[發(fā)明專利]從頭孢克洛萘酚復合物中提純頭孢克洛的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810038896.7
• 申請日: 2008-06-12
• 公開（公告）號: CN101314605A
• 公開（公告）日: 2008-12-03
• 發(fā)明（設計）人: 魏東芝;林金萍;許偉欽
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07D501/59
• 分類號: C07D501/59;C07D501/12
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司
• 代理人: 繆利明

技術領域

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體的說，涉及一種從頭孢克洛萘酚復合物中提純頭孢克洛的方法。

背景技術

頭孢克洛(Cefaclor)是一種半合成的第二代頭孢類抗生素，對于革蘭氏陽性菌有較強的抗菌活性，具有高效、廣譜和較強的化學穩(wěn)定性，是目前臨床治療細菌感染的重要藥物之一。頭孢克洛從二十世紀七十年代成功上市以來，作為高效、廣譜和良好的臨床安全性的抗生素，一直受到人們推崇，其化學結構如下所示：

酶法合成頭孢菌素是目前新興的合成頭孢菌素類抗生素的“綠色工藝”，專利WO/2006/069984描述，通過D-苯基甘氨酰胺或D-苯甘氨酸酯，尤其是D-苯甘氨酸酯進行7-氨基-3-氯-去乙酰氧基-頭孢菌酸(7ACCA)的(酶促)去乙酰化，制備頭孢克洛的方法。根據(jù)WO/1999/031109，為了獲得高轉化率與易于回收的頭孢克洛，采用萘酚為絡合劑，形成頭孢克洛沉淀是一個好的方法，采用酶法-絡合合成頭孢克洛的工藝，不僅可以提高轉化率，同時為簡化后續(xù)下游的分離提供了可能性。

實踐發(fā)現(xiàn)，要提高頭孢克洛的轉化率，需要加大底物D-苯甘氨酸酯的比例，通常D-苯甘氨酸酯與7-ACCA的比例要大于1，甚至達到2∶1的情況。因此，絡合后的頭孢克洛沉淀一般含有相對大量的苯甘氨酸和7-ACCA及一定量的苯甘氨酸酯或D-苯基甘氨酰胺。在實踐中，絡合后的頭孢克洛通常含有占頭孢克洛重量2-4％的苯甘氨酸，尤其是在為了盡可能多的獲得頭孢克洛萘酚復合物沉淀的情況下，苯甘氨酸甚至可以占到頭孢克洛重量的近5％，同時獲得的頭孢克洛中含有占總重量0.6％-1％的7-ACCA。

在已知合成頭孢克洛方法中(如US56085055；US5693790；WO9931109)，頭孢克洛成品均在含水溶液中經(jīng)反應結晶制得。然而實踐證明，從酶促反應后頭孢克洛萘酚復合物中通過結晶方法獲得的頭孢克洛通常含有高于頭孢克洛重量0.5％的苯甘氨酸，和高于頭孢克洛重量0.3％的7-ACCA，獲得的頭孢克洛不符合市售頭孢克洛原料藥的標準(中國藥典2005年版)。采用介質吸附的方法，例如活性碳吸附法(CN1179425A)，可以除去抗生素中的雜質。但是實踐發(fā)現(xiàn)，活性碳同樣會吸附抗生素，因而會顯著影響頭孢克洛的得率。

因此，有必要提供一種新的純化反應器酶法合成的頭孢克洛的方法，以降低終產(chǎn)物中雜質的含量，獲得頭孢克洛含量符合市售頭孢克洛原料藥標準的頭孢克洛產(chǎn)品，同時，對頭孢克洛的得率沒有明顯影響。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于，提供一種純化反應器酶法合成的頭孢克洛的方法，以降低終產(chǎn)物中雜質的含量，獲得頭孢克洛含量符合市售頭孢克洛原料藥標準的頭孢克洛產(chǎn)品。

本發(fā)明提供的方法，包括以下步驟：

A)水洗頭孢克洛萘酚復合物，然后以有機溶劑萃取水相中的雜質，收集水相；

B)調節(jié)水相溶液的pH值至1-2，然后上大孔吸附樹脂吸附；

C)待吸附完全后，使用低碳有機溶劑-水混合液作為流動相洗脫頭孢克洛，收集洗脫液。

根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，所述步驟A中用于萃取雜質的有機溶劑為醋酸丁酯。

根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，所述步驟A中所述有機溶劑萃取雜質的步驟重復多次。

根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，所述低碳有機溶劑-水混合液為甲醇-水混合液、乙腈-水混合液、丙酮-水混合液或異丙醇-水混合液；優(yōu)選為甲醇-水混合液或異丙醇-水混合液。

根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，所述大孔吸附樹脂為聚苯乙烯吸附樹脂及其衍生樹脂；優(yōu)選的，所述聚苯乙烯吸附樹脂及其衍生樹脂為Hz816吸附樹脂或Amberlite?XAD-4吸附樹脂。

綜上所述，采用本發(fā)明的純化方法，可以從頭孢克洛萘酚復合物中獲得高純度的頭孢克洛，且雜質含量低，符合《藥典》的標準，可以直接作為市售原料藥。

具體實施方式

以下結合具體實施例，對本發(fā)明作進一步說明。應理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。

除非特別說明，以下實施例中所使用的百分比(％)均為重量百分比。

在本發(fā)明的下述實施例中，頭孢克洛中有關物質，參考中國藥典2005年版中的方法，采用高效液相色譜(HPLC)檢測，具體如下：