[發明專利]高效生產豬白細胞干擾素的方法無效
| 申請號: | 200810052659.6 | 申請日: | 2008-04-08 |
| 公開(公告)號: | CN101250224A | 公開(公告)日: | 2008-08-27 |
| 發明(設計)人: | 古長慶 | 申請(專利權)人: | 天津生機集團股份有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/555 | 分類號: | C07K14/555;C07K1/14 |
| 代理公司: | 天津市三利專利商標代理有限公司 | 代理人: | 劉英蘭 |
| 地址: | 301609*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 高效 生產 白細胞 干擾素 方法 | ||
1、一種高效生產豬白細胞干擾素的方法,其特征在于具體實施步驟如下:
(1)無菌采集豬血,加入10μg/ml卡那霉素和適量抗凝劑,4.0℃冰箱放置;以2000-4000rpm離心豬血,收集灰黃層,用配置好的培養液稀釋細胞沉淀物,使白細胞濃度稀釋為每ml含1×105-1×107;
(2)白細胞懸液中加入少量干擾素,使其最終濃度為100-1000IU/ml,于37℃水浴攪拌培養0.5-2小時;
(3)再加入羧甲基茯苓多糖,使其最終濃度為25-100μg/ml,于37℃水浴攪拌培養1-2小時;
(4)然后在上述白細胞懸液中再加入適量誘生劑雞新城疫病毒,使其最終濃度為128-1280血凝單位/ml,37℃搖床攪拌培養18-24小時;
(5)待干擾素達到高峰值時,離心收集上清,加入鹽酸調至pH?2.0,4.0℃,放置1-4天,滅活病毒,再加NaOH調至pH?7.0,即得粗制豬白細胞干擾素。
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