[發明專利]一種氯霉素全抗原的制備方法無效
| 申請號： | 200810027291.8 | 申請日： | 2008-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN101250225A | 公開（公告）日： | 2008-08-27 |
| 發明（設計）人： | 田素娟;董斌;袁茵;林月霞;孟民杰;羅利瓊;段濤;黃樹林 | 申請（專利權）人： | 廣東藥學院 |
| 主分類號： | C07K14/765 | 分類號： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/10;C07K1/14 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利代理有限公司 | 代理人： | 陳衛;任重 |
| 地址： | 510006廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 氯霉素 抗原 制備 方法 | ||
1、一種氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)將琥珀酰氯霉素溶于DMF中，加入不含氨基的緩沖溶液；
(2)往(1)中加入EDC和Sulfo-NHS，反應得到甲液；
(3)稱取載體蛋白質，溶于PBS溶液，配制乙液；
(4)將甲液逐滴加入到乙液中，偶聯反應后純化得到氯霉素全抗原。
2、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(1)所述緩沖溶液的pH值為4.7～6.0。
3、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(1)所述琥珀酰氯霉素與DMF的比例為23mg琥珀酰氯霉素：0.4～0.6mLDMF；所述緩沖溶液加入量為每23mg琥珀酰氯霉素加入0.5mL緩沖溶液。
4、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(2)所述EDC和Sulfo-NHS的加入量為琥珀酰氯霉素∶EDC∶sulfo-NHS摩爾比為1∶0.8～2∶0.8～2，摩爾比優選為1∶1.2∶1.2；所述反應為室溫反應2小時。
5、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(3)所述載體蛋白質為牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清白蛋白或血蘭蛋白。
6、根據權利要求1或5所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于所述載體蛋白質為牛血清白蛋白；所述牛血清白蛋白與琥珀酰氯霉素的摩爾比為1∶35～175。
7、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(3)所述PBS溶液含有0.15M?NaCl、濃度為0.05～0.1M、pH值為7.0～7.6。
8、根據權利要求1或7所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于所述PBS溶液pH值為7.4。
9、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(4)所述偶聯反應為滴加完甲液后反應4小時。
10、根據權利要求1所述氯霉素全抗原的制備方法，其特征在于步驟(4)所述純化是將偶聯反應產物過Sephadex?G-25層析柱脫鹽，收集第一峰。
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