[發明專利]一種人工擴繁暖地大葉蘚配子體的方法

無效

• 申請號: 200810034650.2
• 申請日: 2008-03-14
• 公開（公告）號: CN101248759A
• 公開（公告）日: 2008-08-27
• 發明（設計）人: 婁玉霞;陳圓圓;曹同;郭水良
• 申請（專利權）人: 上海師范大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;C12N5/04
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司
• 代理人: 何葆芳

1.一種人工擴繁暖地大葉蘚配子體的方法，其特征在于，所述方法包括以下順序步驟：

1)將生長于自然環境中未展開葉片的暖地大葉蘚配子體表面消毒后，切取莖尖接種到誘導配子體產生原絲體的培養基上，進行培養40～60天，培養條件為：溫度20～25℃，光照強度2000～4000lx，光照時間10～12小時/天；所述誘導配子體產生原絲體的培養基配方為：

改良Knop培養基+1.0～2.0mg/l?2，4-二氯苯氧乙酸+0.05～0.10mg/l?6-芐基氨基嘌呤+5～10g/l蔗糖；

或者，改良Knop培養基+2.0mg/l?2，4-二氯苯氧乙酸+5～10g/l蔗糖；

或者，改良Knop培養基+0.1mg/l?6-芐基氨基嘌呤+5～10g/l蔗糖；

以上誘導配子體產生原絲體的培養基中改良Knop培養基配方為：KCl76.04mg/l、MgSO₄·7H₂O?828.2mg/l、KH₂PO₄?250.4mg/l、Ca(NO₃)₂·4H₂O1001.3mg/l、CuSO₄·5H₂O?0.027mg/l、KI?0.014mg/l、ZnSO₄·7H₂O?0.027mg/l、H₃BO₃?0.309mg/l、Na₂MoO₄·2H₂O?0.012mg/l、MnCl₂·4H₂O?0.198mg/l、CoCl₂·6H₂O?0.027mg/l、FeSO₄·7H₂O?27.8mg/l、Na₂-EDTA?37.3mg/l、酒石酸氨0.1151mg/l；

2)將步驟1)得到的原絲體轉入原絲體擴繁培養基上，進行培養40～60天，培養條件為：溫度20～25℃，光照強度2000～4000lx，光照時間10～12小時/天；所述原絲體擴繁培養基的配方為：改良Knop培養基+1.0～2.0mg/l2，4-二氯苯氧乙酸或6-糠基氨基嘌呤+5～10g/l蔗糖，其中改良Knop培養基配方為：KCl?76.04mg/l、MgSO₄·7H₂O?828.2mg/l、KH₂PO₄?250.4mg/l、Ca(NO₃)₂·4H₂O?1001.3mg/l、CuSO₄·5H₂O?0.027mg/l、KI0.014mg/l、ZnSO₄·7H₂O0.027mg/l、H₃BO₃?0.309mg/l、Na₂MoO₄·2H₂O?0.012mg/l、MnCl₂·4H₂O0.198mg/l、CoCl₂·6H₂O?0.027mg/l、FeSO₄·7H₂O?27.8mg/l、Na₂-EDTA?37.3mg/l、酒石酸氨0.1151mg/l；

3)將步驟2)擴繁得到的原絲體轉入誘導原絲體形成配子體的培養基上，進行培養40～60天，培養條件為：溫度25～30℃，光照強度3000～4000lx，光照時間12～14小時/天；所述誘導原絲體形成配子體的培養基配方為：改良White培養基+0～2.0mg/l?6-糠基氨基嘌呤+5～10g/l蔗糖，其中改良White培養基配方為：KNO₃?80mg/l、MgSO₄·7H₂O?720mg/l、NaH₂PO₄·H₂O?16.5mg/l、KCl?65mg/l、Na₂SO₄?200mg/l、Ca(NO₃)₂·4H₂O?300mg/l、CuSO₄·5H₂O?0.001mg/l、ZnSO₄·7H₂O?3.0mg/l、H₃BO₃?1.5mg/l、Na₂MoO₄·2H₂O?0.0001mg/l、MnSO₄·4H₂O7.0mg/l、FeNa-EDTA?4.588mg/l、肌醇100mg/l、煙酸0.3mg/l、鹽酸硫胺素0.1mg/l、鹽酸吡哆辛0.1mg/l、甘氨酸3mg/l。