[發明專利]一種海洋真菌培養物的提取物及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200810029826.5
• 申請日: 2008-07-29
• 公開（公告）號: CN101386818A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: 蔡小玲;佘志剛;林永成;李慶;高俊平
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;A61K36/06;A61P31/00;A61P25/28;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 陳 衛

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種海洋真菌培養物的提取物及其制備方法和應用。?

背景技術

尋找生理活性強的物質發展成為抗癌、抗菌、治療老年癡呆癥等藥物是人類攻克疾病的主要工作之一。海洋微生物代謝產物研究是近年來國際上新興的研究課題。紅樹林作為生長在熱帶和亞熱帶海灣河口潮間帶的生態系統，一直處于高鹽、頻繁的潮汐、強風、高溫、強紫外輻射和缺氧污泥的海陸潮間帶環境，其生境非常特殊，這也造就了紅樹林內生真菌具有獨特的代謝途徑和遺傳背景，研究發現它們許多成分也具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤等藥用價值。?

細胞培養法是篩選抗腫瘤藥物比較常用的一種篩選方法，常用的有MTT法等。而真核生物DNA拓樸異構酶I和II已被確定是多種抗腫瘤藥物的有效靶位。例如，抗癌藥物喜樹堿(camptothecin)及其衍生物拓撲特肯(topotecan)、依林諾特肯(irinotecan)的作用靶位是真核生物DNA拓撲異構酶I，吖啶類化合物(m-AMSA)、鬼臼毒素類化合物(VP-16、VM-26)、阿霉素(adriamycin)等則作用于真核生物DNA拓撲異構酶IIα。但同其它藥物一樣，長期使用后腫瘤細胞會出現對它們的耐藥性。?

因此開發新的，特別是結構新穎的，以真核生物DNA拓撲異構酶為靶位的抗腫瘤藥物具有重要的意義。我們課題組使用在畢赤酵母中表達的hTopo?I，建立了以該酶為靶位的抗腫瘤化合物的體外快速篩選模型，已經對一些天然產?物進行了篩選，取得了較好的結果。?

二十世紀初抗生素的發現堪稱為醫藥技術發展史上重大里程碑之一。其意義遠遠超過其它藥物(如阿司匹林等)的發明。1929年，英國細菌學家弗萊明在其實驗室中發現：點青霉(一種霉菌)分泌的一種未知物質(即“青霉素”)具有強力抑菌作用。至四十年代末，美國科學家攻克了青霉素大規模生產的技術難題(發酵罐深層通氣培養法)從而奠定了抗生素工業的基礎。在此后幾十年里，抗生素已發展成為幾大系列上百個品種的重要臨床藥物。近幾年來細菌耐藥現象已成為各國醫療界所面臨的一嚴重問題，現在發病者眾多的流感桿菌引發的肺炎與支氣管炎等常見病已無良藥可治。如何對付越來越普遍的耐藥細菌已成為國際醫學界所面臨的一棘手難題。?

阿爾茨海默病(Alzheimer’s?disease，AD，又稱早老性癡呆，主要病理特征是大腦萎縮，腦組織內產生αβ蛋白沉淀物和神經原纖維纏結，導致乙酰膽堿分泌不足)。而乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，AChE，EC3.1.1.7.)主要的生物學功能是在膽堿能神經突觸處通過快速水解神經遞質乙酰膽堿(ACh)，從而中止神經沖動的傳遞。至今，治療AD最有效的方法仍然是應用AChE抑制劑。在大規模、多中心、雙盲和安慰劑對照試驗中，這類化合物對AD病人認知能力的心理測驗及生活質量均有統計學上的顯著改善。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種海洋真菌培養物的提取物，該提取物同時具有抑菌、酶抑制、抗腫瘤活性等。?

本發明的另一個目的在于提供上述海洋真菌培養物的提取物的制備方法。?

本發明的另一個目的在于提供上述海洋真菌培養物的提取物在制備抗菌、治療老年癡呆、抗腫瘤藥物中的應用。?

本發明的上述目的是通過如下技術方案予以實現的：?

本發明所用的海洋真菌是南海紅樹林內生真菌Fusarium?sp.ZH116，該真菌已保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC，中國，武漢大學)，保藏編號為CCTCC?M?208095，保藏日為2008年6月20日。該真菌以下簡稱海洋真菌CCTCC?M?208095。?

本發明的海洋真菌培養物的提取物，是海洋真菌CCTCC?M208095培養物的乙酸乙酯提取物中的油狀物。?

本發明的海洋真菌培養物的提取物是從海洋真菌CCTCC?M20809的培養物(發酵液)的乙酸乙酯萃取液中濃縮得到，其具體的制備方法包括以下步驟：?

a.海洋真菌CCTCC?M?208095的種子培養：?

挑取海洋真菌CCTCC?M?208095菌株接入斜面培養基，30～35℃培養5～7天；?

b.海洋真菌CCTCC?M?208095的發酵培養：?

挑取上述斜面中培養好的菌株接入發酵培養基，于25～35℃靜置培養1～2月；?

c.將上述培養好的發酵液過濾除去菌體；?