2/02;A61P1/04;A61P37/04;A61P9/12;A61P3/06;C12R1/225
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.瑞士乳桿菌微膠囊，其特征是：利用大豆分離蛋白作為第一層包埋材料，微孔淀粉作為第二層包埋材料，海藻酸鈉作為第三層包埋材料，對瑞士乳桿菌(Lac?tobacillus?helveticus)，進行三層包埋；

瑞士乳桿菌微膠囊是這樣制備的：首先制備菌懸液，即將活化后的瑞士乳桿菌菌種接入優化的MRS增殖培養基，利用流加堿中和培養的方法對菌體進行增殖培養，至穩定期前期，再經離心分離收集菌體，在菌泥中加入菌體冷凍干燥保護劑，制備菌懸液，使菌體的濃度達到10¹⁰cfu/mL；然后對菌體進行三層包埋，即在上述制備的菌懸液中加入與菌懸液等體積的第一層包埋材料，包埋材料選用4％大豆分離蛋白溶液，常溫下，200rpm/min攪拌20min至均勻，再等體積加入第二層包埋材料，包埋材料選用4％的微孔淀粉溶液，200rpm/min攪拌20min至吸附，接著加入2倍溶液體積的第三層包埋材料，包埋材料選用2％的海藻酸鈉溶液，200rpm/min攪拌30min攪拌均勻，將得到的混合液滴入2％的CaCl₂溶液中，固化30min成球；最后進行真空冷凍干燥，即將上述制得的微球用無菌水漂洗后放在-80℃的冰箱中預凍3h，在冷阱溫度-51℃，真空度0.09毫巴，真空冷凍干燥18h～24h，即制得瑞士乳桿菌微膠囊；

上述優化的MRS增殖培養基配方為：MRS1600mL，番茄汁150mL，麥芽汁220mL，乳清粉30mL；

所用菌體冷凍干燥保護劑配方為：10％脫脂奶190mL，海藻糖3g，甘油1g，山梨醇4g，麥芽糊精2g。

2.權利要求1所述的瑞士乳桿菌微膠囊的制備方法是：

首先制備菌懸液，即將活化后的瑞士乳桿菌菌種接入優化的MRS增殖培養基，利用流加堿中和培養的方法對菌體進行增殖培養，至穩定期前期，再經離心分離收集菌體，在菌泥中加入菌體冷凍干燥保護劑，制備菌懸液，使菌體的濃度達到10¹⁰cfu/mL；

然后對菌體進行三層包埋，即加入與菌懸液等體積的第一層包埋材料，包埋材料選用4％大豆分離蛋白溶液，常溫下，200rpm/min攪拌20min至均勻，再等體積加入第二層包埋材料，包埋材料選用4％的微孔淀粉溶液，200rpm/min攪拌20min至吸附，接著加入2倍溶液體積的第三層包埋材料，包埋材料選用2％的海藻酸鈉溶液，200rpm/min攪拌30min攪拌均勻，將得到的混合液滴入2％的CaCL₂溶液中固化30min成球；

最后進行真空冷凍干燥，即將上述制得的微球用無菌水漂洗后放在-80℃的冰箱中預凍3h，在冷阱溫度-51℃，真空度0.09毫巴，真空冷凍干燥18～24h，即制得瑞士乳桿菌微膠囊；

上述優化的MRS增殖培養基配方為：MRS1600mL，番茄汁150mL，麥芽汁220mL，乳清粉30mL；

所用菌體冷凍干燥保護劑配方為：10％脫脂奶190mL，海藻糖3g，甘油1g，山梨醇4g，麥芽糊精2g。

3.按照權利要求2所述的瑞士乳桿菌微膠囊的制備方法，其特征在于：在制備菌懸液中，增殖培養15h。

4.權利要求1所述的瑞士乳桿菌微膠囊作為發酵劑重復發酵牛乳的應用：

稱取0.1g瑞士乳桿菌微膠囊，用孔徑規格為≤0.2mm的不銹鋼網籃包住，接種于100mL，經85℃加熱30min的12％的全脂牛奶中，40℃恒溫培養箱中進行牛乳發酵，待牛乳發酵成熟后，將網籃提出，重新放入新鮮的牛奶中進行下一批次的發酵。

5.權利要求1所述的瑞士乳桿菌微膠囊在制作保健品上的應用：

所述保建品是調節腸道菌群平衡，輔助治療腸胃疾病的瑞士乳桿菌微膠囊保健品，其具體制作方法是：

按下述重量百分比配方稱取各種物質，

瑞士乳桿菌微膠囊：50％～70％，木瓜蛋白酶：2％～3％，菠蘿蛋白酶：2％～3％，低聚果糖：5％～10％谷氨酸鹽：1％～3％，酪酸：1％～3％琉璃苣籽：0％～5％，亞麻籽：0％～5％，卵磷脂：5％～10％，混合均勻，配制成沖劑，無菌充氮氣包裝，真空包裝或放入全自動膠囊灌裝封口機內，制成硬膠囊，配制時各物料重量百分比之和為100％。

6.權利要求1所述的瑞士乳桿菌微膠囊在苦菜保健飲料制備中的應用，具體做法是：

500g新鮮苦菜經漂洗后，加1000mL的水，榨汁，加入3000mL的鮮奶，攪拌均勻后，巴氏滅菌，冷卻到40℃，再添加200g木糖醇，200g低聚糖，2g維生素E，2g鐵粉，接入0.18g瑞士乳桿菌微膠囊，然后40℃發酵6.5h，添加天然香精調合成不同口味，或保持原味，無菌包裝。