[發明專利]一種以烏頭屬中藥材為原料制備單酯型生物堿的方法

有效

• 申請號: 200810050883.1
• 申請日: 2008-06-26
• 公開（公告）號: CN101301370A
• 公開（公告）日: 2008-11-12
• 發明（設計）人: 宋鳳瑞;包懿;劉志強;皮子鳳;劉淑瑩
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: A61K36/714
• 分類號: A61K36/714;C07D221/22;A61P29/00;A61P9/10
• 代理公司: 長春科宇專利代理有限責任公司
• 代理人: 馬守忠

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，具體涉及以黑順片、制川烏、制草烏等烏頭屬中藥材為原料制備單酯型生物堿的方法。?

背景技術

制草烏、黑順片和制川烏等中藥材是中藥附子、川烏和草烏的炮制品，均為中醫臨床常用的中草藥。中藥川烏和草烏中生物堿的類型主要為雙酯型，代表化合物主要有：烏頭堿(aconitine，AC)、中烏頭堿(mesaconitine，MA)、次烏頭堿(hypaconitine，HA)具有廣泛的藥理活性，如：抗炎、鎮痛、強心、抗心肌缺血缺氧等，但也有毒性大、中毒劑量低的缺點，所以中醫臨床用藥時一般用其炮制品，如：制草烏、黑順片和制川烏等。制草烏、黑順片和制川烏等烏頭屬中藥材中生物堿的類型主要為單酯型，代表化合物主要有：苯甲酰次烏頭原堿(benzoylhypaconine，BH)、苯甲酰中烏頭原堿(benzoylmesaconine，BM)、苯甲酰烏頭原堿(benzoylaconine，BA)等，大部分是由炮制過程中雙酯型生物堿水解轉化而來。在炮制過程中雙酯型生物堿雖沒有完全轉化為單酯型，但經過炮制后其毒性已大大降低。?

單酯型生物堿具有強心、消炎、鎮痛等顯著的生物活性，與雙酯型生物堿比較，其毒性較小，僅為雙酯型的1/1000～1/100，是臨床上發揮主要藥效的一類化學成分，具有重要的研究價值和廣闊的應用前景。?

目前，單酯型生物堿的制備方法，采用酸水滲漉法(李正幫等，天然產物研究與開發：Vol.9(1)，1997，9-14)，也有甲醇提取法的報道(Katagawa，Chem.Pharm.Bull.30(2)758-761(1982))。但根據實驗證明烏頭類生物堿在甲醇中容易分解，不宣大量提取。也有文獻提出用乙醇提取法提取烏頭類生物堿(丁立生等，天然產物研究與開發：Vol.6(3)，1994，50-54)，但乙醇提取法也有其不足之處，如：容易提取出淀粉、多糖等雜質，給后續分離工作帶來不便。單酯型烏頭類生物堿的分離方法現在主要采用柱色譜法，但柱色譜法存在由不可逆吸附導致產率低的缺點，況且分離過程十分耗時、耗力，不利于生物堿的大量分離提取。綜上所述，雖然對單酯型烏頭類生物堿的研究十分迫切，但是由于分?離提取比較困難，研究進展緩慢。?

發明內容

本發明的目的是提供一種制備單酯型生物堿的制備方法的方法。?

一種以烏頭屬中藥材為原料制備單酯型生物堿的方法，其特征是步驟和條件如下：將烏頭屬中藥材的制草烏、黑順片或制川烏干燥粉末浸于體積濃度為95％的乙醇中超聲提取2～3小時，在20～25℃室溫冷浸24小時，乙醇的用量ml是所述的藥材粉末重量g的5倍，濾出乙醇提取液，把浸過的藥渣按上述方法處理兩次，合并三次濾出的乙醇提取液，50～65℃下減壓蒸出溶劑，得粗浸膏；在粗浸膏中倒入是粗浸膏重量的10～12倍的無水乙醇進行醇沉，離心，得濾液，50～65℃下減壓蒸出溶劑制成總生物堿浸膏；將總生物堿浸膏用環己烷-乙醇-水體系進行萃取，所述的環己烷∶乙醇∶水的體積比為2∶1∶1，取萃取分層后所得到的下層溶液于50～65℃下減壓蒸出溶劑，制成單酯型生物堿粗浸膏，將該單酯型生物堿粗浸膏調配成pH8.5～9.5的堿性水溶液，置于100℃水浴加熱2～3小時，冷卻后用氯仿萃取，取萃取分層后得到的氯仿溶液于50～65℃下減壓蒸出溶劑，制成單酯型生物堿。?

圖1為包含所有生物堿的乙醇提取液電噴霧質譜圖。由圖可以看出乙醇提取的生物堿成分較多，單酯型生物堿主要有：苯甲酰次烏頭原堿(BH，質荷比m/z574)、苯甲酰中烏頭原堿(BM，質荷比m/z590)、苯甲酰烏頭原堿(，BA，質荷比m/z604)；?

雙酯型生物堿主要有：烏頭堿(AC，質荷比m/z646)、中烏頭堿(MA，質荷比m/z632)、次烏頭堿(HA，質荷比m/z616)，質荷比m/z在800～900區域主要是脂型生物堿，其中包含所有類型的生物堿，說明乙醇提取能力較強；?

圖2為通過萃取分層后所得的下層溶液中單酯型和雙酯型生物堿的質譜圖。其中不含有脂型生物堿，脂型生物堿的質荷比m/z在800～900區域內。?

圖3為堿性水解后的氯仿萃取液的質譜圖。圖中不含有雙酯型生物堿。烏頭堿(AC，質荷比m/z646)、中烏頭堿(MA，質荷比m/z632)、次烏頭堿(HA，質荷比m/z616)雙酯型生物堿被水解轉化，說明堿性條件下雙酯型生物堿能完全水解成單酯型生物堿。?