[發明專利]一種完全利用木質纖維素生產富馬酸的方法

有效

• 申請號: 200810018773.7
• 申請日: 2008-01-23
• 公開（公告）號: CN101225412A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發明（設計）人: 黃和;李霜;高振;劉寧;何皓
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C12P7/46
• 分類號: C12P7/46;C12R1/645
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 汪旭東

1.一種將木質纖維素的降解液完全利用于微生物發酵生產富馬酸的方法，其特征在于以兩步法降解木質纖維素步驟得到的兩步降解液為原料，將降解半纖維素得到的木糖溶液配制成種子培養基用于種子培養步驟的同時，再將降解纖維素的產物葡萄糖溶液配制成發酵產酸培養基用于發酵產富馬酸步驟，實現完全利用木質纖維素發酵生產富馬酸的目的。

2.根據權利要求1所述的兩步法降解木質纖維素的方法，其特征在于首先降解木質纖維素中的半纖維素得到木糖以供種子培養步驟，再降解木質纖維素中的纖維素得到葡萄糖以供發酵產富馬酸步驟。

3.根據權利要求1所述的配制種子培養基的步驟，其特征在于稱量一定量的半纖維素降解液稀釋或濃縮成濃度為10～40g/L的木糖溶液，加入種子培養必需的營養物質，配制成種子培養基，將種子培養基在115～121℃的高溫下滅菌15～30分鐘，冷卻。

4.根據權利要求3所述的配制種子培養基的步驟，其特征在于加入的種子培養必需的營養物質為(NH₄)₂SO₄1.5～3g/L，酵母膏0～4g/L，玉米漿0～5mL/L，KH₂PO₄0.1～1g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1～1g/L，ZnSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，FeSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，瓊脂0～3g/L，添加中和劑控制pH為4～6.5。

5.根據權利要求4所述的配制種子培養基的步驟，其特征在于所添加的中和劑為H₂SO₄或HCl。

6.根據權利要求1所述的種子培養步驟，其特征在于按照1％～5％的接種量接入配置好的霉菌孢子懸浮液，置于溫度為30～35℃，培養18～42小時后的種子液備用以發酵產富馬酸。

7.根據權利要求1所述的配制發酵產酸培養基的步驟，其特征在于將降解纖維素后得到的葡萄糖降解液濃縮至80～120g/L，加入霉菌種子液發酵產酸必需的營養物質，配制成發酵產酸培養基，將發酵產酸培養基在115～121℃的高溫下滅菌15～30分鐘，冷卻。

8.根據權利要求7所述的配制發酵產酸培養基的步驟，其特征在于加入的發酵產酸培養基所需要的營養物質為(NH₄)₂SO₄0～3g/L，酵母膏0～1g/L，KH₂PO₄0.1～1.0g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1～1.0g/L，ZnSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，FeSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，通過向培養基中添加中和劑控制pH為3.0～6.0。

9.根據權利要求8所述的配制發酵產酸培養基的步驟，其特征在于所添加的中和劑為CaCO₃、Ca(OH)₂、NaOH或NaHCO₃。

10.根據權利要求1所述的發酵產富馬酸的步驟，其特征在于量取種子培養得到的種子液，按照10％～30％的接種量接入發酵產酸培養中，置于溫度為30～35℃，發酵培養60～96小時，得到富馬酸。