[發明專利]一種天然高純科羅索酸和山楂酸及其制備方法

無效

• 申請號: 200810019922.1
• 申請日: 2008-03-14
• 公開（公告）號: CN101240008A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發明（設計）人: 陳龍勝;呂楊;昕旸;許舒雯
• 申請（專利權）人: 安徽省分析測試中心
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;A61K36/73
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司
• 代理人: 何梅生

一、技術領域

本發明涉及一種植物中草藥的活性成分及其制備方法，具體地說是一種天然高純科羅索酸和山楂酸及其制備方法。

二、背景技術

枇杷葉為薔薇科植物枇杷(Eribotrya?japonica(Thunb)Lindl)干燥葉，是常用中藥材之一，具有化痰止咳、降氣和胃之效，常用于支氣管炎、肺熱咳嗽。在我國的華東、中南、西南等地區廣泛種植。

隨著枇杷葉藥用成分研究的深入，發現枇杷葉中三萜酸成分豐富，其中含有的科羅索酸具有降血糖、減肥、抗腫瘤和抗炎作用，山楂酸具有抗腫瘤、抗病毒和抗心血管疾病作用。國內已有文獻報道枇杷葉總三萜酸成分的制備及其在降血糖、抗炎、止咳藥物中的應用的專利。

CN1439648A公開了一種枇杷葉總三萜酸組分為烏蘇酸、2α-羥基烏蘇酸、2α-羥基齊墩果酸、齊墩果酸、坡模酸和薔薇酸。其制備首先用95％乙醇回流提取、脫溶得到浸膏，然后依次用D101大孔吸附樹脂處理和中性A203柱層析。該總三萜酸具有抗炎、止咳等藥理作用。

CN1640885A公開了一種枇杷葉總三萜酸主要含熊果酸、齊墩果酸、可樂酸和2α-羥基齊墩果酸。其制備首先用乙醇或甲醇回流提取、脫溶后得到浸膏，用沸水洗滌除去水溶性成分，濾渣經洗滌、乙醇復溶、活性炭脫色最后脫去乙醇。該總三萜酸可用于防治糖尿病。

CN1634971A公開了以3-羰基熊果酸酯和3-羰基齊墩果酸酯為原料合成科羅索酸和山楂酸的方法，科羅索酸有降血糖、減肥、抗腫瘤和抗炎作用，山楂酸有抗腫瘤、抗病毒和抗心血管疾病作用。

US6485760、US6716459和US20040072906公開了大花紫薇(Largetroernia?Speciosa?L.)為原料制備含有科羅索酸醫藥原料的工藝及其在治療II型糖尿病和肥胖癥中的應用。

三、發明內容

本發明旨在提供一種可供藥用的天然高純的科羅索酸和山楂酸，所要解決的技術問題是自枇杷葉中直接制備高純的科羅索酸和山楂酸。

本發明所稱的天然高純科羅索酸和山楂酸是自枇杷葉中提取、然后分離得到的兩種五環三萜酸，與現有技術的區別是科羅索酸的含量80.0～99.2％(w/w)，山楂酸的含量80.0～99.2％(w/w)。

科羅索酸和山楂酸有以下化學通式：

當R1＝CH₃，R2＝H為山楂酸，

當R1＝H，R2＝CH₃為科羅索酸。

科羅索酸和山楂酸的制備方法，以枇杷葉為原料，包括乙醇或甲醇水溶液的回流提取、分離、濃縮、脫色、干燥和后處理，所述的回流提取是使用濃度為45～80％(w/w)的乙醇或甲醇水溶液回流提取，分離得到提取液，與現有技術的區別是提取液濃縮時控制濃縮比，即濃縮至原提取液體積的5～50％，優選10～30％，然后冷卻靜置、分離、洗滌，將濾渣溶于乙醇或甲醇后活性炭脫色，過濾分離，濾液脫溶后得到中間產物，呈淡黃色粉末狀，中間產物是主要含科羅索酸和山楂酸的三萜酸。所述的后處理就是對中間產物用柱色譜分離、洗脫液洗脫，分別收集含科羅索酸和山楂酸的洗脫液，脫溶后分別得到白色粉末狀的科羅索酸，純度80.0～99.2％，以及山楂酸，純度80.0～99.2％。色譜柱填料(固定相)選自正相硅膠或氧化鋁，或者反相硅膠C₈或C₁₈，當選擇正相硅膠色譜柱時，洗脫液為石油醚和乙酸乙酯，混合比1∶0～0∶1(v/v)；當選擇反相硅膠色譜柱時，洗脫液是pH值為2～7的75～95％(w/w)的乙醇水溶液或甲醇水溶液。優選pH值為3～6的75～95％(w/w)的乙醇水溶液或甲醇水溶液。

具體操作過程如下：

(1)用乙醇或甲醇含量大于45％(w/w)乙醇或甲醇水溶液回流提取，粉碎后枇杷葉與溶劑質量比為1∶6至1∶12，提取次數1至3次，每次1至5個小時；

(2)濾出提取液，減壓濃縮，控制濃縮液為原提取液體積的0.05～0.5倍，冷卻12h過濾，用10～15倍重蒸餾水洗滌濾渣；

(3)將洗滌后的濾渣用乙醇或甲醇溶解，加0.05至0.20倍重活性碳，于85℃下回流脫色20分鐘，乘熱過濾，將濾液蒸干，得到淡黃色粉末的中間產物；

(4)將淡黃色粉末進行固定相為正相硅膠、氧化鋁或反相C8、C18硅膠柱色譜分離，正相色譜洗脫方式為石油醚與乙酸乙酯混合體系梯度洗脫(1∶0～0∶1)，反相色譜洗脫方式為加酸調整pH值為2～7的乙醇-水或甲醇-水等度洗脫，洗脫劑中水含量小于30.0％。