[發(fā)明專利]一種固相合成西曲瑞克的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810043454.1
• 申請(qǐng)日: 2008-06-06
• 公開（公告）號(hào): CN101284863A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐紅巖;金健林;袁瑩;葛剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉爾生化（上海）有限公司
• 主分類號(hào): C07K1/04
• 分類號(hào): C07K1/04;C07K1/06;C07K1/20
• 代理公司: 上海浦東良風(fēng)專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 張勁風(fēng)

1、?一種固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是包括以下步驟：以芴甲氧羰基4-甲苯氫胺樹脂作起始原料，按照固相合成的方法，依次連接具有芴甲氧羰基保護(hù)的氨基酸，獲得保護(hù)的十肽樹脂，其間依次脫去芴甲氧羰基，用苯并三氮唑-N，N，N′，N′磷酸-四甲基脲六氟酯/1-羥基苯駢三唑或N，N-二異丙基碳化二亞胺/1-羥基苯駢三唑中的一種為縮合劑進(jìn)行接肽反應(yīng)，得保護(hù)的十肽樹脂后，進(jìn)行乙酰化反應(yīng)，然后同步進(jìn)行脫側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)及切肽，獲得醋酸西曲瑞克粗品，將醋酸西曲瑞克粗品溶于乙腈/水溶液中過濾，并經(jīng)C18或C8色譜柱進(jìn)行分離純化，再冷凍干燥，獲得醋酸西曲瑞克醋酸鹽或醋酸西曲瑞克三氟醋酸鹽。

2、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是依次采用芴甲氧羰基保護(hù)的氨基酸為：芴甲氧羰基脯氨酸，芴甲氧羰基(2，2，4，6，7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰)精氨酸，芴甲氧羰基亮氨酸，芴甲氧羰基-D-瓜氨酸，芴甲氧羰基(叔丁基)酪氨酸，芴甲氧羰基(叔丁基)絲氨酸，芴甲氧羰基-3-D-吡啶丙氨酸，芴甲氧羰基-4-氯-D-苯丙氨酸。

3、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是脫去芴甲氧羰基使用濃度20％六氫吡啶的N，N-二甲基甲酰胺溶液。

4、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是接肽反應(yīng)的反應(yīng)溫度為35-50℃，反應(yīng)時(shí)間為0.5-2小時(shí)。

5、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是所述的乙酰化反應(yīng)，在十肽樹脂中加入體積比為1∶2∶2的醋酐、吡啶和二氯甲烷的混合溶液反應(yīng)2小時(shí)。

6、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是所述的切肽為：加入預(yù)冷至-10～20℃的切肽試劑，所述的切肽試劑是體積比為87.5/5/5/2.5的三氟醋酸/硫醇/三異丙基硅烷/水或體積比為86.5/1/5/2.5/5的三氟醋酸/苯甲硫醚/對(duì)甲酚/硫醇/水，30-50℃切肽反應(yīng)1.5-3小時(shí)，濾出溶劑，加入乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚洗滌，在室溫，置干燥器中，減壓干燥2-5小時(shí)，獲得醋酸西曲瑞克粗品。

7、?根據(jù)權(quán)利要求1所述的固相合成西曲瑞克的制備方法，其特征是所述的C18或C8柱分離純化，流動(dòng)相∶磷酸鹽或三氟醋酸鹽∶乙腈的體積比為(0.1-100)∶(100-0.1)；檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm；用液相色譜儀跟蹤收集所需要的流出液，樣品峰合并后去鹽。