[發明專利]一種治療雄激素源性禿發藥物的制備方法及其在臨床中的應用

無效

• 申請號: 200810017818.9
• 申請日: 2008-03-21
• 公開（公告）號: CN101537018A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 羅洋;郝飛;葉慶佾
• 申請（專利權）人: 羅洋
• 主分類號: A61K35/36
• 分類號: A61K35/36;A61K9/19;A61P17/14;A61P5/26;C12N5/08
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司
• 代理人: 馬正良

技術領域

本發明涉及一種藥物的制備方法，特別是涉及一種治療雄激素源性禿發藥物的制備方法及其在臨床中的應用。

技術背景

雄激素源性禿發是中老年女性臨床常見的一種疾病，目前還沒有一種有效治療方法。由于生活節奏的加快，雄激素源性禿發還有進一步升高的趨勢。

一般認為，人毛乳頭細胞(dermal?papilla?cells，DPC)在毛囊的發育及周期性生長調控中起重要作用。要闡明人毛乳頭細胞對調節毛囊生長和發育的機制，必須從人毛乳頭細胞自身分泌的生物活性成份著手，這也是今后毛囊研究的重要內容之一。本發明在建立人毛乳頭細胞體外培養模型基礎上，應用1、2代人毛乳頭細胞的培養上清制成條件培養基，觀察其對不同傳代的人毛乳頭細胞生長狀態的影響，發現人毛乳頭細胞條件培養液(dermal?papilla?cellconditional?medium?DPCCM)能將非凝集生長的人毛乳頭細胞有效誘導為凝集性生長狀態，并促進細胞增殖。為進一步分析人毛乳頭細胞生長活性蛋白的體內生物學活性，本發明將人毛乳頭細胞條件培養液制成凍干粉，初步應用于雄激素源性禿發患者，發現其有改善雄激素源性禿發的治療效果。

發明內容

鑒于上述，本發明的目的在于提供一種治療雄激素源性禿發藥物的制備方法。

本發明的另一目的在于雄激素源性禿發藥物在臨床中的應用。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現：

一種用基礎培養基培養的1、2代人毛乳頭細胞的培養上清液在制備治療雄激素源性禿發藥物，其特征在于所述基礎培養基按15ml人AB型血清與85ml低糖DMEM培養基，0.24gHepes，0.2g碳酸氫鈉，0.03g?L-谷氨酰胺的配比構成。

本發明的優點和產生的有益效果是：

人毛乳頭細胞為分泌性細胞，在體外培養時可分泌許多蛋白質，這些蛋白質可促進毛囊的生長和發育，在體外實驗我們已證明其有確切的生物學活性，但其應用于臨床治療雄激素源性禿發還未見報道，我們在原有的培養人毛乳頭細胞的基礎上，改進其培養基，用人AB型血清替代小牛血清，成功地培養出人毛乳頭細胞，我們收集培養過1、2代人毛乳頭細胞的基礎培養基，用于臨床治療雄激素源性禿發，觀察其治療效果，發現有確切的治療作用，取得了良好的經濟效益和社會效益。

應用本發明制備的藥物在治療雄激素源性禿發中有明顯的療效，本藥物所用細胞和培養血清均對人體均無抗原性，用于人體無任何過敏反應，本發明用含人AB型血清的基礎培養基培養人毛乳頭細胞，較以前用小牛血清培養人毛乳頭細胞在技術上取得了突破，為本藥物應用于臨床奠定了基礎，這也是本發明關鍵技術的核心所在。此外，本發明所用藥物為皮下注射，其有效藥物利用度大大提高，其制備工藝十分考究，實用性強，能為廣大患者服務。

附圖說明

圖1為本發明對雄激素源性禿發治療前示意圖

圖2為本發明對雄激素源性禿發治療后示意圖

具體實施方式

本發明藥物的制備方法及其臨床應用是通過以下步驟來實現的：

(1).試劑和材料

低糖DMEM培養基：購自Sigma公司。Hepes：購自Boehringer?Mannheim公司。健康人AB型血清：第三軍醫大學西南醫院輸血科提供。

(2).藥物制備的方法

2.1基礎培養基的制備：

2.1.1人AB型血清的制備

a)采集健康獻血員(經查排除HIV、HBV、HCV、梅毒螺旋體感染)全血200ml入無抗凝劑的血袋；

b)將全血血袋37℃水箱中放置1小時；

c)2000rpm離心30分鐘；

d)用血清分離器分離人AB型血清，所分離的人AB型血清可放入-20℃；

e)將人AB型血清袋從-20℃冷凍箱中取出，放入4℃冷藏箱中12小時；

f)將人AB型血清室溫放置2小時；

g)將人AB型血清在37℃水箱中放置1小時；

h)將人AB型血清在56℃水箱中放置1小時去除補體，其上下溫差應小于0.5℃；

i)在超凈臺上用2％碘酊消毒血清袋出液管5分鐘，空干；

j)用已消毒好的剪刀剪去封口帽，將血清倒入已消毒好的100ml瓶中；

k)用吸管分裝為15ml/瓶，-20℃凍存備用。

上述人AB型血清制備的步驟也可為：

a)采集健康獻血員全血200ml入無抗凝劑的血袋；

b)將全血血袋37℃水箱中放置1小時；

c)2000rpm離心30分鐘；