[發(fā)明專利]化合物二聚兔耳風(fēng)萜A及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810035858.6
• 申請(qǐng)日: 2008-04-10
• 公開（公告）號(hào): CN101318946A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張衛(wèi)東;沈云亨;蘇娟;柳潤輝;李慧梁;徐希科
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D307/94
• 分類號(hào): C07D307/94;A61K31/365;A61K36/28;A61P29/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛;盛志范

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從植物大頭兔耳風(fēng)中分離得到的新二聚倍半萜類化合物二聚兔耳風(fēng)萜A(Ainsliaidimer?A)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

兔耳風(fēng)屬(Ainsliaea?DC)植物是菊科(Compositae)帚菊木族(Mutisieae?Cass)中的一屬，全世界70余種，我國有44種4變種，約占總數(shù)的37.5％。兔耳風(fēng)屬植物藥用種類較多。廣泛用于治療感冒咳喘、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、泌尿系統(tǒng)疾病等癥。我國的兔耳風(fēng)植物資源主要分布在長江流域及西南華南各省。《上海市藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《江西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》、《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》均有收載。

對(duì)兔耳風(fēng)屬植物的化學(xué)成分研究始于20世紀(jì)80年代，主要集中在杏香兔耳風(fēng)和械葉兔耳風(fēng)上。據(jù)報(bào)道兔耳風(fēng)屬植物主要含有倍半萜內(nèi)酯、倍半萜苷、甾體、三萜類化合物，研究表明倍半萜內(nèi)酯具有很好的抗腫瘤活性。且現(xiàn)代藥理及臨床應(yīng)用表明該屬植物有很好的抗炎作用。目前對(duì)大頭兔耳風(fēng)(Ainsliaea?macrocephala)化學(xué)成分的研究為空白。

大頭兔耳風(fēng)產(chǎn)于云南西北部和四川西南部，生于山坡林緣、針葉林下或山脊灌叢中，海拔2600～3100米，為多年生草本。《中國植物志》對(duì)大頭兔耳風(fēng)的形態(tài)特征進(jìn)行了詳細(xì)的描述。我們對(duì)采集自云南的大頭兔耳風(fēng)進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，以期明確其化學(xué)成分，為天然藥物化學(xué)研究積累資料；發(fā)現(xiàn)具有良好活性的天然產(chǎn)物，為后續(xù)深入的研究開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種新的二聚倍半萜類天然化合物及其制備方法和其在制備抗炎、抗腫瘤中藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明是從大頭兔耳風(fēng)(生長于中國云南麗江)中提取分離得到的一種新的二聚倍半萜類化合物，命名為二聚兔耳風(fēng)萜A(AinsliaidimerA)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

上述化合物的制備方法如下：

(1)提取：將大頭兔耳風(fēng)干燥全草，粉碎，以80～95％乙醇回流提取1～3次，每次1～2小時(shí)；合并提取液，對(duì)提取液減壓濃縮成流浸膏，加水稀釋后先以石油醚萃取，再以乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯部位；

(2)分離：將上述乙酸乙酯部位應(yīng)用硅膠柱層析，以體積比為20∶0～4∶1的氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，薄層層析檢測，收集含二聚兔耳風(fēng)萜A的流分，再經(jīng)葡聚糖凝膠柱層析，以體積比為1∶1的氯仿-甲醇洗脫，最后經(jīng)C18反相柱層析，以體積比為4∶6～6∶4的甲醇-水進(jìn)行洗脫，薄層層析檢測，得二聚兔耳風(fēng)萜A。

本發(fā)明的二聚倍半萜類化合物Ainsliaidimer?A為無色棱晶，由電噴霧離子質(zhì)譜信號(hào)m/z505[M-H]^-，高分辨質(zhì)譜得該化合物精密質(zhì)量數(shù)為505.2170[M-H]^-，推算其分子式為C₃₀H₃₄O₇；該化合物結(jié)構(gòu)通過X-衍射進(jìn)一步確定。¹H和¹³C核磁共振數(shù)據(jù)見表1。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究表明，本發(fā)明的化合物對(duì)腫瘤有明顯的抑制作用。因此，可用于制備抗腫瘤藥物。另外，該化合物對(duì)炎癥也有明顯的抑制作用，因此，可用于制備抗炎癥藥物。

表1Ainsliaidimer?A的¹H和¹³C核磁共振數(shù)據(jù)

J：偶合常數(shù)

具體實(shí)施方式

下面通過實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。

實(shí)施例1：大頭兔耳風(fēng)(Ainsliaea?macrocephala)全草5kg，以80％醇回流提取2次，每次2小時(shí)，提取液減壓濃縮成流浸膏，加水稀釋后先以石油醚萃取，再以乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯部位320g；將上述乙酸乙酯部位與300g硅膠混合拌樣，應(yīng)用硅膠柱層析，以體積比為20∶1～4∶1的氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，薄層層析檢測，收集含二聚兔耳風(fēng)萜A的流分，再經(jīng)葡聚糖凝膠柱層析，以體積比為1∶1的氯仿-甲醇洗脫，最后經(jīng)C18反相柱層析，以體積比為4∶6～6∶4的甲醇-水進(jìn)行洗脫，薄層層析檢測，得二聚兔耳風(fēng)萜A(Ainsliaidimer?A)純品198mg。

實(shí)施例2：Ainsliaidimer?A的細(xì)胞毒活性實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)材料

1.1、受試樣品