[發明專利]化合物雙旋覆花內酯丁及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200810038566.8
• 申請日: 2008-06-05
• 公開（公告）號: CN101284833A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發明（設計）人: 張衛東;金慧子;單磊;蘇娟;柳潤輝;李慧梁;覃江江
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10;A61K36/28;A61K31/365;A61P35/00;A61P29/00
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛;盛志范

技術領域

本發明屬醫藥技術領域，具體涉及一種從植物旋覆花中分離得到的新化合物雙旋覆花內酯丁(Japonicone?D)及其制備方法和應用。

背景技術

旋覆花屬(Inula?L.)植物是菊科(Compositae)中的一屬，全世界約有100種，分別于亞洲、歐洲和非洲，以地中海地區為主。我國有20余種，本屬多種植物常供藥用，如土木香(I.helenium)可作為健胃、利尿、祛痰和驅蟲藥；大花旋覆花(I.britannica)具有消痰、下氣、軟堅、行水等功效。倍半萜類化合物是本屬植物的特征性成分，以桉烷型、吉馬烷型和愈創木烷型為主，還包括偽愈創木烷型、裂環桉烷型、欖烷型、蒼耳烷型和少量的無環倍半萜及倍半萜二聚體。研究表明，該屬植物中的倍半萜類化合物具有驅蟲殺蟲、抗菌抗腫瘤、抗病毒、免疫抑制的功效。

旋覆花(Inula?japonica)又名金佛花，金佛草(江浙)，六月菊(河北)。多年生草本。根狀莖短，橫走或斜生，有多少粗壯的須根。分布在我國北部、東北部、中部、東部、四川、廣東等地。我國通稱的旋覆花應是此種，供藥用。根及葉治刀傷、疔毒，煎服可平喘鎮咳；花是健胃祛痰藥，也治療胸中痞悶、胃部膨脹、噯氣、咳嗽、嘔逆等(《江蘇省藥材志》)。古方祛痰、除濕、利腸，又為治水腫的主要藥。我們對采自安徽亳州的旋覆花進行了系統的化學成分研究，以期明確其化學成分，為天然藥物化學研究積累資料；發現具有良好活性的天然產物，為后續深入的研究開發提供物質基礎。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的雙倍半萜內酯類天然化合物及其制備方法和其在制備抗腫瘤、抗炎藥物中的應用。

本發明提供的新的雙倍半萜內酯類化合物是從旋覆花(生長于安徽亳州)中提取分離得到，命名為雙旋覆花內酯丁(Japonicone?D)，其化學結構式如下：

雙旋覆花丙酯丁D。

該化合物的制備方法如下：

(1)提取：將旋覆花地上部分干燥，粉碎，以80～95％乙醇室溫浸泡提取3～4次，每次12～24小時；合并提取液，提取液減壓濃縮成流浸膏，加水稀釋后先以石油醚萃取，再以二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集二氯甲烷部位；

(2)分離：將上述二氯甲烷部位應用硅膠柱色譜，以體積比為100∶1～2∶1的二氯甲烷/甲醇系統梯度洗脫，薄層色譜檢測，收集含有雙旋覆花內酯丁的流分，再經葡聚糖凝膠柱色譜，以體積比為1∶1的二氯甲烷/甲醇洗脫，最后經液相色譜制備，得雙旋覆花內酯丁。

本發明的雙倍半萜內酯類化合物Japonicone?D為白色粉末，由電噴霧離子質譜信號m/z?595[M-H]^-，高分辯質譜得該化合物精密質量數為619.2880[M+Na]⁺，推算其分子式為C₃₄H₄₄O₉。該化合物的結構通過¹H-NMR，¹³C-NMR，2D-NMR等手段進行確證。¹H和¹³C核磁共振數據見表1：

表1Japonicone?D的¹H和¹³C核磁共振數據

具體實施方式

下面的實施例可以使本專業技術人員更全面的理解本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例1：

將干燥的旋覆花(I.japonica)地上部分20.0kg粉粹，室溫下用95％的乙醇提取3次，每次分別用時24，12，12小時。將所得粗提物925.3g加適量水稀釋后，依次用石油醚，二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇萃取，收集二氯甲烷部位。將得到的二氯甲烷萃取物84.5g用200-300目的薄層硅膠分離，用CH₂Cl₂-MeOH(100∶0，50∶1，20∶1，10∶1，5∶1，2∶1，)進行梯度洗脫。薄層色譜檢測，分別收集其中含有雙旋覆花內酯丁的組分，再采用Sephadex?LH-20進行分離，用CH₂Cl₂-MeOH(1∶1)進行洗脫，得到混合物，香草醛濃硫酸顯色為倍半萜類化合物，采用prep?HPLC分離得到雙旋覆花內酯丁(Japonicone?D)98mg。

實施例2：雙旋覆花內酯丁的細胞毒活性實驗

1、實驗材料

1.1、受試樣品