[發明專利]兼具疏水和偶極協同作用的吸附樹脂制備方法及在長春花總生物堿純化中的應用

無效

• 申請號: 200810052878.4
• 申請日: 2008-04-25
• 公開（公告）號: CN101264443A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發明（設計）人: 王春紅;施榮富;李立坤
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: B01J20/30
• 分類號: B01J20/30;A61K36/24
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司
• 代理人: 侯力

【技術領域】：

本發明涉及中藥有效成分的提取和分離技術領域，特別是長春花總生物堿的提取方法，及該方法中所使用的吸附樹脂的制備。

【背景技術】：

長春花(Catharanthus?roseus?L.)為夾竹桃科長春花屬植物。原產于非洲，我國海南、貴州一帶有栽培。長春花作為一種傳統的民間藥用植物，常被用來治療瘧疾、腹瀉、糖尿病、高血壓、皮膚病及何杰金氏病。近代研究表明，長春花中含有多種生物堿，而且部分生物堿具有明顯的抗腫瘤活性，因而長春花成為國內外重要的抗腫瘤植物資源。

長春堿(vinblastine)是從長春花中提取的一種具有明顯的抗腫瘤活性的二聚吲哚類生物堿。它對何杰金病及非小細胞性腫瘤、惡性淋巴腫瘤等有顯著療效。其硫酸鹽已廣泛用于臨床30余年，迄今仍是主要的抗腫瘤用藥之一。

長春質堿(cathearanthine)有一定降血糖作用，文多靈(vindoline)有鎮痛和利尿的功效。更為重要的是長春質堿和文多靈是合成長春堿的前體。

長春堿、長春質堿和文多靈的分子結構如下：

長春花總生物堿是長春花中重要的吲哚類生物堿的總稱，主要包括長春堿、長春質堿和文多靈等具有顯著的藥用價值的生物堿。目前，長春花總生物堿的獲得主要是從長春花植株中提取。然而，長春花總生物堿在長春花中含量極低，且長春花植株中其它雜質種類多、數量大、結構未知，因此建立一種高效、簡捷的長春花總生物堿的提取方法顯得尤為重要。

現有的關于長春花總生物堿的提取主要有溶劑提取法和柱色譜法。【李曉蕾，任其龍等，抗腫瘤藥長春堿的提取純化與分析方法的研究概況中國醫藥工業雜志2004年第35卷第4期】其中，溶劑萃取法步驟繁瑣，耗用大量溶劑，柱色譜法則多用苯、石油醚、氯仿等有機溶劑洗脫，且所得產品純度不高，制備量小，不適合擴大生產。

【發明內容】：

本發明的目的是解決現有長春花總生物堿提取技術中存在成本高，耗用大量有機溶劑的問題，提供一種兼具疏水和偶極協同作用的吸附樹脂制備方法及在長春花總生物堿純化中的應用。

本發明根據長春花植株中長春花總生物堿和其它雜質的含量特點，利用生物堿和雜質間的極性不同，合成了一種兼具疏水和偶極協同作用的吸附樹脂，通過調控樹脂骨架中的疏水部分和弱極性部分的比例，使吸附樹脂在對長春堿、長春質堿、文多靈和對長春花中其它雜質的吸附能力上體現出較強的選擇性，從而利用梯度洗脫的方法，只經一步“吸附-洗脫”的工藝流程，即可除去雜質，制備高純度長春花總生物堿。

本發明提供的兼具疏水作用和偶極作用的吸附樹脂的制備方法，通過以下步驟實現：

第一、常溫下，將分散劑聚乙烯醇溶解于水中，配成質量濃度為0.5％-2％的水相；

第二、由丙烯酸甲酯和二乙烯苯組成聚合反應的單體相，其中丙烯酸甲酯的質量分數為單體相總質量的30～50％，余量為二乙烯苯；同時取質量比為2∶1的甲苯和長鏈烷烴作混合致孔劑，致孔劑總量為單體相總質量的100％～150％，以偶氮二異丁腈作引發劑，其用量為單體相總質量的1～3％，將上述組分混合均勻后配成油相；

第三、反應開始前，先將水相倒入三口瓶中，并加熱至30-50℃后，將油相加入三口瓶中，水相和油相的體積比為3∶1；開動攪拌，由慢到快調節攪拌速度，至油滴尺寸在0.3-1.0mm后開始升溫，先至60-80℃反應2-6小時，再繼續升溫至85℃反應6小時，停止反應，靜置至室溫，最后經過濾、洗滌處理得到所需吸附樹脂。

上述方法制備的吸附樹脂的應用，用于從長春花全株中制備高純度長春花總生物堿，具體步驟如下：

第一步、將長春花草粉溶于0.5％-1.5％的硫酸水溶液中，其中長春花草粉和硫酸水溶液的質量比為1∶3-1∶7，60℃回流2～3小時，重復提取2-3次；

第二步、將上述提取液過濾，離心得到澄清水溶液，以此澄清水溶液作上柱液；

第三步、將上述方法制備的吸附樹脂裝入吸附柱中，吸附柱直徑與柱長比為1∶5-1∶20；室溫下，將上柱液以0.5～1.5BV/小時的流速通過樹脂吸附柱；

第四步、水洗樹脂吸附柱至流出液為中性，分別用體積百分含量為40～50％，70～80％的乙醇-水溶液分步洗脫，將70～80％的洗脫液減壓、濃縮干燥即得高純度的長春花總生物堿(包括長春堿、長春質堿和文多靈)。

以上干燥制得的固體中長春花總生物堿的質量百分含量達到15～30％。

本發明的優點和積極效果：