[發(fā)明專利]內(nèi)皮細(xì)胞生物反應(yīng)器及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810038532.9
• 申請(qǐng)日: 2008-06-04
• 公開（公告）號(hào): CN101555453A
• 公開（公告）日: 2009-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丁峰;顧勇;謝瓊虹;劉駿峰;長(zhǎng)谷川冰;李一;張家瑛;林善錟;平易;梁偉民;朱建國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院;博傲西騰醫(yī)療科技(上海)有限公司
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;C12N5/06;A61F2/00;A61P31/00
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 吳桂琴

1.植有內(nèi)皮細(xì)胞的生物反應(yīng)器在制備治療重癥膿毒癥生物制品中的用途；

所述的植有內(nèi)皮細(xì)胞的生物反應(yīng)器是采用聚四氟乙烯無紡布作為內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的載體，聯(lián)合中空纖維生物反應(yīng)器，構(gòu)建制成內(nèi)皮細(xì)胞生物反應(yīng)器；所述的中空纖維生物反應(yīng)器的外殼為聚碳酸酯，中空纖維為聚砜膜，分子截留量為在50～100kD，所述的聚四氟乙烯無紡布位于所述的中空纖維外側(cè)的間隙中，所述的內(nèi)皮細(xì)胞種植在所述的無紡布上，內(nèi)皮細(xì)胞的數(shù)量為3×10⁹以上；所述的內(nèi)皮細(xì)胞為動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。

2.按權(quán)利要求1所述的用途，其特征是所述的生物反應(yīng)器通過下述方法和步驟制備：

1)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

采用豬髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞于含胎牛血清和青霉素，鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，5％CO2、37℃孵育，細(xì)胞達(dá)90％融合后，PBS洗滌，加入0.25％胰蛋白酶-0.02％EDTA?1∶1混合液消化，消化后1800rpm離心5min，棄上清，加入上述RPMI1640培養(yǎng)液，吹打?yàn)榧?xì)胞懸液，傳代培養(yǎng)；

2)制備內(nèi)皮細(xì)胞生物反應(yīng)器

采用聚四氟乙烯無紡布為載體的反應(yīng)器，用生理鹽水沖洗反應(yīng)器的內(nèi)腔和外腔后，將上述制得的內(nèi)皮細(xì)胞懸液植入其外腔，封閉外腔口；內(nèi)腔與培養(yǎng)液循環(huán)式人工毛細(xì)管培養(yǎng)系統(tǒng)相連接，采用步驟1）的RPMI?1640培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，管路連接后將整個(gè)裝置置于5％CO₂、37℃培養(yǎng)箱中孵育，制得內(nèi)皮細(xì)胞生物反應(yīng)器。?