[發(fā)明專利]核酸分子CRYL1SI32及其在制備抗癌藥物中的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810033582.8
• 申請(qǐng)日: 2008-02-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101503452A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 余龍;張琳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號(hào): C07H21/02
• 分類號(hào): C07H21/02;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 姚靜芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種核苷酸分子及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤疾病現(xiàn)已上升為世界第2號(hào)″殺手″，其死亡人數(shù)僅次于心血管病。幾年來(lái)，國(guó)外醫(yī)學(xué)界對(duì)于腫瘤疾病的發(fā)病機(jī)理在細(xì)胞基礎(chǔ)上又有了新的認(rèn)識(shí)。基于對(duì)腫瘤發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步理解，人們利用各種途徑來(lái)研制和開(kāi)發(fā)能夠特異，有效地殺傷腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性的藥物。目前，對(duì)于癌癥的治療仍以化療及放療為首選，兩者雖對(duì)腫瘤的治療取得了相當(dāng)?shù)寞熜В捎谌狈?duì)腫瘤細(xì)胞的特異性因而具有較大的毒副作用以及某些腫瘤細(xì)胞對(duì)化療和放療處理的不敏感，因此在很大程度上限制了它們?cè)谂R床中的應(yīng)用。近年來(lái)，為了開(kāi)發(fā)出能特異性地殺傷癌細(xì)胞而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒負(fù)作用的藥物，人們對(duì)癌癥的發(fā)病機(jī)制從細(xì)胞，分子水平上的研究予以高度重視和巨額投資。

藥物耐受(drug?resistance)是腫瘤治療過(guò)程中的一個(gè)難題。腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的耐受性不僅使得抗癌藥物達(dá)不到治療的目的，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生副作用，讓正常細(xì)胞更容易受到藥物的損傷，直接危害到病人的生命。因此，尋找能夠降低抗藥性的化合物一種是腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用于制備抗腫瘤藥物的核苷酸分子。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述核苷酸分子的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種用于制備抗腫瘤藥物的核苷酸分子，它具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性并且其序列包括5’-AUCUUCUGGAACACAUUCC-3’或者5’-ATCTTCTGGAACACATTCC-3’。在本發(fā)明中被稱為CRYL1SI32。

其中，A、T、U、G和C分別是腺嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥(niǎo)嘌呤核苷酸和胞嘧啶核苷酸。

在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“核苷酸分子CRYL1SI32”該術(shù)語(yǔ)還包括5’-AUCUUCUGGAACACAUUCC-3’或者5’-ATCTTCTGGAACACATTCC-3’的核苷酸序列變異形式。這些變異形式包括：若干個(gè)(通常為1-15個(gè)，較佳地1-10個(gè)，更佳地1-5個(gè))核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加數(shù)個(gè)(通常為10個(gè)以內(nèi)，較佳地為5個(gè)以內(nèi))核苷酸。例如，在5’-AUCUUCUGGAACACAUUCC-3’后(3‘端)加入若干dT(脫氧胸苷)后形成的序列。

本發(fā)明中，CRYL1SI32可以是具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性并且包括5’-AUCUUCUGGAACACAUUCC-3’dTdT的序列。

本發(fā)明中，CRYL1SI32可以是具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性并且是5’-AUCUUCUGGAACACAUUCC-3’dTdT的序列。

本發(fā)明中，CRYL1SI32可以是具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性并且是5’-ATCTTCTGGAACACATTCC-3’的序列。

在本發(fā)明中，可選用本領(lǐng)域已知的各種載體，如市售的載體，與CRYL1SI32連接成為重組載體。例如，可以采用慢病毒、腺病毒或者森林腦炎病毒表達(dá)系統(tǒng)(SemlikiForest?Virus)。慢病毒(Lentivirus)屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒亞屬，以人類免疫缺陷病毒(human?immunod?efficiency?virus，HIV)為代表.慢病毒不僅具有感染分裂靶細(xì)胞并整合其基因組中，尤其是具有感染包括神經(jīng)元細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞和干細(xì)胞等在內(nèi)的多種非分裂細(xì)胞能力，因而，慢病毒載體已作為基因轉(zhuǎn)移的有效工具，被廣泛應(yīng)用于基因功能尤其是基因治療的研究。

另一方面，本發(fā)明還提供了上述的核苷酸分子CRYL1SI32的制備方法，即按CRYL1SI32的序列，將各核糖核酸分子依次脫水縮合。

本發(fā)明的核苷酸分子CRYL1SI32可以采用各種常規(guī)的制備方法制備。本發(fā)明的核苷酸分子CRYL1SI32序列通常可以用酶解法或人工合成的方法獲得。

本發(fā)明還提供了上述的核苷酸分子CRYL1SI32在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

上述的核苷酸分子CRYL1SI32可以與柔紅霉素聯(lián)用，應(yīng)用于制備抗腫瘤藥物。

本發(fā)明的CRYL1SI32顯著促進(jìn)了Hep3B細(xì)胞在柔紅霉素作用條件下凋亡的發(fā)生，將CRYL1SI32與柔紅霉素聯(lián)用，可以大大降低腫瘤細(xì)胞對(duì)柔紅霉素的抗藥性。