[發(fā)明專(zhuān)利]人纖維蛋白原制劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810046747.5
• 申請(qǐng)日: 2008-01-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101229367A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁小明
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江西博雅生物制藥股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K38/36
• 分類(lèi)號(hào): A61K38/36;A61K35/14;A61P7/04;C07K14/75
• 代理公司: 南昌洪達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所
• 代理人: 劉凌峰

1.一種人纖維蛋白原制劑的制備方法，其特征是制備方法步驟為：

(1)融漿：將原料血漿，先用溫度低于30℃的75％酒精噴淋，再用溫度低于30℃注射用水沖洗盡酒精并吹干，然后將原料血漿破袋后輸送到融漿罐，用30～35℃的水進(jìn)行夾層循環(huán)融漿，血漿融化后，及時(shí)停止水循環(huán)，把血漿溫度控制在0～4℃之間，離心分離沉淀，去除沉淀后的血漿輸送至反應(yīng)罐進(jìn)行提取分離；

(2)組分I沉淀：血漿進(jìn)入反應(yīng)罐后，計(jì)量、啟動(dòng)攪拌并控制血漿的溫度在0～1℃之間，滴加緩沖液；控制流速不超過(guò)1.0升/分鐘，調(diào)節(jié)pH值為6.80～7.20；加-20℃以下的50％酒精至8％，流速為1.0～1.2升/分，溫度控制在-1～-3℃；加完酒精后進(jìn)行離心，離心得組分I沉淀和組分I?8％上清液，組分I沉淀進(jìn)行下步工序；

(3)組分II沉淀：稱(chēng)出組分I沉淀重量A，根據(jù)沉淀的重量配制沉淀溶解液A，將沉淀粉碎后加入10倍沉淀重量的溶解液A，在35～37℃的條件下攪拌溶解約0.5小時(shí)，用板框?yàn)V器過(guò)濾溶解液，過(guò)濾時(shí)保持流速為1.5～2.0升/分鐘，根據(jù)濾液的體積，配制含11％Tween80，3.3％磷酸三丁酯的溶液，溫度30℃以下，按濾液體積，以每升濾液加100ml比例，在攪拌下以0.5升/分的速度加入濾液中，并在水浴24～26℃的條件下緩慢攪拌保溫6小時(shí)，以有效滅活脂包膜病毒，保溫結(jié)束后，把濾液轉(zhuǎn)移至冷操作間，將溶液的溫度降至0～1℃之間，繼續(xù)攪拌30分鐘，測(cè)定pH值為7.00～7.10，連接離心機(jī)離心，控制離心出液的流速為2.5～3.0升/分/臺(tái)、出液溫度為-1～-3℃，離心結(jié)束后，稱(chēng)取沉淀重量B；

(4)組分III沉淀：根據(jù)沉淀的重量B配制沉淀溶解液B，將沉淀粉碎后加入10倍沉淀重量的溶解液B，在35～37℃的條件下攪拌溶解半小時(shí)，連接板框?yàn)V器過(guò)濾溶解液，把濾液轉(zhuǎn)移至冷操作間，將溶液的溫度降至0～1℃之間，加入-20℃以下的50％酒精至8％，加完后繼續(xù)攪拌30分鐘，測(cè)定pH值為7.00～7.10，開(kāi)始離心，控制離心出液的流速為2.5～3.0升/分/臺(tái)、出液溫度為-1～3℃，離心結(jié)束后，稱(chēng)出沉淀重量C；

(5)原液制取：根據(jù)沉淀重量C配制溶解液C，將沉淀粉碎后加入4.5～5.5倍重量溶解液C，在35～37℃的條件下攪拌溶解約0.5小時(shí)，然后在99.5±5℃溫度下，保溫30分鐘以滅活非脂包膜病毒，過(guò)濾溶解液，取過(guò)濾液測(cè)定蛋白含量，根據(jù)測(cè)定的蛋白含量，用溶解液C調(diào)節(jié)蛋白濃度為2.5～3.5％，檸檬酸三鈉含量為1.55±0.05％，氯化鈉含量為0.85±0.05％，精氨酸鹽酸鹽含量為4.5±1％，用5％HCI調(diào)節(jié)pH值為7.0±0.2。

2.如權(quán)利要求1所述的人纖維蛋白原制劑的制備方法，其特征是溶解液A的配制方法為：1.4％檸檬酸三鈉，0.9％氯化鈉、1.1％的蔗糖混合，加入注射用水溶解后，攪拌均勻，并用5％HCI調(diào)節(jié)pH值為7.00～7.10，在35～37℃的條件下攪拌溶解0.5小時(shí)。

3.如權(quán)利要求1所述的人纖維蛋白原制劑的制備方法，其特征是溶解液B的配制方法為：1.4％檸檬酸三納，0.9％氯化鈉混合，加入注射用水溶解后，攪拌均勻，并用5％HCI調(diào)節(jié)pH值為7.00～7.10，在35～37℃的條件下攪拌溶解半小時(shí)。

4.如權(quán)利要求1所述的人纖維蛋白原制劑的制備方法，其特征是溶解液C的配制方法為：1.55％檸檬酸三鈉、0.85％氯化鈉、4.5％的精氨酸鹽酸鹽混合，加入注射用水溶解后，攪拌均勻，并用5％HCI調(diào)節(jié)pH值為6.90～7.10，溫度控制在35～37℃。