[發明專利]擴張青霉菌株及其培養方法與應用

有效

• 申請號: 200810014906.3
• 申請日: 2008-03-31
• 公開（公告）號: CN101250484A
• 公開（公告）日: 2008-08-27
• 發明（設計）人: 肖敏;盧麗麗;李玉梅;李正義
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N11/04;C12P19/04;C12R1/80
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司
• 代理人: 許德山

1.擴張青霉F3(Penicillium?expansum?F3)，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?No.2352。

2.一種如權利要求1所述的擴張青霉F3菌株的培養方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)取菌種保藏編號為CGMCC?No.2352的擴張青霉F3菌株，將該菌株接種至新鮮斜面培養基活化40～50小時，溫度為28～30℃，取活化后的擴張青霉F3接種于種子培養液，培養30小時，培養溫度為28～30℃，得初級培養液；

其中，斜面培養基成分如下：葡萄糖3-7g/L，蛋白胨3-7g/L，酵母粉3-7g/L，瓊脂18-22g/L；

種子培養液成分如下：葡萄糖3-7g/L，蛋白胨3-7g/L，酵母粉3-7g/L；

(2)取步驟(1)制得的初級培養液，按1％(v/v)接種量轉接于產酶發酵培養液并置于搖床培養40～42小時，培養溫度為28～30℃，搖床轉速為180轉/分；

其中，產酶發酵培養液成分如下：葡萄糖8-12g/L，蛋白胨8-12g/L，酵母粉8-12g/L，氯化鈉1-5g/L。

3.如權利要求1所述的擴張青霉F3菌株在生產低聚半乳糖中的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，先利用擴張青霉F3菌株制備低聚半乳糖生產用固定化酶，再利用該固定化酶生產低聚半乳糖，具體步驟如下：

(1)將產酶發酵培養液培養后的擴張青霉F3抽濾，獲得菌細胞；

(2)將菌細胞按質量體積比1∶1的比例懸浮于pH6.4、50mM的磷酸緩沖液中，進行凍融處理；

(3)將步驟(2)凍融處理后的細胞懸液與3％(w/w)海藻酸鈉溶液以質量體積比1∶2的比例充分混合，滴入3％(w/w)氯化鈣溶液中，在4℃硬化，即得低聚半乳糖生產用固定化酶；

(4)將低聚半乳糖生產用固定化酶按質量體積比1∶2的比例與濃度為350g/L～400g/L的乳糖溶液混合，50℃反應30～36小時，將溶液傾出，即獲得低聚半乳糖溶液，通過高效液相色譜分析低聚半乳糖產量；將固定化酶置于新的濃度為350g/L～400g/L乳糖溶液中，在相同的反應條件下重新合成低聚半乳糖并分析低聚半乳糖產量。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟(4)中，乳糖溶液濃度為380g/L。

6.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟(4)中，反應時間為30小時。