[發明專利]二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的制備和分離方法

有效

• 申請號: 200810052839.4
• 申請日: 2008-04-22
• 公開（公告）號: CN101265185A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發明（設計）人: 丁輝;王嵩;張艷華;徐世民
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C07C69/587
• 分類號: C07C69/587;C07C67/08
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所
• 代理人: 王麗

技術領域

本發明涉及二十二碳五烯酸(DPA)甲酯和二十二碳六烯酸(DHA)甲酯的制備和分離方法。

背景技術

微藻是一類含有葉綠素的海洋微生物，其生長習性于藻類相同。研究表明，微藻脂肪中含有豐富的ω-3多烯脂肪酸。醫學界的多年研究，已經證實ω-3多烯脂肪酸對人體健康有多種獨特的生理功效，尤其是EPA(二十碳五烯酸)、DPA(二十二碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)，其獨特的保健功效被越來越多的人認可和接受。目前人類使用的ω-3多烯脂肪酸保健品中的有效成分多來自深海魚油和海豹油。隨著世界海洋漁業資源告急，以及魚油易受重金屬污染等問題的存在，使魚油的應用受到了限制；每年北極地區對海豹的屠殺更是引起全世界的不滿。近年來的研究表明，海洋微藻才是ω-3多烯脂肪酸的真正合成者，魚類和海豹體內的ω-3多烯脂肪酸均是攝取自各自的食物鏈。而且微藻具有易于培養和易于控制生產規模，總脂含量高，脂肪中ω-3多烯脂肪酸含量高等特點，因此越來越受到人們的重視。另一方面，人們也發現不同的ω-3多烯脂肪酸，其生理功能也不同，例如：EPA具有改善血液循環、軟化血管、調整血脂、降低血壓和血糖以及抗炎作用，適合中老年人服用。DHA具有營養大腦、促進胎兒和兒童大腦發育、保護視力、調節免疫和抗癌作用，DPA也具有促進青少年大腦發育的作用，適合在青少年的食譜中添加。但由于EPA對青少年發育所必需的花生四烯酸的攝取有競爭作用，會對青少年視力及大腦的發育產生不利影響。微藻油脂肪酸成分較為簡單，在含有豐富DPA和DHA的同時，不含或只含極少量EPA，便于加工成面向不同人群的保健食品，尤其是適合作為青少年食品營養添加成分。同時DPA和DHA的生理功用也有一些差別，如將兩者分離開來，再針對不同的目標人群加以調配，可以更好的發揮各自的功能，提高產品效能。

本發明采用的硝酸銀柱法是利用Ag⁺能與不飽和脂肪酸中的碳碳雙鍵可逆反應生成絡合物的性質，生成的絡合物的穩定性與脂肪酸分子中雙鍵數和分子量有關，分子量越小，雙鍵數越多，生成的絡合物越穩定。不同脂肪酸分子的雙鍵數和分子量都不相同，因此可以用不同極性的洗脫液將它們分別洗脫下來，從而達到分離的目的。利用該方法可以從微藻油中分別獲得高純度二十二碳五烯酸(DPA)甲酯和二十二碳六烯酸(DHA)甲酯。

申請號03150169.9公開了一種從魚油中提取高純EPA、DHA的方法，其方法采用乙酯化工藝，皂化反應時間長達10小時。由于多不飽和脂肪酸具有熱不穩定性，在受熱情況下會產生較多自由基，會影響產品品質。事實上，多不飽和脂肪酸甲酯和乙酯均難于被人體吸收，需在后續處理中將其轉化成甘油脂才能作為食品添加成分。因此甲酯化受熱時間短，可以有效減少多不飽和脂肪酸的損失。

申請號03113397.5公開了一種經鹵蝦蛋白粉制取DHA價值的方法，該法前期制取鹵蝦粉工藝復雜，且也采用乙酯化方法，降低了得率。

發明內容

本發明目的是利用硝酸銀柱法得到高純度二十二碳五烯酸(DPA)甲酯和二十二碳六烯酸(DHA)甲酯，其中DPA含量由原料油的20.32％提高到99.61％，DHA含量44.83％提高到99.02％以上，硝酸銀柱法收率均在90％以上，尤其是二十二碳五烯酸(DPA)甲酯的提純工藝為本專利之首創。

在對二十二碳五烯酸(DPA)甲酯和二十二碳六烯酸(DHA)甲酯及其制備方法充分理解的基礎上，我們經過大量的探索和試驗提出了本發明，本發明的工藝方法發揮了硝酸銀柱法的優勢，可以從微藻油中分別獲得高純度二十二碳五烯酸(DPA)甲酯和二十二碳六烯酸(DHA)甲酯。

本發明的二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的制備方法，是以微藻油為原料制備的二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸混合脂肪酸制備二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯。

其方法如下：采用BF₃甲酯化法，取從微藻油中得到的二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸混合脂肪酸與BF₃-甲醇溶液混合，60～75℃下水浴回流10～30分鐘，加入飽和NaCl溶液除去BF₃，正己烷萃取混合甲酯后，蒸發除去溶劑即得混合脂肪酸甲酯。

本發明的二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的分離方法，是采用硝酸銀柱法進行分離。

所述的二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的分離方法，其步驟如下：將混合脂肪酸甲酯以硝酸銀硅膠柱層析，使用濃度梯度為0.5％～15％的丙酮-正己烷溶液為洗脫劑梯度洗脫，所得洗脫液蒸去溶劑后用氣相色譜檢測，合并相同組分的洗脫液，可分別得到高純度DPA甲酯和DHA甲酯。