[發(fā)明專利]5－氨基－3－氰基－1－(2，6－二氯－4－三氟甲基苯基)－4－苯基吡唑作為殺蟲劑的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810048437.7
• 申請日: 2008-07-17
• 公開（公告）號: CN101317571A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 巨修練;余勇;陳達(dá)
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢工程大學(xué)
• 主分類號: A01N43/56
• 分類號: A01N43/56;A01P7/00
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司
• 代理人: 崔友明

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑作為殺蟲劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)

氟蟲腈(Fipronil，見下)是20世紀(jì)90年代中期成功開發(fā)的一種高效殺蟲劑。它屬于苯基吡唑類化合物，能有效防治半翅目、鱗翅目、纓翅目等害蟲和其他一些對現(xiàn)有殺蟲劑產(chǎn)生抗性的害蟲。氟蟲腈作為殺蟲劑的另外一大優(yōu)點(diǎn)就是對昆蟲活性高，而對哺乳動物毒性較低。日本科學(xué)家就氟蟲腈對大鼠DRG神經(jīng)元GABA_A受體的調(diào)控作用進(jìn)行了詳細(xì)研究。結(jié)果表明氟蟲腈能緩慢抑制GABA誘導(dǎo)離子流，IC₅₀值為1.6μM，且氟蟲腈對受體的抑制作用發(fā)生在通道打開之前。氟蟲腈的商業(yè)成功刺激了含有2，6-二氯-4-三氟甲基取代基的相關(guān)芳基異環(huán)化合物的研究(見圖1)?；衔颙KU?0422(吡唑)、SN606011(三唑)和LY219048(spirosultam)等為典型的GABA受體非競爭性拮抗劑，對相關(guān)化合物的研究，是人們開發(fā)殺蟲劑的熱點(diǎn)。

5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑作為氟蟲睛的類似物，現(xiàn)有技術(shù)沒有任何記載它作為殺蟲劑的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑作為殺蟲劑的應(yīng)用。

本發(fā)明將所用的5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑在甲醇、甲苯等溶劑中溶解加入表面活性劑，5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑在藥液中的濃度為(1-100)mg/L，可用該藥液對植物莖葉等器官表面噴施或拌種，防治農(nóng)作物害蟲。5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑特別是針對鞘翅目、半翅目、鱗翅目、纓翅目等十分有效。

為了證明本發(fā)明的5-氨基-3-氰基-1-(2，6-二氯4-三氟甲基苯基)-4-苯基吡唑作為殺蟲劑的用途，發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)室采用了如下的測定方法進(jìn)行生物活性測定：

家蠅腦膜蛋白的制備：震蕩干冰冰凍的成年家蠅，在干冰溫度下，通過2mm直徑的分子篩分離家蠅頭部與體部組織，再通過1mm直徑的分子篩過濾，回收家蠅的頭部組織，于約20ml含0.25mol/L蔗糖的10mmol/L?Tris-HCl緩沖溶液(pH?7.5)中經(jīng)聚四氟乙烯-玻璃勻漿器勻漿，漿液稀釋兩倍后經(jīng)低溫離心分離(500g)5min，上曾懸浮物通過四層64mm直徑的尼龍孔網(wǎng)過濾后，經(jīng)低溫高速離心(25000g)30min，所得下層蛋白重新懸浮于上述緩沖溶液中，并于冰浴下保持30min，再經(jīng)低溫高速離心(25000g)30min后，將下層蛋白懸浮于10mmol/L磷酸鈉和300mmol/L?NaCl(pH?7.5)的緩沖溶液中，該蛋白溶液定量后可直接用于受體-配體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。

大鼠頭膜組織(Rat?Head?Membrane)的制備：雄性五周齡的Wistar大鼠經(jīng)頸部脫位致死后，取出全部腦組織，于1mM乙二胺四乙酸(EDTA)中勻漿，然后于1000g下離心10min。取上清液于25000g下離心30min。最終沉淀物懸浮于1mM?EDTA溶液中，裝入具有玻璃紙的透析管，在冰浴下采用經(jīng)蒸餾的去離子水透析，內(nèi)層懸浮物于25000g下離心30min，丸狀小球即是所需產(chǎn)物，儲存于-80℃?zhèn)溆?，于結(jié)合實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天，重新懸浮于所述的磷酸緩沖溶液中開始實(shí)驗(yàn)。

蛋白質(zhì)測定：本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)過改進(jìn)的Bradford方法測定蛋白質(zhì)。以5mg/10ml的結(jié)合緩沖溶液溶解牛血清白蛋白，并依次稀釋到0μg/0.2ml、25μg/0.2ml、50μg/0.2ml、75μg/0.2ml、100μg/0.2ml。然后分別加入5ml?CBB?G-250溶液，不同的溶液經(jīng)紫外分析儀(UV-120-02)在595nm處檢測，其結(jié)果繪出校準(zhǔn)曲線。取50μl上述方法制備的家蠅頭膜組織溶液稀釋到0.2ml，然后加入5ml?CBB?G-250溶液，在同樣的條件下，采用紫外分析儀(UV-120-02)在595nm處檢測。家蠅頭膜組織溶液稀釋到200μg/0.9ml備用。

I)親和性測定過程：