[發(fā)明專利]醌類化合物Bostrycin及其制備方法與抗腫瘤應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810028618.3
• 申請日: 2008-06-06
• 公開（公告）號: CN101544556A
• 公開（公告）日: 2009-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 佘志剛;陳省平;林永成;袁潔;龐冀燕;黎孟楓;劉嵐;吳玉珩;蔡小玲;鄭明英;瞿東方;魯立;顧振東
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué);廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07C50/18
• 分類號: C07C50/18;C12P15/00;A61K31/122;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 陳 衛(wèi)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物化合物領(lǐng)域，具體涉及一類源于真菌的具有抗腫 瘤活性的醌類化合物及其制備方法，以及它們在制備抗腫瘤藥物中的 應(yīng)用。

背景技術(shù)

海洋占地球表面積70％，海洋微生物無論從數(shù)量上或是多樣性方 面都相當(dāng)豐富，美國“國際海洋微生物普查”項(xiàng)目首席科學(xué)家米切爾· 索金最近公布，海洋微生物的總量應(yīng)在500～1000萬種，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出原 來20萬種的估計(jì)，也遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出全球動(dòng)植物種類的總和。

海洋微生物生活在特殊環(huán)境之中，例如高鹽度、高壓、低營養(yǎng)、 低溫(特別是深海)或局部高溫和無光照以及不同的生物之間的關(guān)系 等等。在這些所謂生命的極限環(huán)境中，海洋微生物已發(fā)展出獨(dú)特的代 謝方式，這不僅確保其在極端環(huán)境中生存，也提供了在陸地微生物中 未遇到過的代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)潛力，因而是多種多樣新穎化合物的極好 資源。科技界相信，海洋微生物將成為21世紀(jì)開發(fā)新型醫(yī)藥品的資源。

自從1929年從真菌中發(fā)現(xiàn)青霉素以來，真菌的代謝產(chǎn)物成為了 藥物的豐富來源，它們在抗菌，抗腫瘤，治療心血管疾病，免疫調(diào)節(jié) 劑等有重要應(yīng)用。海洋微生物種類繁多，來源廣泛，篩選獲得率高，根 據(jù)John教授在2008年《Natural?Product?Reports》的報(bào)道，2006年 發(fā)現(xiàn)海洋天然產(chǎn)物新化合物中，海洋微生物是主要來源之一，成為當(dāng) 今國際上研究的熱點(diǎn)。

紅樹林生態(tài)系是世界上最富多樣性、生產(chǎn)力最高的海洋生態(tài)系之 一。紅樹林沼澤區(qū)有充足的植物材料，有豐富的浮游藻類和浮游生物， 這些條件正適合于為微生物的繁殖。在過去的十幾年里，紅樹林棲息 地被證明是真菌新種屬的豐富來源，這形成了海洋真菌第二大的生態(tài) 學(xué)亞類。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一類來源于海洋紅樹林內(nèi)生真菌的醌類 化合物Bostrycin。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述醌類化合物Bostrycin的制備方 法。

本發(fā)明的進(jìn)一步目的是提供上述醌類化合物Bostrycin在制備抗 腫瘤藥物中的應(yīng)用。

發(fā)明人由南海海洋真菌Halorosellinia?sp.1403(簡稱真菌1403) 的發(fā)酵培養(yǎng)物中提取分離得到化合物Bostrycin，結(jié)構(gòu)分別如下列式所 示。

本發(fā)明所用的真菌1403已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心 (CCTCC，中國武漢大學(xué)校內(nèi))，保藏號為CCTCC?NO：M201018， 保藏日為2001年4月23日。

本發(fā)明醌類化合物Bostrycin可從真菌1403的發(fā)酵培養(yǎng)液中提取 分離得到，制備方法的具體步驟如下：

(1)真菌Halorosellinia?sp.1403?CCTCC?NO：M?201018的種子培 養(yǎng)：

培養(yǎng)基組成按重量比為：葡萄糖0.5～1.5，酵母提取物0.05～ 0.15，蛋白胨0.1～0.3，瓊脂1～1.5，氯化鈉3～5，水100；

制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30～35℃培養(yǎng)5～7天；

(2)真菌Halorosellinia?sp.1403?CCTCC?NO：M?201018的發(fā)酵培 養(yǎng)：

發(fā)酵培養(yǎng)基組成按重量比為：葡萄糖5～15，酵母提取物1～4， 蛋白胨0.5～4，氯化鈉3～5，水100；

將斜面中培養(yǎng)好的菌株挑入發(fā)酵培養(yǎng)基，于室溫25～35℃靜置 1～2個(gè)月；

(3)將上述培養(yǎng)好的發(fā)酵液過濾除去菌體；

(4)將發(fā)酵液加熱濃縮至原液體積的1/10～1/5，用乙酸乙酯萃取 多次，濃縮乙酸乙酯萃取液，在硅膠柱中進(jìn)行色譜分離，以石油醚- 乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑梯度洗脫；

(5)發(fā)酵液浸膏經(jīng)過柱層析后，收集60％-90％乙酸乙酯/石油 醚洗脫液，70％的乙酸乙酯/石油醚為洗脫液，再以聚酰胺柱層析分 離，重結(jié)晶純化，即得到紅色顆粒狀晶體醌類化合物Bostrycin。

本發(fā)明經(jīng)試驗(yàn)證明，醌類化合物Bostrycin能有效抑制多種腫瘤細(xì) 胞株的生長，可用于制備抗腫瘤藥物，可以是藥物上可接受的任意一 種劑型。