[發明專利]同時進行多種生物標志物并行檢測的方法和芯片試紙

無效

• 申請號: 200810042149.0
• 申請日: 2008-08-28
• 公開（公告）號: CN101661034A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 羅朝領;茅柳娟
• 申請（專利權）人: 上海領潮生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/52
• 分類號: G01N33/52;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及體外免疫分析技術領域，特別涉及一種同時進行多種生物標志物并行檢測的方法和芯片試紙。

背景技術

至上世紀70年代，發明酶標檢測技術平臺以來，免疫診斷行業已發生了翻天覆地的變化，使免疫檢測領域得到了快速成長。但由于酶標檢測體系檢測時間長，中間過程操作煩瑣，試劑檢測范圍窄，靈敏度低等缺點，因此該系統也慢慢的退出了臨床檢測的歷史舞臺。隨之而來的相繼又發明了膠體金標技術平臺，化學發光，時間分辨熒光檢測技術平臺以及免疫芯片技術平臺等。膠體金標技術在快速檢測領域起到了重要作用，為病人的診斷贏得了時間，而且使用方便，已深得用戶的喜歡；但由于檢測靈敏度低，無法準確定量的瓶頸，導致其不能充分發揮其快速診斷的需求，繼而不能與精準的化學發光等技術抗衡。化學發光，時間分辨熒光等技術平臺使檢測靈敏度得到了大大提高，并且通過全自動檢測系統的輔助，使檢測誤差和檢測效率都有了大大的提升；但是由于其檢測時間還是比較長，而且儀器設備比較龐大，只能在中心實驗室進行，從樣本收集到醫生得到檢測結果還是需要很長的一段時間，同時一個檢測只能得到一個標志物的結果，不能同時測出病人相關的多個生物標志物的結果，故此也大大限制了該技術平臺的充分發展。隨著芯片技術的發展，相繼出現了膜芯片，液體芯片，玻璃芯片等技術平臺，這為同一樣品達到多項生物標志物同步測試的目的，為病人檢測節約了時間和費用，同時節約了樣本的采集量；但該平臺技術還是存在煩瑣的實驗反應和操作增加了檢測誤差，同時儀器設備也比較龐大，也只能在中心實驗室進行，從樣本采集到醫生拿到實驗結果同樣需要較長的時間因此也限制了其發展。限制了在免疫檢測領域的進一步發展。都不能滿足快速發展的免疫領域的需求。

因此，亟待開發出一種即可以快速準確檢測，又可以同步檢測多項指標，并且還便于攜帶，隨時隨地都可以使用的新的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于通過提供一種同時進行多種生物標志物并行檢測的方法和芯片試紙，以改變目前存在的，檢測時間長、快速檢測不能定量和同一個檢測只能得到一個標志物的結果的問題，以使其達到可以同時定量檢測多個生物標志物并提高檢測的靈敏度，節約檢測時間的效果。

本發明是采用以下技術手段實現的：

一種同時進行多種生物標志物并行檢測的方法，包括：生物標志物中的多種生物標志物n，與信號標記物-配基Bn，試紙上的配基An發生親和結合形成四元復合物步驟及釋放信號的轉換步驟和計算步驟；其中所述多種生物標志物n與試紙上的配基發生結合步驟包括：將之相應配基An固定在纖維膜或者其他固體支持物上，多種生物標志物與信號標記物-配基Bn形成親和結合，并且該結合物在支持物上通過移動與固定在膜上的配基An結合，形成配基An、生物標志物n、配基Bn-信號標記物的四元復合物；

其中所述的釋放信號的轉換步驟和計算步驟包括：通過同時激發芯片試紙上的信號標記物、標記物受激發光激發后發生能量躍遷同時釋放出變異的光波或電子物質，檢測儀器接受標記物釋放出的光波或者電子傳遞物信號，并且將其轉化為數字信號，數據處理系統將標記物釋放的信號數據進行計算，最后輸出生物標志物的濃度。

前述的信號標記物為：熒光素(熒光素有：FITC，Cy2?TM，Alexa?TM?488，Cy3?TM，Alexa?TM?546常規熒光素)、熒光蛋白(GFP，R-PE，R-PC)、納米金、銀、納米熒光微球、量子點、稀土元素、放射元素、小分子化學物或色素。

前述的標記物釋放信號的大小與形成復合物的多少為正關聯。

前述的激發光可以是激發光，紫外光，紅外線，放射線光。

前述的標記物受激發光激發后釋放出的光波或電子物質不同于標記物本身的光波或電子物質。

前述的配基An、生物標志物n、配基Bn，其中n定義為1和1以上的連續自然數。

前述的生物標志物中的生物標志物n、信號標記物-配基Bn復合物在固相支持物上的運動作用力為層析、虹吸、滲濾、電泳、磁泳或重力方式等。

一種同時進行多種生物標志物并行檢測的芯片試紙，其特征在于：所述的芯片試紙上設有纖維素膜和玻璃纖維，在纖維膜上設有配基An，在玻璃纖維上吸附有信號標記物偶聯的配基Bn。前述的纖維膜可以為PV膜、NC膜、玻璃、塑料板或凝膠板。

本發明一種同時進行多種生物標志物并行檢測的芯片試紙。與現有技術相比，具有以下明顯的優勢和有益效果：

1、使用方便，攜帶方便，電源使用方便可以是干電池，也可以是普通交流電源；

2、適用于各種檢測體系，可以是免疫反應，可以是核酸反應等符合配基-受體結合的反應；