[發明專利]一種弓形蟲PCR檢測方法無效
| 申請號： | 200810041553.6 | 申請日： | 2008-08-11 |
| 公開（公告）號： | CN101649348A | 公開（公告）日： | 2010-02-17 |
| 發明（設計）人： | 胡建華;濮俊毅;高誠 | 申請（專利權）人： | 上海實驗動物研究中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 | 代理人： | 張 睿 |
| 地址： | 201203上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 弓形蟲 pcr 檢測 方法 | ||
1.一種弓形蟲PCR檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括步驟：
(1)將引物、Taq?DNA聚合酶、聚合酶穩定劑、四種單核苷酸、緩沖液、和PCR產物電泳前的上樣緩沖液混合，凍干成粉末；
(2)將步驟(1)得到的粉末和樣品混合，進行PCR反應，得到PCR產物；和
(3)將PCR產物進行電泳檢測；
所述樣品包括抽提自哺乳動物尿液和/或糞便的核酸。
2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示。
3.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述的緩沖液是10X?PCR緩沖液，其中含有氯化鉀，Tris-HCl，和Triton?X-100。
4.如權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述的10X?PCR緩沖液的配方是500mM氯化鉀，100mM?Tris-HCl，1v/v％Triton?X-100，和雙蒸水。
5.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，PCR產物電泳前的上樣緩沖液是10X上樣緩沖液，其中含有丙三醇，和GelRedTM。
6.如權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述的10X上樣緩沖液的配方是50v/v％丙三醇，和0.05v/v％GelRedTM。
7.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述的Taq?DNA聚合酶為紅色。
8.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述的哺乳動物選自靈長類動物、貓科動物、犬科動物、或嚙齒類動物。
9.如權利要求8所述的檢測方法，其特征在于，所述的哺乳動物選自猴子、豬、貓、犬、大鼠、或小鼠。
10.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述的樣品還包括陽性對照品和陰性對照品。
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