[發(fā)明專利]南海真菌中新鹿角縮酮類化合物及其在制備抗高血壓藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810028126.4
• 申請日: 2008-05-15
• 公開（公告）號: CN101580512A
• 公開（公告）日: 2009-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王冠蕾;龐冀燕;林永成;陳建文;劉捷;孟偉峰
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22;C07D493/04;C12P17/18;A61P9/12;C12R1/645
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司
• 代理人: 劉孟斌

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及南海內(nèi)生真菌鹿角菌Xyloraria?sp.2508中已分離鑒定并篩選到一系列鹿角縮酮(xyloketals)類化合物及其在制備抗高血壓藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

自從1929年從真菌中發(fā)現(xiàn)青霉素以來，真菌的代謝產(chǎn)物成為了藥物的豐富來源，絕大多數(shù)臨床應(yīng)用的抗生素都來源于真菌和細菌，真菌的代謝產(chǎn)物還有其他的藥用價值，如抗腫瘤，治療心血管疾病，免疫調(diào)節(jié)劑等。由于海洋環(huán)境的特殊性，海洋微生物種類繁多，來源廣泛，篩選獲得率高，根據(jù)John教授在2005年《Natural?Product?Reports》的報道，2003年發(fā)現(xiàn)海洋天然產(chǎn)物新化合物中，海洋微生物是主要來源之一(另外包括海綿和腔腸動物)。海洋真菌能提供陸生真菌無法提供的代謝產(chǎn)物。

植物內(nèi)生真菌(Endophytic?fungi)生活在高等植物的組織中，是植物微生態(tài)系統(tǒng)中的天然組成成分，在進化過程中與宿主建立了和諧的共生關(guān)系，據(jù)保守的估計內(nèi)生真菌的種類繁多，大約有1.5×10⁶種，由于數(shù)量龐大，而且與其他生物之間緊密的生態(tài)關(guān)系，使這類真菌成為潛在的具有產(chǎn)生豐富的次級代謝產(chǎn)物的來源。國際上這方面的研究從八十年代以來呈加速發(fā)展的趨勢，國內(nèi)從海洋微生物也發(fā)現(xiàn)一批新的活性物質(zhì)(Lin?YC?et?al，J.Org.Chem.；Lin?YC?etal.Tetrahedron?2000)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一類新的來源于海洋真菌的具有潛在藥用價值的化合物在高血壓預(yù)防治療方面的應(yīng)用價值。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

從南海內(nèi)生真菌鹿角菌Xyloraria?sp.2508中已分離鑒定并篩選到一系列鹿角縮酮(xyloketal?A-F)類化合物中，結(jié)構(gòu)分別如下：

本發(fā)明的化合物可以從真菌2508的發(fā)酵液中提取分離得到，所用的真菌2508已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，中國武漢大學(xué)校內(nèi))，保藏號為CCTCC?NO：M202029，保藏日為2002年08月03日。

本發(fā)明化合物鹿角縮酮化合物A-F(xyloketal?A-F)可從真菌2508的發(fā)酵培養(yǎng)液中提取分離得到，制備方法的具體步驟如下：

a.真菌2508的種子培養(yǎng)：

培養(yǎng)基按重量比為：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，瓊脂1-1.5，氯化鈉3-5，水100，制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培養(yǎng)5-7天；

b.真菌2508的發(fā)酵培養(yǎng)：

發(fā)酵培養(yǎng)基按重量比為：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，瓊脂1-1.5，氯化鈉3-5，水100，將斜面中培養(yǎng)好的菌株挑入發(fā)酵培養(yǎng)基，于室溫25-35℃靜置1-2個月，或者于200L全自動發(fā)酵罐培養(yǎng)90小時；

c.將上述培養(yǎng)好的發(fā)酵液過濾除去菌體；

d.將發(fā)酵液加熱濃縮至原液體積的1/3-1/5，用乙酸乙酯萃取多次，濃縮乙酸乙酯萃取液，在硅膠柱中進行色譜分離，以1％-100％乙酸乙酯/石油醚為洗脫劑梯度洗脫。

e.收集8％-30％的乙酸乙酯/石油醚洗脫，純化得到Xyloketal?A-F化合物.

本發(fā)明的化合物對KCl和苯腎上腺素(Phenylephrine，Phe)引起血管環(huán)收縮實驗中發(fā)現(xiàn)具有明顯的抑制作用，同時對高血壓大鼠模型如預(yù)期觀察到體內(nèi)應(yīng)用xyloketals系列化合物可產(chǎn)生降壓效應(yīng)。

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。

附圖說明

圖1為預(yù)孵不同濃度Xyloketal?B對KCl引起大鼠胸主動脈環(huán)收縮反應(yīng)的影響；

圖2為預(yù)孵Xyloketal?B(20μM)和L-NAME(100μM)對Phe誘發(fā)的去內(nèi)皮血管環(huán)收縮反應(yīng)的影響。

具體實施方式

實施例1

化合物可以通過以下步驟制備得到：

aa.真菌2508的種子培養(yǎng)：

培養(yǎng)基按重量比為：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，瓊脂1-1.5，氯化鈉3-5，水100，制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培養(yǎng)5-7天；

d.真菌2508的發(fā)酵培養(yǎng)：