[發明專利]啤酒花提取物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 200810037197.0
• 申請日: 2008-05-09
• 公開（公告）號: CN101574398A
• 公開（公告）日: 2009-11-11
• 發明（設計）人: 林君
• 申請（專利權）人: 上海信誼百路達藥業有限公司
• 主分類號: A61K36/60
• 分類號: A61K36/60;A61P35/00
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司
• 代理人: 王 巍

技術領域

本發明涉及植物提取物，具體涉及一種富含查爾酮的啤酒花提取物及其制備方法與應用。

背景技術

啤酒花，記載于《新疆中草藥手冊》、《中藥大辭典》等，來源于桑科植物啤酒花的雌花序，功效利尿安神，抗癆消炎。現代研究認為，啤酒花主要含有苦味酸類、揮發油、黃酮類等成分，其中黃酮類成分包括查爾酮類和二氫黃酮類。藥材中查爾酮類含量很低，只有0.3％左右。研究表明，苦味酸類成分葎草酮具有抑制血管生成作用(MARICAL?S，TADAHIKOH等，Biochemical?and?biophysical?research?communications.2001，289：220-224)，C.L.MIRANDA、J.F.STEVENS等則報道了黃腐酚等5個查爾酮類成分以及異黃腐酚的抗乳腺癌和卵巢癌細胞增殖活性(Food?and?Chemical?Toxicology.1999，37：271-285)，專利02133523.0也介紹了黃腐酚D的抗腫瘤活性，8-異戊烯基柚皮素、6-異戊烯基柚皮素等黃酮類成分顯示了較強的雌激素活性(S.R.Milligan等，J.Clin.Endocrinol.Metab.1999，84：2249-2252)。由此，本發明人用不同查爾酮含量的啤酒花提取物進行的細胞試驗，結果顯示啤酒花提取物抑制腫瘤細胞生長的效果隨查爾酮類成分含量的增加而明顯提高。目前已有專利02815697.8等提供了啤酒花提取物的制備方法，但這些方法所得提取物查爾酮含量比較低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于研究設計高含量查爾酮類成分的啤酒花提取物。

本發明提供一種啤酒花提取物，它是通過下列方法制備的：

本發明提供的啤酒花提取物的制備方法，包括醇提、有機溶劑萃取、聚酰胺樹脂柱富集等步驟，具體為：

a)醇提：啤酒花加6～12倍W/V乙醇，乙醇濃度為70％～90％，提取次數為2～4次，合并提取液減壓濃縮，壓力-0.1Mpa，溫度80℃，減壓濃縮，壓力-0.1Mpa，溫度80℃，濃縮至無醇味；

b)萃取：取步驟(a)濃縮液加入0.5～3倍V/V石油醚、戊烷、己烷或庚烷進行萃取，萃取次數為1～3次，保留萃取后的水溶液；

c)富集：取步驟(b)萃取后的水溶液，上聚酰胺樹脂柱，依次用0％～70％濃度的乙醇由低到高濃度的程序梯度洗脫，收集最后的乙醇洗脫液，減壓濃縮，壓力-0.1Mpa，溫度80℃，濃縮到相對密度1.15～1.20，干燥，得到啤酒花提取物。

本發明優選的啤酒花提取物的制備方法為：

a)醇提：啤酒花加8倍量乙醇，乙醇濃度為80％，提取2次，合并提取液減壓濃縮，壓力-0.1Mpa，溫度80℃，濃縮至無醇味；；

b)萃取：取步驟(a)濃縮液加入1倍量V/V石油醚萃取2次，棄去萃取液，保留萃取后的水溶液；

c)富集：取步驟(b)萃取后的水溶液，上聚酰胺樹脂柱，依次用0％、30％、60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，減壓濃縮，壓力-0.1Mpa，溫度80℃，濃縮到相對密度1.15～1.20，干燥得到啤酒花提取物。

本發明方法所述步驟c)的干燥條件為：常溫干燥：105℃，3小時、真空干燥：-0.1Mpa，80℃，3小時或噴霧干燥：進風口溫度120℃，流速10ml/min。

本發明所使用的啤酒花為桑科植物啤酒花Humuluslupulus雌花序可以通過市售得到。

本發明提供的啤酒花提取物，富含查爾酮類成分，包括黃腐酚、黃腐酚D等，總查爾酮類含量達20％-25％；其中黃腐酚含量為18％-22％。

本發明針對查爾酮類成分進行富集，使查爾酮類成分含量達到(20％-25％)。

本發明的制備方法比較簡單，所用聚酰胺樹脂可以重復使用，使成本降低。本發明所提供的提取物是有效部位的高度濃縮，適宜制成各種需要的劑型，服用量少，利于患者。

本發明的又一目的是提供了上述啤酒花提取物在制備治療腫瘤藥物中的應用。

為了更好地理解本發明所提供的提取物的作用，本發明人分別制備查爾酮含量為1.2％、5％、20％的啤酒花提取物，以黃腐酚為對照，用四種人腫瘤細胞株進行體外試驗，結果見下表。

表1不同含量提取物對4種人腫瘤細胞株生長的半數抑制濃度IC50(ug/ml)

體外試驗結果顯示，啤酒花提取物抑制腫瘤細胞生長的效果隨查爾酮類成分含量的增加而明顯提高。

具體實施方式

實施例1