[發(fā)明專(zhuān)利]一株假單胞菌及其在生物還原和生物吸附中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810044958.5
• 申請(qǐng)日: 2008-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101531970A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李大平;何曉紅;陶勇;王曉梅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/38;C02F103/16
• 代理公司: 成都賽恩斯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙）
• 代理人: 彭曉波

1.一株假單胞菌，其特征是：拉丁文學(xué)名Pseudomonas?alcaliphila?sp.MBR，保藏號(hào)為CGMCC?No.2318，對(duì)金屬離子或/和非金屬離子具有還原能力，對(duì)金屬離子具有吸附能力；菌落白色，菌落邊緣不整齊，但光滑濕潤(rùn)，有光澤，黏稠不透明；培養(yǎng)該細(xì)菌的培養(yǎng)基NCTS成分為：KNO₃0.5-1.0g，KH₂PO₄0.1-1.0g，MgSO₄·7H₂O?0.01-1.0g，F(xiàn)eCl₃·6H₂O?0.05g，CaCl₂·2H₂O0.2g，檸檬酸三鈉0.9-6.9g，蒸餾水1000ml。

2.權(quán)利要求1所述的假單胞菌，其特征是：該細(xì)菌在好氧條件下，既能還原硝酸鹽產(chǎn)生氨，也能把金屬離子或/和非金屬離子還原為單質(zhì)。

3.權(quán)利要求1所述的假單胞菌，其特征是：還原的金屬離子有Fe(Ⅲ)，Mn(Ⅱ)，Cu(Ⅱ)，Ni(Ⅱ)，Cd(Ⅱ)，Co(Ⅱ)，Mo(Ⅵ)，Pb(Ⅱ)，Ti(Ⅳ)；還原的非金屬離子有Si(Ⅳ)，Se(Ⅳ)，Te(Ⅳ)。

4.權(quán)利要求1或3所述的假單胞菌，其特征是：還原金屬Ti(Ⅳ)的步驟和方法如下：

①取百分比濃度為15-18％Ti(SO₄)₂溶液0.5ml至150ml三角瓶中，加入百分比濃度為25-28％氨水1.7ml，再加入4.0ml濃度為85-90％的乳酸，加水至150ml，并逐漸水浴加熱至70℃，待混濁變澄清即獲得2mMTi(SO₄)₂溶液；

②配制的150ml?2mM?Ti(SO₄)₂溶液中加入KH₂PO₄300mg，MgSO₄150mg，F(xiàn)eCl₃.6H₂O7.5mg，CaCO₃1.5mg，混合均勻，調(diào)節(jié)pH7.0，塞上棉塞，于121℃高溫滅菌20min，冷卻后接種200μl-500μl?Pseudomonas?alcaliphilasp.MBR菌種，置于110rpm，28℃搖床振蕩培養(yǎng)，3-5d后經(jīng)離心、去離子水洗、再離心，收集沉淀物。

5.權(quán)利要求1或3所述的假單胞菌，其特征是：還原金屬離子或/和非金屬離子Fe(Ⅲ)，Mn(Ⅱ)，Cu(Ⅱ)，Ni(Ⅱ)，Cd(Ⅱ)，Co(Ⅱ)，Mo(Ⅵ)，Pb(Ⅱ)，Si(Ⅳ)，Se(Ⅳ)，Te(Ⅳ)的步驟和方法如下：

①將斜面保存的菌株接種于經(jīng)滅菌的LB液體培養(yǎng)基中，置于28℃，110rpm搖床振蕩培養(yǎng)3d進(jìn)行菌種的活化，然后按0.2％接種量轉(zhuǎn)接到NCTS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h；

②配制培養(yǎng)基NCTS，121℃高溫滅菌20min，待培養(yǎng)基冷卻后，接種步驟①中新培養(yǎng)的MBR菌種50-200μl；

③在步驟②所述培養(yǎng)基中加入金屬離子或非金離子，在pH?6.0-10.0，溫度28-38℃，100-150rpm搖床振蕩培養(yǎng)3-5d后經(jīng)離心、去離子水洗、再離心，收集沉淀物。

6.權(quán)利要求1所述的假單胞菌，其特征是：吸附的金屬離子有Cu(Ⅱ)，Zn(Ⅱ)，Ni(Ⅱ)，Cd(Ⅱ)，F(xiàn)e(Ⅲ)，Mn(Ⅱ)，Co(Ⅱ)，Pb(Ⅱ)，Al(Ⅲ)。

7.權(quán)利要求1所述的假單胞菌，其特征是：吸附金屬離子的方法為：

①菌種的活化，將斜面保存菌株接種于經(jīng)滅菌的LB液體培養(yǎng)基中，置于28℃，110rpm搖床振蕩培養(yǎng)3d，然后按0.2％接種量轉(zhuǎn)接到NCTS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h獲得用于吸附菌種；

②配制NCTS培養(yǎng)基，121℃高溫滅菌，冷卻后接種步驟①中新培養(yǎng)的MBR菌種，加入濃度為20-450mg/L金屬離子，在溫度28-38℃，50-150rpm搖床振蕩培養(yǎng)3-5d后經(jīng)離心、去離子水洗、再離心，收集沉淀物，溶液中金屬離子得到去除。

8.權(quán)利要求1或2或3所述的假單胞菌在生物還原和生物吸附中的用途，其特征是：用于生物冶金、生產(chǎn)金屬及非金屬單質(zhì)、環(huán)境中含金屬離子廢水處理，以及土壤和水體中有害金屬離子、非金屬離子的去除。