[發明專利]一種化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法無效
| 申請號： | 200810035959.3 | 申請日： | 2008-04-11 |
| 公開（公告）號： | CN101250514A | 公開（公告）日： | 2008-08-27 |
| 發明（設計）人： | 朱利民;薛勇;聶華麗;李樹白;張玉高;周立明 | 申請（專利權）人： | 東華大學;廣東溢達紡織有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/96 | 分類號： | C12N9/96 |
| 代理公司： | 上海泰能知識產權代理事務所 | 代理人： | 黃志達;謝文凱 |
| 地址： | 201620上海市松*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 化學試劑 修飾 木瓜蛋白酶 方法 | ||
1.一種化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，包括下列步驟：
(1)用化學試劑丁二酸酐修飾木瓜蛋白酶
將化學試劑丁二酸酐溶解在雙蒸水中配成100μg/ml～200μg/ml丁二酸酐溶液，取5～10ml加入到40～50ml濃度為5mg/ml～10mg/ml的木瓜蛋白酶溶液中，25～30℃下攪拌1～2個小時，得到修飾過的木瓜蛋白酶溶液；
(2)在0.1～0.2ml修飾過的木瓜蛋白酶溶液中加入0.7～1.4ml濃度為0.04～0.06M?pH5.0～9.0Tris-HCl緩沖液，調溫度至40℃～80℃，加入0mg/ml～20mg/ml洗滌劑進行反應20～40分鐘；
(3)在0.1～0.2ml濃度為5mg/ml～10mg/ml的木瓜蛋白酶溶液中加入0.7～1.4ml濃度為0.04～0.06M的Tris-HCl緩沖液，調溫度至40℃～80℃，加入0mg/ml～20mg/ml洗滌劑進行反應20～40分鐘；
(4)測試酶活性。
2.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述的丁二酸酐溶液濃度為150μg/ml～180μg/ml。
3.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述的木瓜蛋白酶溶液濃度為6mg/ml～9mg/ml。
4.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述的Tris-HCl緩沖液pH值為pH6.0～8.0。
5.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述步驟(2)、(3)中的溫度為50℃～70℃。
6.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述步驟(2)、(3)中的洗滌劑是國產雕牌洗衣粉，濃度為5mg/ml～15mg/ml。
7.根據權利要求1所述的化學試劑修飾木瓜蛋白酶的方法，其特征在于：所述步驟(2)、(3)中的反應時間為30分鐘。
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