[發明專利]黃褐毛忍冬總次級皂苷部位、其制備方法及抗腫瘤用途

無效

• 申請號: 200810019284.3
• 申請日: 2008-01-18
• 公開（公告）號: CN101229212A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發明（設計）人: 李萍;陳君;湯丹
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K36/355
• 分類號: A61K36/355;A61P35/00;A61K133/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司
• 代理人: 孫立冰

技術領域

本發明涉及天然藥物領域，具體涉及黃褐毛忍冬花蕾總次級皂苷部位及其在制備抗腫瘤藥物中的新用途。

背景技術

惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的重大疾病之一。盡管隨著現代生命科學的飛速發展，抗腫瘤藥物的研發與應用取得重要進展，某些類型腫瘤的化療取得突出的療效；但是，目前對于大多數類型腫瘤，特別是對于發病率較高的實體性癌瘤的藥物治療效果仍難以令人滿意，發現與研究新型有效的抗腫瘤藥物具有極其迫切的需要。自然界植物資源豐富，是研制抗腫瘤新藥的重要來源。目前用于臨床的抗腫瘤藥物中，來源于植物的約占1/3，包括了植物的原形成分和它們的衍生物如長春堿類、三尖杉酯堿類、鬼臼毒素類、喜樹堿類、紫杉醇等。相對于人工合成的化學藥物，這些天然來源的有效成分以其毒性較低的優點在腫瘤治療中得到了大量的應用。

黃褐毛忍冬為忍冬科忍冬屬植物Lonicera?fulvotomentosa?Hsu?et?S.C.Cheng的干燥花蕾。其藥材來源是20世紀70年代后期在黔西南州發現的忍冬屬植物新種，為中國特有植物種類，主要分布于貴州、廣西、云南三省且資源豐富。黃褐毛忍冬花蕾具有清熱解毒、涼散風熱等功效，在民間已有5代人以上的藥用歷史，主要用于治療肝炎、胃病、感冒等，并有解酒的功效。黃褐毛忍冬系貴州省地方標準品種，也為貴州、廣西等地區金銀花商品藥材主流品種之一，已被納入2005年版《中國藥典》增補版，被列為山銀花藥材基源植物之一。

黃褐毛忍冬花蕾中富含常春藤皂苷類成分，含量高達約20％。對黃褐毛忍冬皂苷類成分的藥學研究開展得并不多。其中報道黃褐毛忍冬皂苷類成分具有良好的保肝(時京珍，劉耕陶.藥學學報，1995，30(4)：311)、抗炎(劉杰，夏琍，陳秀芬.中國藥理學報，1988，9(3)：395.)等藥理活性。發明人前期在對黃褐毛忍冬花蕾的化學成分研究中，分離得到一個新化合物3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-a-L-吡喃阿拉伯糖基-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷，命名為黃褐毛忍冬皂苷乙(fulvotomentoside?B)，該化合物可作為前藥轉變為具有抗腫瘤活性的常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷(專利申請號200710135566.5)。

發明內容

黃褐毛忍冬總皂苷儲量豐富，該部位在藥材中含量高達約20％，但其活性并不明確。發明人通過堿水解將大量存在于黃褐毛忍冬花蕾中沒有抗腫瘤活性的總皂苷轉變成具有強抗腫瘤活性的提取物，稱為黃褐毛忍冬總次級皂苷。發明人在研究中發現，當將黃褐毛忍冬總皂苷進行堿水解后，僅水解其皂苷中28位糖酯鍵而不破壞3位糖鏈，克服了酸水解目的性差、產物復雜、分離純化困難的缺點，制備工藝簡便易行，產物得率及純度高。本發明制備的抗腫瘤活性提取物，具有來源充足、成本低、適合工業化生產的優點，擁有關闊的市場前景和開發價值。

黃褐毛忍冬總皂苷可以用現有文獻報道的方法得到，也可以用以下方法制備：以黃褐毛忍冬干燥花蕾為原料，乙醇回流提取，減壓濃縮，過濾或高速離心，濾液或離心上清液上大孔樹脂柱，以乙醇-水系統梯度洗脫，合并50～70％乙醇洗脫液，減壓蒸干即得。

上述提取用乙醇濃度優選30～90％，本發明中乙醇濃度均為體積百分比。

上述大孔樹脂優選自D101、AB-8、HPD100、HPD300或D1型大孔樹脂。

本發明中所述的堿水解方法可以是化學上常用的水解方法，所用的堿優選氫氧化鉀或氫氧化鈉。

本發明優選的堿水解方法包括：黃褐毛忍冬總皂苷提取物和1～10％氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液于水浴中溫熱或回流反應，冷卻后加酸調pH值至3～6，然后用水飽和的正丁醇萃取，回收正丁醇至稠膏，冷凍干燥，即得。

水解時氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液的量優選黃褐毛忍冬總皂苷提取物重量的2～20倍。

優選的制備本發明黃褐毛忍冬總次級皂苷的方法如下：

1)以黃褐毛忍冬干燥花蕾為原料，以30～90％乙醇回流提取2～4次，每次3～5小時，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，過濾或高速離心，濾液或離心上清液上大孔樹脂柱充分吸附后，以乙醇-水系統梯度洗脫，合并50～70％乙醇洗脫液，減壓蒸干，得到黃褐毛忍冬總皂苷提取物。該提取物中總皂苷含量≥50％。

2)將1重量份黃褐毛忍冬總皂苷和2～20重量份1～10％氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液，于20～100℃水浴中溫熱或回流進行反應0.5～10小時。