[發明專利]一種醫學組織切片染色方法

無效

• 申請號: 200810015095.9
• 申請日: 2008-04-10
• 公開（公告）號: CN101251449A
• 公開（公告）日: 2008-08-27
• 發明（設計）人: 李莉;胡志敏;徐軍;胡維誠;陳融;李瑞峰
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 濟南圣達專利商標事務所
• 代理人: 王書剛

1.一種醫學組織切片染色方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)如果不是冰凍切片，則取石蠟切片，用常規二甲苯脫蠟、系列乙醇水化；如果是冰凍切片直接進入下一步；

(2)將飽和苦味酸75ml、37-40％甲醛25ml和冰醋酸5ml混合均勻制成混合溶液，置于微波爐中，在45℃--55℃加熱45秒，將切片放入加熱后的溶液里10分鐘，取出后流水沖洗10分鐘；

(3)將切片放入5％硫代硫酸鈉溶液中浸泡5分鐘，經蒸餾水沖2-3遍；

(4)將切片放入1％阿爾辛藍溶液內浸泡20分鐘，再用流水沖洗3分鐘；

(5)用95％乙醇90ml和氨水10ml配制成堿性乙醇，將堿性乙醇用微波爐在55℃--65℃下預熱45秒，將切片放入預熱后的溶液里10分鐘，取出后用流水沖洗3分鐘；

(6)將2％蘇木素30ml、氯化鐵溶液40ml和碘溶液20ml混合均勻配制成蘇木素工作液，在避光條件下將切片放入配制的工作液中60分鐘，用流水沖洗片刻，經蒸餾水洗3遍，每遍3分鐘；其中2％蘇木素由蘇木素10g和95％乙醇500ml配制，氯化鐵溶液由氯化鐵12.4g、蒸餾水500ml和濃鹽酸5ml配制，碘溶液由碘10g、碘化鉀20g和蒸餾水500ml配制；

(7)將藏紅花儲存液80ml和酸性品紅儲存液20ml混合均勻配制成藏紅花/酸性品紅工作液，將切片放入藏紅花/酸性品紅工作液1分鐘，取出，經蒸餾水洗3遍，每次3分鐘；其中藏紅花儲存液由猩紅1g、蒸餾水99.5ml和濃冰醋酸0.5ml配制，酸性品紅儲存液由酸性品紅0.1g、蒸餾水99.5ml和濃冰醋酸0.5ml配制；

(8)將切片放入5％磷鎢酸溶液內浸泡5分鐘，直接轉入1％冰醋酸內浸泡5分鐘，再經蒸餾水洗3遍，每次3分鐘；

(9)用95％乙醇脫水1分鐘，100％乙醇脫水2遍，每遍1分鐘；

(10)將切片放入乙醇藏紅花溶液內浸泡7分鐘；通過將藏紅花6g、無水乙醇100ml放入密封瓶內，再放60℃烤箱48小時，冷卻后過濾制成乙醇藏紅花溶液；

(11)用100％乙醇脫水2遍，每遍1分鐘；

(12)用二甲苯透明中性樹膠封存切片。