[發明專利]一種鑒別龍眼肉質量的高效液相色譜檢測方法

無效

• 申請號: 200810048975.6
• 申請日: 2008-08-26
• 公開（公告）號: CN101344507A
• 公開（公告）日: 2009-01-14
• 發明（設計）人: 肖維強;王曉容;戴宏芬;黃炳雄;李建光;劉傳和
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院果樹研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司
• 代理人: 王守仁

1.一種鑒別龍眼肉質量的高效液相色譜檢測方法，其特征是：先對供試樣品進行剪碎研磨處理，供試樣品為新鮮龍眼果肉或制成的龍眼干，然后加水用超聲波提取，提取物經微孔膜過濾后，用已建立的高效液相色譜標準測定方法進行測定，得供試樣品色譜圖，將供試樣品色譜圖與標準龍眼肉色譜圖相比較，以此對供試樣品真假作出科學的評價；標準龍眼肉色譜圖是按照10種核苷標準品的分離方法建立的。

2.根據權利要求1所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是在利用高效液相色譜測定技術時，所采用的色譜條件為：Nucleosil?C18反相水性柱5μm，250mm×4mm；流動相為0.005mol/L的KH₂PO₄和甲醇；二元梯度洗脫，流速1mL/min；檢測波長260nm，柱溫35℃。

3.根據權利要求1或2所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是所述的高效液相色譜檢測方法，具體是采用包括以下步驟的方法：

(1)核苷類成分標準樣品的分離：

準確稱取各標準樣品2.5mg，精確至0.00001g，用水溶解并定容到5mL，混合標準樣品溶液用水稀釋至50μg/mL，以后呈2倍稀釋，做標準曲線；然后用色譜條件進行10種標準樣品的分離，得到10種標準樣品色譜圖；10種標準樣品分別是胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黃嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、次黃嘌呤核苷、鳥苷、胸苷和腺苷；

(2)供試桿品的處理：

A.將采集的新鮮龍眼去皮和核，于-20℃存放，備用；稱取備用龍眼果肉0.9～1.1g，精確到0.001g；再經剪碎研磨處理后移入25mL容量瓶中，加入10～15mL的水，進行兩次超聲波處理；然后，用水定容至刻度，進樣前用微孔過濾膜過濾，

或者，

B.將采集的新鮮龍眼果肉制成半干型龍眼干，龍眼干經70℃烘干至恒重后，稱取0.32g精確到0.0001g，龍眼肉的干：濕為1∶5.8～6.5；再剪碎研磨處理后移入25mL容量瓶中，加入14～16mL的水，浸泡3小時，超聲波處理30分鐘后定容至刻度，進樣前用微孔過濾膜過濾；

(3)供試樣品色譜圖的建立：

將處理后的供試樣品進行高效液相色譜分析，每個樣品重復3次；在所選定的色譜條件下，供試樣品得到滿意的分離，得到多種水溶性物質，其中有7種以上的核苷；并且所建立的供試樣品色譜圖含有多個峰，較大的峰有6個，其中腺苷、鳥苷、尿苷的峰較高或者峰面積較大時，即表示這三種核苷的含量也較高；然后根據標準曲線和峰值，計算出這三種核苷的含量；

(4)比較：

將供試樣品色譜圖與按上述同樣步驟已建立的標準龍眼肉色譜圖進行對比，利用腺苷、鳥苷和尿苷是標準龍眼果肉樣品中較穩定的核苷類特征性物質來鑒別供試樣品的真偽。

4.根據權利要求3所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是：步驟(2)所述的兩次超聲波處理，其中，第一次超聲波處理為20分鐘，停止10分鐘后再進行第二次超聲波處理，時間為10分鐘。

5.根據權利要求3所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是：步驟(2)所述的微孔過濾膜為0.5μm微孔過濾膜。

6.根據權利要求3所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是：步驟(2)所述的新鮮龍眼肉取自廣東省農業科學院果樹研究所果園，包括供試樣品和標準龍眼果肉樣品。

7.根據權利要求3所述的高效液相色譜檢測方法，其特征是：根據步驟(1)所述的標準曲線計算樣品中各核苷的含量，以此量化地對供試樣品進行龍眼果肉的質量評估。

8.一種根據權利要求1至7中任一權利要求所述高效液相色譜檢測方法的用途，其特征是：在鑒別龍眼果肉真偽中的應用。