[發(fā)明專利]一種連續(xù)逆流萃取純化甘草酸生物轉(zhuǎn)化溶液中甘草次苷的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810022180.8
• 申請日: 2008-07-22
• 公開（公告）號: CN101318984A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 盧定強;張淑敏;王俊;凌岫泉;洪聲;梁銘鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所
• 代理人: 汪旭東

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的提取純化工藝，具體涉及一種連續(xù)逆流萃取純化甘草酸生物轉(zhuǎn)化溶液中甘草次苷的方法。

背景技術(shù)

甘草次苷即18β-單葡萄糖醛酸基甘草次酸(3-Monoglucuronyl-GlycyrrhetinicAcid，3β-D-(monogluronyl)18β-glycyrrhetic?acid，簡稱GAMG)，為甘草酸的衍生物，由一分子的甘草次酸(glycyrrhetic?acid，18β-GA)和一分子的β-D-葡萄糖醛酸(β-D-glucuronic?acid，β-D-GluA)構(gòu)成。在酶或者酸催化下，甘草酸可以水解失去一個葡萄糖醛酸基形成甘草次苷，甘草酸水解示意如附圖1所示。

甘草次苷對透明質(zhì)酸酶活性有抑制作用，對氯化間三硝基苯誘導(dǎo)的接觸性皮炎也有抑制作用，還能抑制血小板凝集及對角叉菜膠誘導(dǎo)的爪水腫，抗腫瘤增殖，抑制實驗誘導(dǎo)的致癌作用等，而且，甘草次苷的急性中毒量超過5000mg/kg(p.o.in?mice)，并且無致畸變作用；甘草次苷最重要的用途是作為新型甜味劑，其甜度約為蔗糖甜度的941倍，而甘草酸的甜度約為蔗糖甜度的170倍，即甘草次苷是甘草酸甜度的5倍多，同時甘草次苷具有低熱量的特點。

目前，甘草酸及其衍生物甘草次苷的分離純化方法主要有雙水相提取法、大孔樹脂吸附法和溶劑萃取法。雙水相提取技術(shù)是瑞典Per?Albersson首先發(fā)現(xiàn)并研究的一種分離技術(shù)，雖然此技術(shù)具有對生物產(chǎn)品穩(wěn)定性好、易放大等優(yōu)點，但是由于目前對此法的研究較少，對中草藥提取研究尚處于起步階段，此技術(shù)的應(yīng)用還不是很廣泛，還未實現(xiàn)工業(yè)化；從20世紀(jì)80年代開始，日本開始使用大孔樹脂分離純化甘草酸，國內(nèi)也對大孔樹脂吸附甘草酸進(jìn)行了大量研究，表明其吸附量大，分離效果好，提取效率較高，且樹脂的再生容易，但是在進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)時存在生產(chǎn)周期長的缺點；溶劑萃取技術(shù)作為一種高效和高容量的分離工藝不斷應(yīng)用于分離純化甘草酸及其衍生物等制藥工業(yè)中，相對來說不僅工藝簡單，而且投資少，周期短，速度快，易于實現(xiàn)工業(yè)化，這樣就體現(xiàn)了其相對于前兩種分離方法的顯著優(yōu)勢。

甘草酸是由一分子甘草次酸和兩分子葡萄糖醛酸構(gòu)成的弱酸，具有三個羧基和五個羥基。由于甘草酸分子中的極性官能團和萃取劑中的極性官能團通過氫鍵能夠互相結(jié)?合，因此甘草酸分子可以從水相萃取到有機相。牛國廣曾報道了利用溶劑萃取法分離純化甘草酸的方法(Separation?and?Purification?Technology，2005(44)，189～196)。然而，甘草次苷在分子結(jié)構(gòu)上比甘草酸少一分子葡萄糖醛酸，與甘草酸具有非常相似的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，因此，與甘草酸的分離純化體系不同點在于，在甘草酸生物轉(zhuǎn)化體系中同時含有未轉(zhuǎn)化的甘草酸和新生成的甘草次苷兩種物質(zhì)，且兩種物質(zhì)極其相似，導(dǎo)致了該體系的復(fù)雜性，增加了利用單純的液液萃取技術(shù)實現(xiàn)甘草次苷分離純化的難度。

轉(zhuǎn)盤塔RDC(rotary?disc?contactors)是一種常用的微分接觸式逆流萃取塔，自從Reman?G.H.1951年開發(fā)以來，因其具有處理能力大、分離效率較高、結(jié)構(gòu)簡單及操作性能穩(wěn)定易于放大以及適合處理含固量較高的懸浮物系而不易堵塞等突出優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于石油化工、濕法冶金、制藥、食品等各個領(lǐng)域。中國專利CN?1560043A和CN1986537A分別公開了水溶液中糠醛的逆流萃取分離方法和共沸蒸餾和多級逆流萃取濃縮糠醛的方法。前者是以鹵代烴為萃取劑，利用萃取塔對糠醛水溶液進(jìn)行液液萃取，分層分離后精餾處理得到糠醛；后者是對經(jīng)共沸蒸餾提純后的糠醛溶液進(jìn)行萃取塔液液萃取，得到濃度較高的糠醛產(chǎn)品；中國專利CN?1807424A公開了連續(xù)逆流液液萃取分離二硫辛酸與乙醇及堿水溶液的方法，它主要提出了以芳香烴為萃取劑，對二硫辛酸、乙醇及堿水溶液進(jìn)行萃取塔逆流萃取，分離后，萃取相經(jīng)精餾處理，塔底二硫辛酸純度達(dá)到93.1％，收率達(dá)到97.2％以上。同年，中國專利CN?1807374公開了利用減壓蒸餾與液液萃取及結(jié)晶相結(jié)合提取茄尼醇的方法，減壓蒸餾提純后的茄尼醇經(jīng)萃取塔液液萃取，得到茄尼醇的純度為82～84％，萃取劑的混合液經(jīng)回收塔處理循環(huán)使用。