[發明專利]一種生物多糖微膠囊的用途

有效

• 申請號: 200810039834.8
• 申請日: 2008-06-30
• 公開（公告）號: CN101314035A
• 公開（公告）日: 2008-12-03
• 發明（設計）人: 沈炳謙
• 申請（專利權）人: 沈炳謙
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/39;A61K9/52;A61P35/00;B01J13/06
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 范征

技術領域

本發明屬于免疫學領域，更具體地，本發明涉及一種生物多糖微膠囊在制備促進T淋巴細胞增殖或提高T淋巴細胞對表達所述抗原或抗原決定簇的細胞特異性殺傷能力的物質中的用途。

背景技術

樹突狀細胞是迄今發現的功能最強、唯一已知能夠激活初始T淋巴細胞的抗原遞呈細胞。樹突狀細胞攝取腫瘤相關抗原，加工之后遞呈給T淋巴細胞并激活相應的CD8⁺和CD4⁺T淋巴細胞，以誘導機體細胞免疫和體液免疫功能，發揮主動免疫的抗腫瘤作用。此框架是目前腫瘤生物治療研究領域普遍接受的理論基礎，即利用樹突狀細胞疫苗進行抗腫瘤治療。

樹突狀細胞腫瘤疫苗成功的關鍵是提高樹突狀細胞對免疫原性較弱的腫瘤相關抗原的免疫原性。為此，本領域技術人員進行了多方面嘗試，如利用體外合成的腫瘤抗原多肽、腫瘤全細胞提取物以及腫瘤抗原核酸等多種形式的抗原來刺激樹突狀細胞，但這些方法普遍存在效率低、特異性差、副作用多等問題。一般情況下，T淋巴細胞需要接受樹突狀細胞反復刺激才能產生一定腫瘤殺傷效果，易產生免疫耐受等問題，經典方法也難以解決。因此，本領域迫切需要找到一種可提高抗原性蛋白的免疫原性的有效途徑，以克服現有技術存在的難題。

在本發明人的先期的工作中，已經制備了一種生物相容性良好，粒徑小的生物多糖微膠囊(參見專利ZL200310108684.9和專利申請200610024132.3)，該微膠囊可在酒精溶液中永久保存，也可懸浮在溶液中進行保存，時間可長達1年，仍保持穩定，而不出現絮凝或分解現象。由于該微膠囊是一種可降解的材料且性能穩定，有較好的應用價值，因此有必要對其進行進一步的開發和研究，以期找到新的用途。

發明內容

本發明的目的在于提供一種生物多糖微膠囊的用途，用于與抗原或抗原決定簇相偶聯，制備促進T淋巴細胞增殖或提高T淋巴細胞對表達所述抗原或抗原決定簇的細胞特異性殺傷能力的物質

本發明的另一目的在于提供一種可促進T淋巴細胞的增殖或提高T淋巴細胞對表達所述抗原或抗原決定簇的細胞特異性殺傷能力的物質，所述的物質含有生物多糖微膠囊，以及與之相偶聯的抗原或抗原決定簇。

在本發明的第一方面，提供一種生物多糖微膠囊的用途，用于與一種或多種抗原或抗原決定簇相偶聯，制備促進T淋巴細胞增殖或提高T淋巴細胞對表達所述抗原或抗原決定簇的細胞特異性殺傷能力的物質；其中，所述的生物多糖微膠囊含50-90％重量的生物多糖，且膠囊的直徑在50-1000納米之間。

在另一優選例中，所述的偶聯是共價偶聯。

在另一優選例中，所述的生物多糖微膠囊與抗原或抗原決定簇偶聯后，促進抗原的遞呈作用。

在另一優選例中，所述的生物多糖微膠囊與抗原或抗原決定簇偶聯后，促進T淋巴細胞對攜帶所述抗原或抗原決定簇的細胞的殺傷能力。

在另一優選例中，所述的生物多糖微膠囊是采用以下方法制備的：

a)將重量體積比為0.8-3％生物多糖水溶液和20-1000mM金屬鹽水溶液分別加入溶有表面活性劑的有機溶劑中，加入礦物油，混合，直到油相與水相密度相同，分別形成生物多糖水/油混懸液和金屬鹽水/油混懸液，其中所述生物多糖選自海藻酸鹽、Gellan膠、果膠、果膠酸、卡拉膠；所述的金屬鹽選自以下金屬離子形成的水溶性鹽：K⁺、Ca²⁺、Ba²⁺、Sr²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Al³⁺或其組合；

b)對步驟a)得到的生物多糖水/油混懸液和金屬鹽水/油混懸液在冰浴上分別用超聲波乳化，形成穩定的生物多糖水/油乳化液和金屬鹽水/油乳化液；

c)在4-35℃混合步驟b)得到的生物多糖乳化液和金屬鹽乳化液5-60分鐘，形成反應混合物；

d)對步驟c)的反應混合物離心分層，獲得水相反應產物；

e)反應產物脫水，然后洗滌除掉表面活性劑和油相物質，得到生物多糖微膠囊。

在另一優選例中，所述的生物多糖微膠囊是采用以下方法制備的：

a)將重量體積比為0.8-3％生物多糖水溶液加入溶有表面活性劑的有機溶劑中，加入礦物油，混合，直到油相與水相密度相同，形成生物多糖水/油混懸液；

b)對a)獲得的生物多糖水/油混懸液進行超聲乳化，形成穩定的生物多糖水/油乳化液；