[發(fā)明專利]人參二醇組皂苷微生物轉化產(chǎn)物及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810050758.0
• 申請日: 2008-05-30
• 公開（公告）號: CN101284858A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發(fā)明（設計）人: 袁金田;張連學
• 申請（專利權）人: 吉林農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00;C07J17/00;C12P19/56;A61K31/704;A61K31/575;A61P25/00;A61P9/00;A61P3/10;A61P3/06;A61P35/00;A61P13/12;C12R1/645
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司
• 代理人: 趙正

技術領域

本發(fā)明涉及人參二醇組皂苷微生物轉化產(chǎn)物。

本發(fā)明還涉及其制備方法。

背景技術

五加科(Araliaceae)植物屬(Panax)植物具有很高的藥用價值，其主要有效成分為皂苷類成分。生曬參(Panax?ginseng?C.A.Meyer)中人參皂苷有多種生理活性，根據(jù)文獻調查結果，可以得到以下幾點啟示：(1)關于人參二醇組皂苷微生物合成技術使17位碳上支鏈降解，未見應用；(2)有抗炎、抗腫瘤、抗心律失常及抗衰老和益智等藥理作用；(3)利用微生物合成技術可得到人參二醇組皂苷支鏈降解產(chǎn)物，降解產(chǎn)物可能具有抗炎、抗腫瘤、抗心律失常及抗衰老和益智等藥理作用，(4)原人參二醇組皂苷的抗炎、抗腫瘤等活性的活性中心在原人參二醇配基上，而不在C₁₇側鏈上；是待進一步研究藥理活性的新化合物。

然而，人參二醇組皂苷微生物合成產(chǎn)物及其藥理活性的研究還未有相關報道。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供了(I)人參二醇組皂苷微生物轉化產(chǎn)物。

本發(fā)明還提供了這種皂苷微生物轉化產(chǎn)物的制備方法。

本發(fā)明提供了具有下述通式(I)人參二醇組皂苷微生物合成水

解產(chǎn)物：

其中R表示氫或葡萄糖基。

本發(fā)明的通式I化合物可按如下方法制備：

人參二醇組皂苷微生物合成產(chǎn)物的制備方法，該方法包括以下步驟：

a.生曬參(Panax?ginseng?C.A.Meyer)須根取須根粗粉，用稀酸調pH值為3～4，超聲提取，超聲時間每次30分鐘抽濾，合并濾液，上D-101大孔吸附樹脂柱，蒸餾水至無色且為中性，再用稀堿洗柱至流出液成堿性，再蒸餾水洗至中性且澄清無色，用75％乙醇洗脫至流出液無皂苷反應為止，將乙醇洗脫液減壓回收至干，殘渣即為人參皂苷粗品。

b.將人參總皂苷粗品溶于20倍量的95％乙醇中超聲溶解，抽濾，濾液減壓回收至干，殘渣即為精制人參皂苷。

c.取人參皂苷溶于乙醇，利用溶解度梯度，通過稀堿調節(jié)pH值使二醇型皂苷沉淀析出。具體方法：總皂苷溶于95％乙醇中過濾備用；將0.3％氫氧化鈉-乙醇溶液滴加入總皂苷的95％乙醇溶液中有沉淀析出，放置過夜；過濾得沉淀干燥即得人參二醇組皂苷即為原料。

d.將半知菌綱、絲孢菌目、絲孢菌科、擬青霉屬(Paecilomyces)的淡紫擬青霉(Paecilomyces?lilacinus)菌種接種到裝有PD培養(yǎng)基的三角瓶中，以搖床搖速60～80r/min在搖床上振蕩培養(yǎng)菌絲球三天，直徑大約為3～4mm。

e.將以分離得到的人參二醇組皂苷用少量甲醇溶解，加入到培養(yǎng)后的菌液中，使皂苷濃度分別保持為1.0mg/mL左右，以搖速80r/min培養(yǎng)一周。

f.將發(fā)酵液過濾，殘渣加蒸餾水超聲提取3次，每次10分鐘，并入濾液，減壓濃縮至100mL。用氯仿萃取、正丁醇萃取至無皂苷反應。合并氯仿、正丁醇萃取液，回收溶劑至干。

g.合并氯仿和正丁醇萃取物，先用D-101大孔樹脂75％乙醇洗脫除去色素至無皂苷反應，回收乙醇得褐黃色固體粉末即人參二醇組皂苷微生物轉化后產(chǎn)物。

h.人參二醇組皂苷微生物轉化產(chǎn)物用硅膠柱層析進行粗分(流動相：氯仿∶甲醇＝5∶1)得到(I)人參二醇組皂苷微生物合成產(chǎn)物，由于其溶于甲醇，故采用ODS進行純化，得常溫黃色粘稠狀液體。

本發(fā)明皂苷微生物轉化產(chǎn)物的藥理作用

1、對神經(jīng)系統(tǒng)的作用

可抑制給予一次可卡因產(chǎn)生的活動過度以及重復給予可卡因發(fā)生的逆轉耐受性和多巴胺受體過敏。這些作用可防止可卡因的不良反應，也可抑制扭體反應的腹部收縮和甲醛所致咬舔后足反應。

2、對心血管系統(tǒng)的作用

對小鼠急性腦缺血損傷有保護作用。對小鼠急性腦缺血損傷具有保護作用，其作用機制與減輕組織酸中毒，抑制脂質過氧化損傷有關。

對抗自由基對心肌細胞的損傷，保護細胞膜的完整性。對正常兔血小板聚集有抑制作用，可抑制失血性休克血小板腫脹，保持血小板的形態(tài)完整，減輕血小板聚集。

3、對失血性休克保護機理的研究

3.1、對單胺類遞質的影響

可抑制交感-腎上腺髓質系統(tǒng)，和失血休克晚期血小板對5-HT的釋放。

3.2、對血管緊張素的影響