[發(fā)明專利]1,3,7,9－四甲基尿酸的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810028876.1
• 申請日: 2008-06-18
• 公開（公告）號: CN101289448A
• 公開（公告）日: 2008-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王冬梅;盧嘉麗;葉創(chuàng)興;杜麗麗;石祥剛;鄭新強
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學
• 主分類號: C07D473/14
• 分類號: C07D473/14;A61P25/20;A61K36/185
• 代理公司: 廣州創(chuàng)穎專利事務(wù)所
• 代理人: 曹可芬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學領(lǐng)域嘌呤生物堿類化合物的制備方法，具體涉及一種從天然植物制備1，3，7，9-四甲基尿酸的方法。

背景技術(shù)

1，3，7，9-四甲基尿酸(1，3，7，9-tetramethyluric?acid，theacrine)屬于嘌呤生物堿類物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)式為：

植物中的嘌呤類生物堿最為人熟知的是黃嘌呤的三種甲基衍生物，即咖啡堿(1，3，7-三甲基黃嘌呤)、可可堿(3，7-二甲基黃嘌呤)和茶堿(1，3-二甲基黃嘌呤)。該類物質(zhì)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等方面都具有廣泛的生理活性。

關(guān)于1，3，7，9-四甲基尿酸的活性，據(jù)文獻(Lyles?MB，Cameron?IL.Caffeineand?other?xanthines?as?cytochemical?blockers?and?removers?of?heterocyclic?DNAintercalators?from?chromatin.Cell?Biol?Int，2002，26：145-154)報道：1，3，7，9-四甲基尿酸能與雜環(huán)類誘變劑和致癌物結(jié)合起抗誘變作用；另有文獻(Xu，et?al.Theacrine，a?special?purine?alkaloid?with?sedative?and?hypnotic?properties?fromCammelia?assamica?var.kucha?in?mice.J?Asian?Nat?Prod?Res，2007，7：665-672)報道：1，3，7，9-四甲基尿酸也具有中樞神經(jīng)藥理方面的活性，但與咖啡堿興奮神經(jīng)的作用相反，1，3，7，9-四甲基尿酸在動物實驗中表現(xiàn)出顯著的鎮(zhèn)靜催眠作用。

1，3，7，9-四甲基尿酸的化學合成方法存在反應底物昂貴、收率低、反應過程中易爆炸等缺點，而植物苦茶中含較高量的1，3，7，9-四甲基尿酸，是制備1，3，7，9-四甲基尿酸的一個理想的低成本天然植物資源。

在文獻(葉創(chuàng)興，等.苦茶C.assamica?var.kucha?Chang?et?Wang的嘌呤生物堿.中山大學學報，1999，38(5)：82-86)中公開了一種從苦茶中分離得到1，3，7，9-四甲基尿酸的方法。其公開的方法是將苦茶芽葉隔水蒸青烘干后先用熱水浸提，再用氯仿萃取，最后進行硅膠柱層析，用乙酸乙酯洗脫得到1，3，7，9-四甲基尿酸。其方法存在收率較低，成本較高的問題。中國發(fā)明專利ZL200410077237.6公開了一種用苦茶芽葉為原料，經(jīng)過溶劑提取、氯仿萃取或聚酰胺柱層析、反相色譜分離制備1，3，7，9-四甲基尿酸的方法。該方法仍是用苦茶芽葉為原料，其原料中1，3，7，9-四甲基尿酸的含量為1.58％，咖啡堿含量為0.94％，可可堿含量為0.22％，1，3，7，9-四甲基尿酸與咖啡堿均易溶于氯仿，因此萃取后必需采用有效的分離手段才能得到高純度的1，3，7，9-四甲基尿酸。該發(fā)明雖然產(chǎn)物純度高，但苦茶芽葉原料在實驗前需要蒸青處理，最后采用ODS柱層析分離，工藝成本高，步驟繁瑣，溶劑耗量大而且費時，同樣難以實施工業(yè)化生產(chǎn)。

為此，有必要尋找更好的植物資源和適用于工業(yè)化生產(chǎn)的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用植物原料制備1，3，7，9-四甲基尿酸的方法。本發(fā)明所述制備1，3，7，9-四甲基尿酸的方法，是用苦茶(Camellia?assamica?var.kucha)的果實為原料，用水提取，提取液用氯仿或二氯甲烷萃取，回收氯仿或二氯甲烷后用甲醇或體積百分濃度為50～100％的乙醇溶液作溶劑重結(jié)晶，即可得到純度達99％以上的1，3，7，9-四甲基尿酸，具體步驟如下：步驟一、苦茶果實提取液的制備

苦茶果實干燥后粉碎，稱取苦茶果實的粗粉，每次加入6～15倍量的水煎煮1～2小時，過濾，共提取1～3次，合并提取液；或在加入6～15倍量的水后先于頻率為20～80kHz超聲波下提取10～30分鐘后再煎煮1～2小時，過濾，再加入6～15倍量的水，煎煮提取1～2次，合并提取液；或在超聲頻率20～80kHz，溫度50～85℃下超聲提取30～60分鐘，過濾，共重復提取1～3次，合并提取液，提取液濃縮至相當于苦茶果實粗粉重量的3～5倍量體積，得苦茶果實提取液；

步驟二、1，3，7，9-四甲基尿酸粗品的制備

將苦茶果實提取液每次以等體積的氯仿或二氯甲烷萃取2～3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得淺黃色粉末狀固體，為1，3，7，9-四甲基尿酸粗品，純度大于90％；