[發明專利]雞腿菇液體轉化桑葉的發酵液制備方法及其用途

有效

• 申請號: 200810020889.4
• 申請日: 2008-07-30
• 公開（公告）號: CN101328487A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發明（設計）人: 張志才;陳惠;鄭惠華;黃達明;崔鳳杰
• 申請（專利權）人: 江蘇大學;江蘇安惠生物科技有限公司
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A61K36/07;A61K9/20;A61K9/48;A23L1/29;A61P3/10;C12R1/645
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 汪旭東

技術領域

本發明涉及生物發酵及醫藥領域，具體的說本發明涉及雞腿菇液體轉化桑葉的發酵液制備方法，以及由該方法獲得的含有該發酵液的藥物或保健品。所述的發酵液具有多種藥物功能，可用于制備預防和治療糖尿病及糖尿病并發癥的藥物或保健飲品。

背景技術

糖尿病是目前中老年人的常見病和多發病，由糖尿病引起的并發癥嚴重危及人們的生命健康。現有西藥類降糖藥物雖作用效果好，靶點清楚，長期服用易引起副作用。而中藥毒副作用小，且來源廣泛，成本較低，是用于治療糖尿病的一個主要藥物來源。

桑葉是桑科植物桑Morus?alba?L的干燥葉。桑葉作為中藥，旱已在民間廣泛應用。自古以來中醫就用桑葉來治療消渴證(相當于現代醫學的糖尿病)。《木草綱日》記載：桑葉“汁煎代茗，能止消渴”、“灸熱煎飲，代茶止渴”。近代醫家也常將桑葉配伍于中藥復方中應用于臨床，收效甚好。現代藥理研究證明桑葉具有抑制血糖上升之功效，可預防和治療糖尿病。近年來，各國研究人員對桑葉的組成、功能和作用機理進行了系統地研究，結果發現桑葉中含有豐富的氨基酸、纖維素、維生素、礦物質以及多種生理活性物質，具有降血糖、降血壓、降血脂、延緩哀老等多種保健功效。1996年，陳福君等用桑葉總多糖(TPM)對四氧嘧啶糖尿病小鼠進行腹腔汁射給藥，結果表明TPM有顯著的降血糖作用。但TPM的結構尚不清楚，有待進一步研究。2002年，陳金顯等曾經對一種以桑葉為主要原料的保健品功效成分進行研究，結果表明桑葉多糖和生物堿均能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖，并有明顯預防小鼠血糖升高的作用。2005年，吳志平等對桑樹不同藥用部位的降血糖效果進行了比較，發現桑葉、桑白皮、桑枝、桑皮這四中中藥材都有明顯的降血糖作用。盡管桑葉具有這些功效，但是桑葉仍具有中藥的共性：見效慢，質量不穩定有時還具有副作用。如何克服桑葉缺點提高桑葉療效呢？無疑生物轉化是一個有效的手段。用于生物轉化的菌種有多種，但藥食用真菌轉化桑葉具有安全無毒等特點，更受到科研工作者的青睞。

雞腿菇，(Coprinus?comatus)是藥用真菌的一種，學名毛頭鬼傘，隸屬于真菌門(Eumycota)，擔子菌亞門(Basidiomycotina)，層菌綱(Hymenomycetes)，傘菌目(Agaricales)，鬼傘科(Coprinaceae)，鬼傘屬(Coprinus)。雞腿菇肉質細嫩、鮮美可口、營養豐富。目前，該品種已被定為符合聯合國糧農組織(FAO)和世界衛生組織(WHO)要求的集“天然、營養、保健”三種功能為一體的16種珍稀食用菌之一。近年來國內外對雞腿菇的研究主要集中于它的馴化栽培、營養成分分析、液體培養以及菌絲體內多糖及藥效等方面。1984年，英國阿斯頓大學Bailey?C.J報道雞腿菇含有降血糖的有效成分。1993年，黃年來用雞腿菇水提物濃縮液飼養小鼠，1.5h有明顯降低血糖濃度的效果。2000年，王玉萍等利用深層發酵方法獲得獲得富鉻雞腿菇發酵液，進行急性毒性試驗，并對四氧嘧啶誘發的小鼠糖尿病模型做了降血糖試驗。2002年，韓春超等研究了雞腿菇發酵液與釩酸鈉協同抑制小鼠血糖升高的作用。目前已經公布的雞腿菇的8項專利主要是雞腿菇的栽培和雞腿菇多糖的提取以及雞腿菇菌絲的棘狀小球結構及其應用。

本發明與上述文獻或相關專利區別在于本發明側重于雞腿菇轉化桑葉，通過雞腿菇在培養過程中與桑葉相互作用提高降血糖作用，雞腿菇轉化桑葉產生的培養液中多酚類化合物的提取方法以及這種培養液和多酚類化合物在預防和治療糖尿病方面的應用。

發明內容

本發明的一個目的是提供了一種以雞腿菇為菌種通過液體深層培養轉化桑葉的方法，由該培養方法制備的雞腿菇轉化桑葉的發酵液，該發酵液具有調節血糖，預防和治療糖尿病及其并發癥的功效。

本發明所使用的雞腿菇菌種可選用任意一種雞腿菇菌種，例如河南、河北、江蘇或山西的野生雞腿菇經常規組織分離得到的菌種。本發明含有雞腿菇轉化桑葉的生產工藝包括以雞腿菇為出發菌株，以桑葉為原料，進行液體搖瓶培養、一級種子培養和發酵培養，得到雞腿菇轉化桑葉的發酵液。

更具體地，本發明涉及雞腿菇以桑葉為原料進行深層培養的生產工藝包括以下步驟：

(1)在本發明所述的發酵工藝中，在進行發酵培養之前，首先將雞腿菇的斜面菌種接入新配制的斜面培養基中進行活化培養，培養溫度20～35℃，培養時間72～240小時；其中所述的斜面培養基是現有技術中常用的斜面培養基，例如常用的是PDA培養基，此類培養基的組成和所用可參見諸葛健，王正祥，工業微生物實驗技術手冊，1994：P?367；