[發明專利]菱角揮發油在制備抑瘤藥物中的應用

無效

• 申請號: 200810050668.1
• 申請日: 2008-04-29
• 公開（公告）號: CN101264111A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發明（設計）人: 牛鳳蘭
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61P1/16;A61P15/00;A61K131/00
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司
• 代理人: 魏征驥

技術領域

本發明屬于中藥技術領域。

背景技術

菱角為菱科植物的果實，又稱菱、菱實，是一種應用廣泛的藥食同用水生植物，菱實味甘鮮，性平，無毒，具有清熱祛暑，除濕祛風，益氣健脾功效，被藥典、中藥大辭典等廣泛收載。近年來研究表明，菱角具有抗腫瘤作用，可用于腫瘤的輔助治療，但其作用的有效成分一直未明確。

發明內容

本發明提供一種菱角揮發油在制備抑瘤藥物中的應用。

本發明菱角揮發油可通過現有文獻報導的方法獲得，優選為以下超臨界流體萃取方法獲得。具體方法是：

1、儀器、試劑與原料

HA221-50-06超臨界流體萃取儀(江蘇南通華安超臨界萃取有限公司)；TRACE-MS氣相色譜-質譜聯用儀(美國Finnigan公司)；AB104型電子天平(瑞士Mettle?toledo公司)。CO₂(食用級，液態純度為99.99％)乙醚、無水硫酸鈉等均為分析純。所用菱角均采自吉林省大安縣，并經吉林農業大學樊紹缽教授鑒定為東北菱(Trapa?manshurica?Fler)。

2、實驗方法

將干燥菱殼粉粹并過24目篩，稱取1760g盛入5L萃取釜。萃取溫度40℃-45℃，分離溫度45℃-50℃，萃取壓力25Mpa-30Mpa，分離壓力12Mpa-15Mpa，CO₂流量15-20kg/hr，待各條件穩定后開始等壓循環萃取，共萃取4h，每小時接取一次萃取物。將萃取物溶于50ml乙醚，無水硫酸鈉干燥，低溫存放，用于GC-MS檢測。

3、揮發油GC-MS檢測條件

氣相色譜：HP-5MS彈性石英毛細管柱(30m×0.25mm×0.25um)；進樣口溫度280℃；起始柱溫80℃，保持1min，以每分鐘20℃升至280℃，保持15min；載氣：氦氣，流量1.0mL/min；分流比30∶1；進樣量1μL。質譜：EI離子源；電子能量70eV；界面溫度280℃；離子流溫度180℃。掃描范圍：33-600U。通過G1701BA化學工作站數據處理系統，檢索Nist98譜圖庫，相對含量在1％以上的14種，含量占總化合物的75.2％，其中香豆素類1種，占總化合物的22.97％，脂肪族類2種，占總化合物的26.26％，酮類5種，占總化合物的13.08％，醛類1種，占總化合物的2.36％，吡喃類1種，占總化合物的2.15％，醇類1種，占總化合物的1.87％，酯類1種，占總化合物的1.47％，酚類1種，占總化合物的1.83％；含量較高的化合物依次為蛇床子素(22.97％)，9，12-亞油酸(17.18％)，棕櫚酸(9.08％)，4，5，6，7-四甲基苯并[c]呋喃酮(5.49％)。其中含量最高的香豆精類物質蛇床子素，具有抗菌、鎮靜、降壓、抗心律不齊、抗癌抗突變及提高機體免疫力等作用。另外，占揮發油總量26.26％的兩種脂肪酸具有較多的應用價值，其中亞油酸(LA)為人體必需脂肪酸，是共軛亞油酸(CLA)的前體物，而共軛亞油酸具有抗癌、抗動脈粥樣硬化等生理功能。

本發明的積極效果是：菱角揮發油對腫瘤細胞的生長增殖具有較明顯的抑制作用，藥效學實驗表明對人宮頸癌和肝癌的抑制作用明顯，并且無明顯的毒性反應。本發明藥物用法用量，口服劑量20毫克-100毫克/次·人，一日三次。

附圖說明

圖1是菱角揮發油總離子流圖。

圖2是菱角揮發油對Hela細胞的生長抑制曲線。

圖3是24h后對照組Hela細胞(×200)。

圖4是給藥24h后Hela細胞(×200)。

圖5是檢測揮發油誘導Hela細胞凋亡電泳圖。

具體實施方式

下面通過藥效學實驗來進一步說明菱角揮發油的抑瘤作用。

1.菱角揮發油對人宮頸癌細胞Hela的增殖抑制作用