[發(fā)明專利]核酸分子CXSI12及其在制備抗癌藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810033575.8
• 申請日: 2008-02-05
• 公開（公告）號: CN101503447A
• 公開（公告）日: 2009-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 余龍;王翔
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號: C07H21/02
• 分類號: C07H21/02;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 姚靜芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種核苷酸分子及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤疾病現(xiàn)已上升為世界第2號″殺手″，其死亡人數(shù)僅次于心血管病。幾年來，國外醫(yī)學(xué)界對于腫瘤疾病的發(fā)病機理在細(xì)胞基礎(chǔ)上又有了新的認(rèn)識。基于對腫瘤發(fā)病機制的進一步理解，人們利用各種途徑來研制和開發(fā)能夠特異，有效地殺傷腫瘤細(xì)胞而對正常細(xì)胞無毒性的藥物。目前，對于癌癥的治療仍以化療及放療為首選，兩者雖對腫瘤的治療取得了相當(dāng)?shù)寞熜В捎谌狈δ[瘤細(xì)胞的特異性因而具有較大的毒副作用以及某些腫瘤細(xì)胞對化療和放療處理的不敏感，因此在很大程度上限制了它們在臨床中的應(yīng)用。近年來，為了開發(fā)出能特異性地殺傷癌細(xì)胞而對正常細(xì)胞無毒負(fù)作用的藥物，人們對癌癥的發(fā)病機制從細(xì)胞，分子水平上的研究予以高度重視和巨額投資。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用于制備抗腫瘤藥物的核苷酸分子。

本發(fā)明的另一個目的是提供上述核苷酸分子的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種用于制備抗腫瘤藥物的核苷酸分子，它具有抑制腫瘤生長的活性并且其序列包括5’-AUUCAAGAAACUGUCGCUC-3’或者5’-ATTCAAGAAACTGTCGCTC-3’。在本發(fā)明中被稱為CXSI12。

其中，A、T、U、G和C分別是腺嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸和胞嘧啶核苷酸。

在本發(fā)明中，術(shù)語“核苷酸分子CXSI12”該術(shù)語還包括5’-AUUCAAGAAACUGUCGCUC-3’或者5’-ATTCAAGAAACTGTCGCTC-3’的核苷酸序列變異形式。這些變異形式包括：若干個(通常為1-15個，較佳地1-10個，更佳地1-5個)核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加數(shù)個(通常為10個以內(nèi)，較佳地為5個以內(nèi))核苷酸。例如，在5’-AUUCAAGAAACUGUCGCUC-3’后(3‘端)加入若干dT(脫氧胸苷)后形成的序列。

本發(fā)明中，CXSI12可以是具有抑制腫瘤生長的活性并且包括5’-AUUCAAGAAACUGUCGCUC-3’dTdT的序列。

本發(fā)明中，CXSI12可以是具有抑制腫瘤生長的活性并且是5’-AUUCAAGAAACUGUCGCUC-3’dTdT的序列。

本發(fā)明中，CXSI12可以是具有抑制腫瘤生長的活性并且是5’-ATTCAAGAAACTGTCGCTC-3’的序列。

在本發(fā)明中，可選用本領(lǐng)域已知的各種載體，如市售的載體，與CXSI12連接成為重組載體。例如，可以采用慢病毒、腺病毒或者森林腦炎病毒表達系統(tǒng)(SemlikiForest?Virus)。慢病毒(Lentivirus)屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒亞屬，以人類免疫缺陷病毒(human?immunod?efficiency?virus，HIV)為代表.慢病毒不僅具有感染分裂靶細(xì)胞并整合其基因組中，尤其是具有感染包括神經(jīng)元細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞和干細(xì)胞等在內(nèi)的多種非分裂細(xì)胞能力，因而，慢病毒載體已作為基因轉(zhuǎn)移的有效工具，被廣泛應(yīng)用于基因功能尤其是基因治療的研究。

另一方面，本發(fā)明還提供了上述的核苷酸分子CXSI12的制備方法，即按CXSI12的序列，將各核糖核酸分子依次脫水縮合。

本發(fā)明的核苷酸分子CXSI12可以采用各種常規(guī)的制備方法制備。本發(fā)明的核苷酸分子CXSI12序列通常可以用酶解法或人工合成的方法獲得。

本發(fā)明還提供了上述的核苷酸分子CXSI12在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

實驗表明，將本發(fā)明的CXSI12轉(zhuǎn)入H1299細(xì)胞，結(jié)果表明，H1299細(xì)胞呈現(xiàn)出明顯的G1期阻滯。

本發(fā)明的CXSI12還可抑制腫瘤細(xì)胞增殖。將CXSI12或者含有CXSI12的細(xì)胞施用于裸鼠，與相同培養(yǎng)條件下未施用CXSI12的裸鼠相比，前者瘤體的增長明顯受到抑制，而且這種現(xiàn)象隨著時間的推移日益明顯。

本發(fā)明的核苷酸分子CXSI12及其類似物，當(dāng)在治療上進行施用(給藥)時，可提供不同的效果。通常，可將這些物質(zhì)配制于無毒的、惰性的和藥學(xué)上可接受的水性載體介質(zhì)中，其中pH通常約為5-8，較佳地pH約為6-8，盡管pH值可隨被配制物質(zhì)的性質(zhì)以及待治療的病癥而有所變化。配制好的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑進行給藥，其中包括(但并不限于)：肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、或局部給藥。