[發(fā)明專利]一種條斑紫菜多糖和蛋白同步超聲波輔助提取方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810018871.0
• 申請(qǐng)日: 2008-01-29
• 公開（公告）號(hào): CN101225119A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡秋輝;楊方美;安辛欣;朱曉君;高軍;辛志宏;趙立艷;李華佳;顧衛(wèi)明;顧俊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué);南通天福海苔水產(chǎn)有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;C07K1/14;C07K14/405
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 張素卿

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明一種條斑紫菜多糖和蛋白同步超聲波輔助提取方法，屬于海洋生物技術(shù)，用于研制開發(fā)醫(yī)藥保健品和功能食品的基料。

二、背景技術(shù)

海洋生物資源豐富、種類繁多、數(shù)量龐大，呈現(xiàn)原始性和多樣性特點(diǎn)。海洋生物活性物質(zhì)結(jié)構(gòu)新穎、功能獨(dú)特是當(dāng)今世界科學(xué)新藥研究開發(fā)和現(xiàn)代醫(yī)藥保健品開發(fā)研究的活躍領(lǐng)域，美國(guó)國(guó)立腫瘤研究所每年篩選3萬(wàn)個(gè)新的抗癌化合物，有5％來自海洋生物。迄今海洋生物中已發(fā)現(xiàn)3000余種新型活性物質(zhì)，其中包括生物堿類、萜類、大環(huán)聚酯類、肽類、聚醚類、及多糖類等化合物。美國(guó)、加拿大和日本均制定了開發(fā)利用海洋生物研究計(jì)劃，廣泛開展了對(duì)海洋生物活性物質(zhì)的篩選。近30年來，海洋天然產(chǎn)物化學(xué)的研究取得了令人注目的成果，從種類豐富的海洋生物中分離出許多結(jié)構(gòu)新穎、功能獨(dú)特，具有抗病毒、抗菌、抗腫瘤和抗突變、抗心血管病的生物活性物質(zhì)。

對(duì)海洋生物活性物質(zhì)的研究，已展現(xiàn)出誘人的前景，尤其在抗癌、抗腫瘤、抗病毒、抗炎，以及作用于神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)等方面。從海洋生物體內(nèi)獲取有功效的初生代謝產(chǎn)物與次生代謝產(chǎn)物，可發(fā)展海洋天然藥物，也可開發(fā)海洋生物保健品、海洋功能食品。利用海洋生物活性物質(zhì)新穎的結(jié)構(gòu)作為先導(dǎo)物，可設(shè)計(jì)合成治療疑難病的創(chuàng)新藥物。當(dāng)前醫(yī)藥保健品發(fā)展趨勢(shì)，將由陸地轉(zhuǎn)向海洋，從海洋生物資源中開發(fā)研究醫(yī)藥保健品和功能食品潛力巨大。海洋生物抗腫瘤研究院(National?Cancer?Institute)從世界不同海域采集的各種海洋生物進(jìn)行了篩選，發(fā)現(xiàn)海藻、苔蘚蟲、海兔、海綿、海鞘中某些活性成分可望研究成新穎的海洋藥物和海洋食品。但海洋生物中活性物質(zhì)一般都以微量形式存在，從而限制了其獲取和生產(chǎn)，因此其獲取和生產(chǎn)的可能性一直是未來實(shí)際應(yīng)用的難點(diǎn)。

海藻多糖是從海藻中提取的大分子糖類，目前研究最多的品種有褐藻膠、瓊膠、卡拉膠等，它們?cè)谑称贰⑨t(yī)藥、生物工程等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，如用于固定化細(xì)胞及固定化酶載體的褐藻膠和瓊膠。已開發(fā)出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的貼壁素、傷口粘合劑等產(chǎn)品。海藻中的藻膽蛋白是藻類吸收光能進(jìn)行光合作用的一種重要捕光色素蛋白。藻膽蛋白用途廣泛，即可用作天然色素廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、染料等工業(yè)，又可制成熒光試劑，用于臨床醫(yī)學(xué)診斷和免疫化學(xué)及生物工程領(lǐng)域。

海洋生物活性物質(zhì)研究過程中，分離提取是最關(guān)鍵的步驟之一。盡管多糖的種類繁多，但其提取分離的方法基本相同。動(dòng)植物多糖及微生物胞內(nèi)多糖的組織細(xì)胞多有脂質(zhì)包圍，一般需要先進(jìn)行脫脂處理，絕大多數(shù)采用溶劑浸泡提取，而超臨界流體萃取(SFE)技術(shù)是近十余年來發(fā)展起來的一種新型化工提取分離技術(shù)，與傳統(tǒng)的溶劑萃取法相比，具有傳質(zhì)速度快、滲透能力強(qiáng)、溶解萃取效率高、提取溫度低、無溶劑殘留、無污染、操作方便、快速、低廉的優(yōu)點(diǎn)，適合于熱敏性成分的提取。目前，已用于進(jìn)行海洋微藻脂溶性成分提取的研究。目前海洋藻類多糖和蛋白的提取都采用分別提取的方法，多糖提取目前采用較多的方法有勻漿法、凍融破碎法和超聲波破碎法等再結(jié)合熱水浸提；藻膽蛋白由于在40℃時(shí)就發(fā)生變性，所以提取方法一般用反復(fù)凍融法、化學(xué)試劑處理法、溶脹法等，而超聲波破碎法產(chǎn)生熱量少，耗時(shí)短，抽提率高，故在實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)中運(yùn)用都較多。本發(fā)明在考慮藻膽蛋白的變性溫度的基礎(chǔ)上，采用超聲波輔助提取和熱水浸提結(jié)合的方法，同步提取多糖和蛋白，減化了操作步驟，提高了生產(chǎn)效率。

三、發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題

本發(fā)明的目的是提供一種紫菜多糖和蛋白同步超聲波輔助提取方法。該方法簡(jiǎn)便，成本低廉，易得。所提取的紫菜多糖得率、蛋白純度較高。

技術(shù)方案

一種條斑紫菜多糖和蛋白同步超聲波輔助提取方法，其特征在于：

(1)對(duì)紫菜原料進(jìn)行粉碎，過40目的篩網(wǎng)；

(2)用超臨界CO₂萃取的方法，對(duì)原料進(jìn)行脫脂預(yù)處理，萃取條件：萃取壓力31MPa，溫度50℃，萃取3小時(shí)，分離壓力5.6MPa，溫度55℃；

(3)稱取脫脂后的紫菜粉，加入50倍體積純水混勻，用超聲波細(xì)胞破碎儀于880W破碎60min，超聲時(shí)間/間隙時(shí)間為5/6秒，再于30℃水浴4小時(shí)；對(duì)水浴后的紫菜液進(jìn)行三氯乙酸除蛋白，4倍體積乙醇沉淀多糖，冷凍干燥，得紫菜多糖；對(duì)上清液用飽和度為45％的硫酸銨沉淀，得到紫菜藻膽蛋白。

有益效果

本發(fā)明采用超聲波破壁、熱水浸提相結(jié)合的方法，一步從紫菜中同時(shí)提取紫菜多糖和藻膽蛋白，方法簡(jiǎn)便，成本低廉，多糖提取率，蛋白純度高，本發(fā)明的創(chuàng)新在于：