[發明專利]纖維膠凝蛋白3的應用

有效

• 申請號: 200810036125.4
• 申請日: 2008-04-16
• 公開（公告）號: CN101561440A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發明（設計）人: 曾嶸;賈偉平;吳家睿;謝佳輝;陳海冰;李榮霞;嚴中華
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院;上海交通大學附屬第六人民醫院;上海科致生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司
• 代理人: 繆利明

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明涉及一種纖維膠凝蛋白3用作檢測糖尿 病及糖尿病腎病的蛋白質分子標記物的應用。

背景技術

糖尿病是一種嚴重威脅人類健康的疾病，在發展中國家糖尿病的發病率和死亡率呈現 上升趨勢。中國已成為糖尿病的重災區，每年用于糖尿病治療的醫療支出大為增加，這表 明糖尿病已經成為嚴重危害我國人民生命財產安全的敵人，并且是影響社會經濟發展的一 個重要因素，因此加大力度進行我國糖尿病的基礎研究具有戰略意義。

對于糖尿病患者而言，早期發現、早期確診和早期治療糖尿病是讓他們恢復健康的關 鍵，要實現上述目標，就需要尋找到合適的標志物以實現糖尿病的早期發現，從而進一步 實現糖尿病的早期確診和早期治療；因此，以早期診斷和治療為目的去研究和尋找能夠用 作預測和診斷糖尿病的蛋白質分子標記物具有十分重要的意義。

糖尿病腎病是糖尿病常見的并發癥，是糖尿病全身微血管病變的主要表現。臨床特征 是蛋白尿和漸進性的腎功能損害，而晚期出現腎功能衰竭是糖尿病患者死亡的主要原因之 一。我國糖尿病患病的人數約有5千萬，近年來由于我國人均壽命的延長和飲食習慣的改 變，糖尿病患病的人數也直線上升，而且由于糖尿病治療方法的改變和生存時間的加長， 糖尿病腎病并發癥的發病人數也逐漸增加。在1型糖尿病患者中有30-40％的病人發生 糖尿病腎病，而2型糖尿病患者中有10-20％的病人發生糖尿病腎病。所以，早期診斷 糖尿病腎病可以減輕病人的痛苦和大大減少醫療支出。

在人體中，纖維膠凝蛋白(ficolin)包括三種類型，分別為ficolin-1、ficolin-2和ficolin-3。 ficolin的分子結構比較特殊和復雜，其一級結構及空間結構分別和甘露聚糖結合凝聚素 (MBL)及補體蛋白質C1q類似。ficolin的亞單位由三股螺旋的多肽鏈構成，包含纖維蛋 白素原結構和膠原樣結構。ficolin-2和ficolin-3主要存在于血清當中，屬分泌型，而ficolin-1 則是表達于肺和單核細胞膜表面的相關蛋白質。ficolin家族的生物學特性包括：參與糖類 的識別，可介導調理吞噬作用以及參與補體凝集素活化途徑。

纖維膠凝蛋白3(ficolin-3?isoform?1?precursor)的Genebank登錄號為gi|27754776， NCBI的登錄號為NP_003656，Swissprot登錄號為O75636，IPI號為：IPI00556567.1。ficolin-3 能夠結合晚期的凋亡細胞，通過膠原樣結構與凋亡細胞相結合，能大大地增強巨噬細胞對 凋亡細胞的攝取。在攝取過程中，整個ficolin-3分子與固定化的鈣網織蛋白相結合，其中 ficolin-3是通過纖維蛋白素原結構去結合正在凋亡的宿主細胞，可逆地通過膠原樣結構增 強吞噬作用，鈣網織蛋白-CD91復合體在整個過程中扮演了十分重要的角色。這些說明 ficolin-3在清除凋亡細胞的過程中發揮清除分子的功能(Honore?CLF，Hummelshoj?T， Hansen?BE，et?al.Molecular?Immunology?43(1-2)：136-136?39，2006)。

ficolin-3能夠與MBL相關的絲氨酸蛋白酶(MASP)結合進而激活補體系統。ficolin-3 可與MASP-1、MASP-2和sMAP(small?MBL-associated?protein)形成復合物參與到補體 凝集素活化途徑中。在ficolin-3的分離物中也能檢測到MASP-1、MASP-2和sMAP，而 且ficolin-3復合物與包被在ELISA板上的PSA(PSA為綠色氣球菌產生的多聚糖)結合 后會激活C4。當ficolin-3結合到包被有ficolin-3的抗體的ELISA板上，也能夠激活C4。 這些可以推斷ficolin-3能夠和MASP-1、MASP-2和sMAP形成復合物并激活補體凝集素 活化反應(Matsushita?M，Kuraya?M，Hamasaki?N，et?al.Journal?of?Immunology?168(7)： 3502-3506，2002)。