[發明專利]一種雙酚A類藥物通用人工抗原的合成方法無效
| 申請號: | 200810021104.5 | 申請日: | 2008-07-24 |
| 公開(公告)號: | CN101328215A | 公開(公告)日: | 2008-12-24 |
| 發明(設計)人: | 胥傳來;李灼坤;彭池方;馬偉;徐麗廣;袁媛;謝會玲 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C07K14/765 | 分類號: | C07K14/765;C07K1/14;C07K1/10 |
| 代理公司: | 無錫市大為專利商標事務所 | 代理人: | 時旭丹;劉品超 |
| 地址: | 214122江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 類藥物 通用 人工 抗原 合成 方法 | ||
1.一種雙酚A類藥物通用人工抗原的合成方法,其特征是以雙酚酸BHPVA為半抗原,用活性酯法將其與載體蛋白牛血清蛋白BSA偶聯,用紫外掃描儀測定偶聯物的偶聯比;
(1)人工抗原的合成:雙酚酸、碳二亞胺、牛血清蛋白以摩爾比為36∶43∶1的比例反應;首先將雙酚酸溶于二甲基亞砜溶液中,充分溶解后先后加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺室溫攪拌反應3h,為A液;牛血清蛋白溶于NaHCO3溶液中后逐滴加入上述A液中,室溫下攪拌反應3h,即得人工抗原混合液;
透析袋前處理:取10cm的透析袋,于沸水中煮沸5min,再用60℃的去離子水沖洗3min,保存在4℃去離子水中備用;
將人工抗原混合液移入透析袋中,用2×2L的0.01M的pH?7.4的磷酸鹽緩沖溶液和2×2L的去離子水透析3天;最后使用凍干法將透析袋中的液體制成粉末,即得到人工抗原:雙酚酸-牛血清蛋白;
(2)人工抗原的鑒定:雙酚酸-牛血清蛋白采用紫外掃描測定其偶聯比,將偶聯產物雙酚酸-牛血清蛋白用超純水稀釋到150μg·mL-1,測231nm、278nm波長處的吸光值,測出的吸光值為A1,A2,計算偶聯比。
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